背景及目的：殼聚糖是一種廣泛存在于自然界的陽(yáng)離子多聚糖，易與帶負(fù)電荷的DNA結(jié)合形成復(fù)合體。自從Mumper等首次報(bào)道了以殼聚糖作為基因載體運(yùn)載質(zhì)粒到細(xì)胞內(nèi)后，殼聚糖及其衍生物作為基因載體便成了研究者們的研究熱點(diǎn)。前期試驗(yàn)在殼聚糖鏈上引入部分疏水烷基鏈，形成烷基化殼聚糖，并在此基礎(chǔ)上引入巰基，提高了殼聚糖的轉(zhuǎn)染率及改善其水溶性。這些載體攜載的基因大多數(shù)都是在較短時(shí)間（72h內(nèi)）瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。但是，某些情況下希望基因被緩慢釋放，從而達(dá)到基因的長(zhǎng)期表達(dá)。本研究制成以羥丁基殼聚糖（HBC）為殼，以巰基烷基化殼聚糖（TACS）包埋基因質(zhì)粒為核的殼核結(jié)構(gòu)，以探討其作為緩釋基因載體的可行性。方法：TACS與增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因（pEGFP）以復(fù)凝聚法制成納米微球作為核結(jié)構(gòu)（TACS/pEGFP），然后與溫敏性HBC混合包裹以及冷凍干燥合成羥丁基殼聚糖-巰基烷基化殼聚糖/pEGFP（HBC-TACS/pEGFP）殼核結(jié)構(gòu)；利用動(dòng)態(tài)光散射儀器、透射電鏡對(duì)核及核殼結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。凝膠電泳試驗(yàn)檢測(cè)復(fù)合基因納米粒子對(duì)pEGFP的攜載以及保護(hù)作用。熒光顯微鏡及激光共聚焦顯微鏡對(duì)HEK293T細(xì)胞和小鼠的骨骼肌進(jìn)行... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
引言
實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
問(wèn)題與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]巰基烷基化殼聚糖載綠色熒光蛋白質(zhì)粒基因納米粒子的制備與研究[J]. 慕卿,趙偉亮,白欣,李樹(shù)寶,盧迪,方月娥,趙宇.  北京生物醫(yī)學(xué)工程. 2010 (01)
[2]新型聚乳酸-羥基乙酸（PLGA）支架的細(xì)胞相容性研究[J]. 胡稷杰,裴國(guó)獻(xiàn),全大萍,金丹,魏寬海,黃愛(ài)文.  中華創(chuàng)傷骨科雜志. 2005(04)
[3]以藻酸鈣為載體的可注射性組織工程軟骨和骨研究[J]. 雷德林,陳書(shū)軍,羊書(shū)勇,楊維東,陳富林,毛天球.  中國(guó)臨床康復(fù). 2002(22)



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