混合信號(hào)誘導(dǎo)的大鼠骨髓干細(xì)胞復(fù)合支架成牙的體內(nèi)研究
本文關(guān)鍵詞:混合信號(hào)誘導(dǎo)的大鼠骨髓干細(xì)胞復(fù)合支架成牙的體內(nèi)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:探究經(jīng)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP-2)混合信號(hào)誘導(dǎo)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)與明膠海綿或聚乙烯醇-雙相陶瓷骨(PVA-DCCP)三維(3D)打印支架材料復(fù)合在體內(nèi)環(huán)境中的成牙潛能。方法:將取自SD大鼠的BMSCs與牙胚細(xì)胞在b FGF和BMP-2混合信號(hào)誘導(dǎo)的微環(huán)境中共培養(yǎng)后分別接種于明膠海綿及3D打印的PVA/DCCP復(fù)合支架材料上,然后回植入同種異體SD大鼠腎被膜下。受試SD大鼠隨機(jī)分為五組:A組-單純信號(hào)(牙胚細(xì)胞)誘導(dǎo)BMSCs/明膠海綿組;B組-混合信號(hào)(牙胚細(xì)胞、bFGF及BMP-2)誘導(dǎo)BMSCs/明膠海綿組;C組-單純信號(hào)誘導(dǎo)BMSCs/PVA-DCCP三維打印支架組;D組-混合信號(hào)誘導(dǎo)BMSCs/PVA-DCCP三維打印支架組;E組-完整牙胚組織。在回植后的第1、3、7、14、28天采集回植物樣本,用實(shí)時(shí)定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)成牙基因成釉蛋白(AMBN)、牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)、?型膠原蛋白(Collagen-?)以及同源異型盒基因1(DLX1)的mRNA水平,用蘇木精-伊紅(HE)染色法觀測(cè)各組樣本的組織學(xué)改變。結(jié)果:RT-PCR定量分析得,除Collagen-?的表達(dá)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加外,AMBN、DMP1、DLX1三個(gè)基因均呈逐漸下降趨勢(shì),各基因在不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量與完整牙胚(E組)均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05)。上述四個(gè)成牙相關(guān)基因的mRNA相對(duì)表達(dá)水平在不同支架材料組之間差異具有顯著性(P㩳0.001);不同成牙信號(hào)組之間對(duì)各個(gè)基因有影響,但不如支架材料明顯。HE染色可見,牙胚組織(E組)植入腎被膜28天后形成大鼠正常磨牙樣形態(tài)結(jié)構(gòu);經(jīng)牙胚細(xì)胞、bFGF及BMP-2混合信號(hào)誘導(dǎo)的BMSCs種植于明膠海綿回植后可形成不完整的類牙樣結(jié)構(gòu)(B組),但與正常牙組織形態(tài)有一定差別;A、C、D組未見明顯的類牙樣礦化組織形成,但在PVA-DCCP三維打印支架組(C、D)組支架材料吸收不完全。結(jié)論:在體內(nèi)模擬環(huán)境下,混合信號(hào)較單純信號(hào)誘導(dǎo)的大鼠BMSCs與支架材料復(fù)合后能夠更快地增殖、分化并強(qiáng)化表達(dá)相應(yīng)的成牙基因,促進(jìn)組織工程牙胚的形成。優(yōu)選支架材料并構(gòu)建合適的組織工程牙模型對(duì)實(shí)現(xiàn)非牙胚源性細(xì)胞向牙源性細(xì)胞方向的轉(zhuǎn)化同樣具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 3D打印 聚乙烯醇-雙相陶瓷骨 組織工程牙
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R783.1
【目錄】:
- 中英文縮略詞對(duì)照表5-7
- 摘要7-9
- ABSTRACT9-11
- 前言11-12
- 研究?jī)?nèi)容與方法12-18
- 1. 實(shí)驗(yàn)儀器及材料12
- 1.1 主要試劑與儀器,見表 112
- 1.2 實(shí)驗(yàn)材料12
- 2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法12-16
- 2.1 實(shí)驗(yàn)分組12-13
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-16
- 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理16-17
- 4. 技術(shù)路線圖17-18
- 結(jié)果18-33
- 討論33-38
- 小結(jié)38-39
- 致謝39-40
- 參考文獻(xiàn)40-42
- 綜述42-50
- 參考文獻(xiàn)46-50
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文50-51
- 導(dǎo)師評(píng)閱表51
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