目的探討原纖維蛋白1（FBN1）在豬耳軟骨細(xì)胞工程化軟骨組織中的表達(dá)情況,以及過表達(dá)FBN1后對軟骨細(xì)胞表型和細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)的影響。方法取3只長楓雜交豬單側(cè)耳廓軟骨,提取軟骨細(xì)胞擴(kuò)增至第2代,以6.0×107/ml的密度（200 μl）接種于直徑為10 mm、厚2 mm的聚羥基乙酸-聚乳酸（PGA-PLA）支架材料上,體外培養(yǎng)5周,構(gòu)建9塊細(xì)胞材料混合物組織塊;將6塊細(xì)胞材料混合物植入3只裸鼠體內(nèi),每只2塊,培養(yǎng)10周,構(gòu)建工程化軟骨組織6塊。HE染色分別檢測3塊體外培養(yǎng)5周的細(xì)胞材料混合物及裸鼠體內(nèi)培養(yǎng)10周后的組織工程化軟骨形態(tài);取3塊2 cm×1 cm大小的另一側(cè)豬耳軟骨組織及3塊1.0 cm×0.5 cm大小的工程化軟骨組織提取RNA,通過qPCR檢測二者FBN1 mRNA表達(dá)差異;取0.5 cm×0.5 cm大小的另一側(cè)豬耳軟骨組織及工程化軟骨組織各3塊,利用免疫組織化學(xué)染色檢測二者FBN1在蛋白水平的表達(dá)及分布差異;在第2代豬耳軟骨細(xì)胞中轉(zhuǎn)染空載體質(zhì)粒及FBN1過表達(dá)質(zhì)粒,利用實(shí)時熒光定量PCR檢測軟骨細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)變化,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。所得數(shù)據(jù)用Graph Pad... 

【文章來源】：中華整形外科雜志. 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]軟骨組織工程種子細(xì)胞應(yīng)用策略及耳廓軟骨組織構(gòu)建研究[D]. 康寧.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2012



本文編號：3294653