研究背景及目的:大段骨缺損的治療是骨科臨床面臨的難題,其核心問(wèn)題是難以獲取足量的高活性骨修復(fù)材料。選擇性細(xì)胞滯留技術(shù)（selective cell retention,SCR）是貼近臨床的組織工程骨構(gòu)建策略,提高M(jìn)SCs與材料的粘附效率是提高SCR構(gòu)建的骨移植物成骨活性的關(guān)鍵。脫鈣骨基質(zhì)（demineralized bone matrix,DBM）是臨床常用的SCR富集材料,可通過(guò)增加額外粘附位點(diǎn)、正電荷或表面修飾減少孔徑等途徑來(lái)改善其與細(xì)胞的粘附和骨誘導(dǎo)能力。故我們?cè)O(shè)計(jì)了一個(gè)帶膠原結(jié)合域（CBD）的含IKVAV-cRGD結(jié)構(gòu)域的肽（CBD-IKVAV-cRGD）,修飾基于膠原的DBM,可發(fā)揮各自優(yōu)勢(shì)實(shí)現(xiàn)最大效能。該肽含多個(gè)整合素配體,分別與MSCs高表達(dá)的整合素亞型相結(jié)合,既能提高支架與細(xì)胞特異性粘附又可兼顧成骨誘導(dǎo)能力。方法:（1）選用兼顧MSCs特異性粘附和成骨誘導(dǎo)能力的IKVAV和cRGD肽,再選用可與DBM特異性結(jié)合的CBD,設(shè)計(jì)了CBD-IKVAV-cRGD和對(duì)照組CBD-IKVAV、CBD-cRGD肽的結(jié)構(gòu),并利用固態(tài)合成法及HPLC法等進(jìn)行肽制備、純化和驗(yàn)證,將三組肽修... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

環(huán)境掃面電鏡觀察各肽對(duì)DBM的表觀改性

圖 2-2 環(huán)境掃面電鏡觀察各肽對(duì) DBM 的表觀改性2.2.3 CBD-IKVAV-cRGD 等肽修飾有效性和穩(wěn)定性檢測(cè)使用帶 FITC 熒光標(biāo)記各組肽修飾 DBM，以激光掃描顯微鏡進(jìn)行三維重建，可見(jiàn)修飾所得的復(fù)合材料具有較強(qiáng)熒光，而未經(jīng)修飾的空白 DBM 支架中檢測(cè)不到熒光。而經(jīng)高負(fù)荷的模擬 SCR 的操作后，各組修飾后復(fù)合材料仍帶有較強(qiáng)熒光，進(jìn)一步證明以單純浸漬的方式可以較為穩(wěn)定的修飾 DBM（圖 2-3）。

A： MSCs 的形態(tài) B：成骨誘導(dǎo)分化 C：成軟骨誘導(dǎo)分化 D：成脂誘導(dǎo)圖 3-1 間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化鑒定2）MSCs 的流式鑒定流式細(xì)胞術(shù)鑒定，課題組實(shí)驗(yàn)所用MSCs的陽(yáng)性標(biāo)記均在97%以上，陰性以下，符合國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)制定的基礎(chǔ)鑒定標(biāo)準(zhǔn)[21]。


本文編號(hào)：3293376