大量研究表明神經(jīng)導(dǎo)管中添加神經(jīng)生長因子（NGF）組分能夠明顯促進(jìn)受損神經(jīng)的形態(tài)和功能恢復(fù)。用生物相容性良好,體內(nèi)降解性能優(yōu)異的材料作為基材復(fù)合神經(jīng)生長因子是常用的緩釋體系制備方法。本實驗即利用自行設(shè)計的RGD接枝的聚（羥基乙酸-L-賴氨酸-乳酸）高分子材料,復(fù)合β-磷酸三鈣、聚乳酸作為緩釋基材,在有機溶劑中物理混合NGF凍干粉制得NGF緩釋材料（PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF）。本論文主要研究RGD復(fù)合材料緩釋的NGF對PC12分化相關(guān)基因的調(diào)控。在體外實驗中,分別采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定材料浸提液中NGF的含量,并通過用第1天浸提液誘導(dǎo)PC12細(xì)胞分化,測量PC12細(xì)胞最大直徑、最長突起長度和突起數(shù)目來觀察其形態(tài)學(xué)上的變化。研究結(jié)果顯示：RGD復(fù)合材料中NGF的釋放分為兩個階段—擴散階段和降解階段；材料在第1天出現(xiàn)NGF的暴釋,第1天浸提液中NGF的濃度約為407.26ng/ml.將第1天浸提液稀釋到100ng/ml NGF濃度處理PC12細(xì)胞3天,形態(tài)學(xué)結(jié)果顯示細(xì)胞最大直徑、最長突起長度和突起數(shù)目與對照組細(xì)胞存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異,出現(xiàn)明顯分化。分別用第1天浸提液... 

【文章來源】：武漢理工大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

神經(jīng)生長因子NGF與神經(jīng)導(dǎo)管復(fù)合的三種途徑原理圖

000」 02030卻〕 〕 CCCyclesss圖1一 3PCR擴增曲線 1.3.3DNA結(jié)合染料(SYBRGreenl) SYBRGreenl是熒光定量PCR最常見的DNA結(jié)合染料，與雙鏈DNA(dsDNA)非特異性結(jié)合。在游離狀態(tài)下， SYBRGreen工發(fā)出微弱的熒光，但一旦與dsDNA結(jié)合，其熒光增加 1000倍。所以，一個反應(yīng)發(fā)出的全部熒光信號與出現(xiàn)的dsDNA量成比例，且會隨擴增產(chǎn)物的增加而增加。DNA結(jié)合染料的優(yōu)點包括:l)實驗設(shè)計簡單(僅需要2個引物，不需要設(shè)計探針);2)無需設(shè)計多個探針即可快速檢驗多個基因;3)低的初始成本(探針成本高);4)能夠進(jìn)行溶解曲線分析檢驗擴增反應(yīng)的特異性。溶解曲線分析可以用來確定不同的反應(yīng)產(chǎn)物

810121416Days圖2一 1PRGD用DLLA/p一TCP加GF復(fù)合材料的NGF體外釋放曲線Elisa實驗結(jié)果顯示(圖2一l)，PRGD用DLL刀p一TCP加GF復(fù)合材料中NGF的釋放主要集中在第1天，每毫克材料釋放的NGF高達(dá) 13.57士 3.56ng。在此之后，NGF的釋放逐漸趨于緩慢，第3天的浸提液中個，每毫克復(fù)合材料釋放的l9

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]鈣離子通過調(diào)節(jié)Rho家族的鳥苷三磷酸酶觸發(fā)神經(jīng)元生長錐轉(zhuǎn)向[D]. 金明.中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院） 2005

碩士論文
[1]RGD復(fù)合材料神經(jīng)生長因子緩釋性能研究[D]. 萬志濤.武漢理工大學(xué) 2009



本文編號：3260679