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采用不同種植技術(shù)構(gòu)建組織工程軟骨和組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-11 09:02
  目的:探討采用更有效的細(xì)胞種植技術(shù),體外構(gòu)建組織工程軟骨和組織工程骨,為進(jìn)一步構(gòu)建高質(zhì)量的骨軟骨復(fù)合組織塊修復(fù)骨軟骨組織缺損打下基礎(chǔ)。方法:實(shí)驗(yàn)共分為二部分:第一部分:取一月齡新西蘭兔六只,雌雄不限,體外分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞。分別通過(guò)纖維蛋白凝膠種植技術(shù)(實(shí)驗(yàn)組)及常規(guī)種植方法(對(duì)照組)將收獲的兔第二代的軟骨細(xì)胞以4×107/ml的細(xì)胞終濃度接種50μl于聚乳酸聚羥基乙酸聚合物支架( PLGA:5mm×5mm×2mm)上。體外培養(yǎng)3周。3周后觀察兩組組織工程軟骨的大小﹑形態(tài)﹑質(zhì)地﹑光澤和組織彈性;HE染色法觀察組織工程軟骨細(xì)胞增殖及分布情況;甲苯胺藍(lán)染色法觀察氨基糖胺聚糖(GAG)的分泌及分布狀況,并用1,9二甲基亞甲藍(lán)法定量檢測(cè)GAG的含量;采用Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)法觀察Ⅱ型膠原的分泌,并用image-proplus6.0圖象分析系統(tǒng)對(duì)Ⅱ型膠原染色面積行半定量分析;比色法測(cè)定組織工程軟骨的DNA含量觀察組織工程軟骨的細(xì)胞增殖情況。第二部分:取一月齡新西蘭兔六只,雌雄不限,體外分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增兔關(guān)節(jié)成骨細(xì)胞。分別通過(guò)負(fù)壓接種技術(shù)(實(shí)驗(yàn)組)及常規(guī)種植方法(對(duì)照組)將收獲的兔第二... 

【文章來(lái)源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
縮略語(yǔ)
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 采用纖維蛋白凝膠種植技術(shù)體外構(gòu)建組織工程軟骨的實(shí)驗(yàn)研究
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 采用負(fù)壓吸引種植技術(shù)體外構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究
    引言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
綜述與參考文獻(xiàn)
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]正常人成骨細(xì)胞系的建立及鑒定[J]. 馬文輝,張學(xué)敏,時(shí)述山,李亞非.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(15)
[2]不同頻率周期性壓力對(duì)組織工程軟骨的影響[J]. 張廣程,范衛(wèi)民,馬益民,岳海濤,劉瑞平.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2007(06)
[3]纖維蛋白凝膠種植技術(shù)在組織工程軟骨體外構(gòu)建中的應(yīng)用[J]. 段小軍,楊柳,周躍,陳光興,李忠.  中國(guó)骨與關(guān)節(jié)損傷雜志. 2006(11)
[4]誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的體外研究[J]. 晏杰,劉玲蓉,張其清.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2006(11)
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[6]周期性壓力對(duì)組織工程軟骨的影響及其作用機(jī)制[J]. 范衛(wèi)民,蔡俊.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2006(08)
[7]接種方式對(duì)細(xì)胞在三維材料中接種率和分布的影響[J]. 丁春梅,周燕,譚文松.  生物工程學(xué)報(bào). 2005(04)
[8]應(yīng)力環(huán)境下三維誘導(dǎo)組織工程種植細(xì)胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損[J]. 呂昌偉,胡蘊(yùn)玉,崔玉明,白健萍,廉凱.  中國(guó)矯形外科雜志. 2004(Z1)
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[10]應(yīng)用無(wú)支架離心管培養(yǎng)技術(shù)構(gòu)建組織工程化關(guān)節(jié)軟骨[J]. 楊志明,解慧琪,李勝富,孫愛(ài)民,王躍,鐘亞玲,楊振琳.  中華骨科雜志. 2000(09)



本文編號(hào):3181136

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