構(gòu)建組織工程肺（lung tissue engineering,LTE）首先需要獲取理想的組織工程支架,通過種植宿主細(xì)胞,在生物反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng),最后移植到宿主體內(nèi),形成一個具有氣體交換功能的“人工肺”,為肺移植帶來了新的方向,具有光明的前景。理想的去垢劑制備的脫細(xì)胞肺支架（decellularized lung scaffold,DLS）能夠充分的去除肺內(nèi)細(xì)胞,同時最大程度的保留細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）蛋白,無免疫原性,同時提供組織生長的三維（three dimensional,3D）結(jié)構(gòu),這對接下來的體外細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)移植有著重要的意義。傳統(tǒng)的去垢劑如脫氧膽酸鈉（sodium deoxycholate,SDC）和十二烷基硫酸鈉（sodium dodecyl sulfate,SDS）,作用較強(qiáng),ECM蛋白破壞嚴(yán)重,使ECM喪失了天然結(jié)構(gòu)和功能,影響細(xì)胞化和血管化,同時呼吸膜破嚴(yán)重,影響氣體交換。這些去垢劑可能更適于心臟和腎臟等致密器官的脫細(xì)胞,對于肺臟這種結(jié)構(gòu)疏松的器官可能不太適合。新型去垢劑十二烷基醚硫酸鈉（sodium lauryl ethe... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１?Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流系統(tǒng)實物圖，由水浴箱、循環(huán)管路、保溫小室、蠕動栗、壓力控制??系統(tǒng)組成

?博士研宂生學(xué)位論文??臟呈現(xiàn)乳白色（圖２－Ｆ）。圖１－Ｇ為所有灌注完成后，制備的脫細(xì)胞肺支架，可??以看到幾乎呈現(xiàn)白色透明狀。??形態(tài)變化：新鮮肺形態(tài)飽滿、結(jié)構(gòu)緊密。整個脫細(xì)胞的過程中，可以看到灌??注ＳＤＳ后肺臟的形態(tài)明顯膨脹，灌注核酸酶應(yīng)用液后形態(tài)又驟然萎縮、體積變化??劇烈。灌注ＳＤＣ后ｌｈ－２ｈ時肺臟形態(tài)稍微膨脹，制備的脫細(xì)胞肺支架色澤不如??ＳＬＥＳ肺支架透明。灌注ＳＬＥＳ后肺臟的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化不大，制備的脫細(xì)胞肺支架??基本保持了新鮮肺的形態(tài)。（圖２）??稱Ｒｎｎｒａｉ行ｅ??圖２脫細(xì)胞過程實物圖Ａ為新鮮肺；Ｂ為灌注去垢劑０．５ｈ；?Ｃ為灌注去垢劑ｌｈ；?Ｄ為灌注??去垢劑１．５ｈ；?Ｅ為灌注去垢劑２ｈ；?Ｆ為灌注核酸酶應(yīng)用液后；Ｇ為灌注完成，制備的脫細(xì)胞??肺支架；Ｈ為灌注亞甲藍(lán)染液后。??４．?３微循環(huán)網(wǎng)絡(luò)檢測??制備的脫細(xì)胞肺支架，繼續(xù)灌注１％亞甲藍(lán)染料后，可以看到染液在ＳＬＥＳ肺??支架內(nèi)分布均勻，肺內(nèi)毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)清晰可見。ＳＤＳ肺支架內(nèi)的染液分布明顯不??均勻

博士研宄生學(xué)位論文??Ｍａｓｓｏｎ三色染色可見三種脫細(xì)胞肺支架內(nèi)藍(lán)色的膠原纖維保留基本完整，??形態(tài)結(jié)構(gòu)沒有明顯的差異（圖３－１）。染色評分定量結(jié)果顯示：ＳＤＣ肺支架＝２．?００??±０．?７１，ＳＤＳ?肺支架＝１．?８９±０．?６０，ＳＬＥＳ?肺支架＝２．?４４±０．?５３。與新鮮肺相比，ＳＤＣ、??ＳＤＳ、ＳＬＥＳ肺支架染色強(qiáng)度均明顯降低（ｐ＜０．０１，ｐ＜０．０１，ｐ＜０．０１），組間比較??顯示ＳＤＣ肺支架與ＳＤＳ肺支架，ＳＤＣ肺支架與ＳＬＥＳ肺支架均無統(tǒng)計學(xué)差異，ＳＬＥＳ??肺支架染色強(qiáng)度明顯高于ＳＤＳ肺支架（ｐ＜０．?０５）。（圖３－２）??ＥＶＧ染色可見ＳＤＣ肺支架及ＳＬＥＳ肺支架內(nèi)藍(lán)黑色的彈性纖維保留基本完整，??形態(tài)結(jié)構(gòu)接近新鮮肺組織，ＳＤＳ肺支架內(nèi)的彈性纖維含量減少，結(jié)構(gòu)紊亂、肺泡??結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重（圖３－１）。染色評分定量結(jié)果顯示：ＳＤＣ肺支架＝１．５６?土０．５３，?ＳＤＳ??肺支架＝１．３３±０．?５０，?ＳＬＥＳ?肺支架＝２．１１±０．７８。與新鮮肺相比，ＳＤＣ、ＳＤＳ、ＳＬＥＳ??肺支架染色強(qiáng)度均明顯降低（ｐ＜０．?０１

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]灌注法大鼠全肺臟脫細(xì)胞基質(zhì)支架的建立[J]. 黑飛龍,周建業(yè),羅富良,吳蓓,陳蒙蒙,楊勝男,龍村.  北京生物醫(yī)學(xué)工程. 2013 (01)



本文編號：3239738