[目的]探討腺病毒介導(dǎo)共表達(dá)人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（bone morphogenetic protein 2,BMP2）和血管內(nèi)皮生長因子165（vascular endothelia growth factor 165,VEGF165）載體轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合納米羥基磷灰石/聚酰胺66（nano-hydroxyapatite/polyamide66,n-HA/PA66）體外構(gòu)建組織工程骨的可行性。[方法]采用密度梯度離心法分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）,取第3代BMSCs進(jìn)行細(xì)胞表型鑒定;第3代BMSCs作為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對象,實(shí)驗(yàn)共分2組:Ad-BMP2-VEGF165為實(shí)驗(yàn)組和Ad-GFP為對照組;首先用不同感染復(fù)數(shù)感染BMSCs,并進(jìn)行ELISA和Western blot檢測細(xì)胞h BMP2和h VEGF165的表達(dá);其次將感染后的細(xì)胞接種到n-HA/PA66生物材料上,7 d后掃描電鏡觀察細(xì)胞貼附、生長狀況;同時(shí),7 d后消化收集貼附n-HA/PA66上的細(xì)胞,Western blot檢測貼附生物材料細(xì)胞中... 

【文章來源】：中國矯形外科雜志. 2015,23(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1. 1 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 1. 1 腺病毒載體
        1. 1. 2 生物支架材料
        1. 1. 3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1. 1. 4 試劑器材
    1. 2 方法
        1. 2. 1 BMSCs 分離培養(yǎng)及表型鑒定
        1. 2. 2 腺病毒感染 BMSCs
        1. 2. 3 ELISA 檢測感染后 BMP2 和 VEGF165 表達(dá)
        1. 2. 4 Western Blot 檢測感染中 BMP2 和 VEGF165 表達(dá)
        1. 2. 5 組織工程骨制備
        1. 2. 6 Western Blot 檢測成骨相關(guān)蛋白
        1. 2. 7 堿性磷酸酶活性檢測
        1. 2. 8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2. 1 細(xì)胞形態(tài)觀察和表型鑒定
    2. 2 最佳 MOI 值測定
    2. 3 BMP2 與 VEGF165 蛋白表達(dá)檢測
    2. 4 掃描電鏡觀察結(jié)果
    2. 5 Western Blot 檢測成骨相關(guān)蛋白表達(dá)
    2. 6 ALP 活性測定結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠脊柱融合模型中BBP增強(qiáng)BMP-2的骨誘導(dǎo)作用[J]. 費(fèi)志強(qiáng),熊建義,陳磊,王大平,沈慧勇.  中國矯形外科雜志. 2013(03)
[2]納米羥基磷灰石/聚酰胺66椎體支撐體在脊柱前柱手術(shù)重建中的應(yīng)用[J]. 孫麟,宋躍明,劉浩,劉立岷,龔全,李濤,曾建成,孔清泉,裴福興,屠重棋,段宏.  中國矯形外科雜志. 2011(18)
[3]納米羥基磷灰石/聚酰胺66復(fù)合生物活性人工椎體在胸腰椎爆裂骨折中的應(yīng)用[J]. 蔣電明,權(quán)正學(xué),歐云生,倪衛(wèi)東,梁熙,孟純陽.  中華創(chuàng)傷雜志. 2006(12)
[4]納米羥基磷灰石/聚酰胺66/成骨細(xì)胞/血管內(nèi)皮生長因子165組織工程骨修復(fù)骨缺損再血管化與成骨活性[J]. 趙俊華,孟純陽,蔣電明,安洪,陳國武.  中華創(chuàng)傷雜志. 2011 (09)



本文編號(hào)：3297474