原纖維蛋白1在豬耳軟骨細胞工程化軟骨組織中的表達及作用
發(fā)布時間:2021-07-21 08:12
目的探討原纖維蛋白1(FBN1)在豬耳軟骨細胞工程化軟骨組織中的表達情況,以及過表達FBN1后對軟骨細胞表型和細胞外基質表達的影響。方法取3只長楓雜交豬單側耳廓軟骨,提取軟骨細胞擴增至第2代,以6.0×107/ml的密度(200 μl)接種于直徑為10 mm、厚2 mm的聚羥基乙酸-聚乳酸(PGA-PLA)支架材料上,體外培養(yǎng)5周,構建9塊細胞材料混合物組織塊;將6塊細胞材料混合物植入3只裸鼠體內,每只2塊,培養(yǎng)10周,構建工程化軟骨組織6塊。HE染色分別檢測3塊體外培養(yǎng)5周的細胞材料混合物及裸鼠體內培養(yǎng)10周后的組織工程化軟骨形態(tài);取3塊2 cm×1 cm大小的另一側豬耳軟骨組織及3塊1.0 cm×0.5 cm大小的工程化軟骨組織提取RNA,通過qPCR檢測二者FBN1 mRNA表達差異;取0.5 cm×0.5 cm大小的另一側豬耳軟骨組織及工程化軟骨組織各3塊,利用免疫組織化學染色檢測二者FBN1在蛋白水平的表達及分布差異;在第2代豬耳軟骨細胞中轉染空載體質粒及FBN1過表達質粒,利用實時熒光定量PCR檢測軟骨細胞外基質相關基因的表達變化,實驗重復3次。所得數據用Graph Pad...
【文章來源】:中華整形外科雜志. 2020,36(06)北大核心CSCD
【文章頁數】:8 頁
【參考文獻】:
博士論文
[1]軟骨組織工程種子細胞應用策略及耳廓軟骨組織構建研究[D]. 康寧.北京協和醫(yī)學院 2012
本文編號:3294653
【文章來源】:中華整形外科雜志. 2020,36(06)北大核心CSCD
【文章頁數】:8 頁
【參考文獻】:
博士論文
[1]軟骨組織工程種子細胞應用策略及耳廓軟骨組織構建研究[D]. 康寧.北京協和醫(yī)學院 2012
本文編號:3294653
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