組織工程軟骨的體外構建被認為是一種有希望治療關節(jié)軟骨缺損的有效途徑。為評估載脂肪干細胞（Adipose-derived stem cells,ADSCs）殼聚糖/明膠水凝膠支架,在體外動態(tài)構建組織工程軟骨相對傳統(tǒng)靜態(tài)培養(yǎng)的優(yōu)勢,本研究用殼聚糖/明膠制備了軟骨仿生支架,并檢測其物理性質(zhì)。在制備的水凝膠支架上以1×107cells/m L密度接種ADSCs后,分別置于轉瓶及T-瓶的軟骨誘導基中培養(yǎng)兩周,通過試劑染色、代謝檢測和電鏡觀察,考察了細胞的軟骨分化能力、活性、生長分布、滲透深度、增殖及胞外基質(zhì)分泌情況。結果表明,殼聚糖/明膠支架的平均孔徑為118.25±19.51μm,孔隙率為82.60±2.34%,吸水率為361.28±0.47%,彈性模量為61.2±0.16 k Pa,具有良好生物相容性。ADSCs生長狀態(tài)良好,可向軟骨細胞分化,適于作為組織工程軟骨構建的種子細胞。表征結果顯示,轉瓶內(nèi)水凝膠支架中細胞蛋白多糖的表達更顯著,細胞生長分布更加均勻,細胞外基質(zhì)分泌基本填滿整個支架。因此,轉瓶載殼聚糖/明膠支架所提供的三維動態(tài)環(huán)境,是體外構建組織工程軟骨的良好方法。 

【文章來源】：功能材料. 2015,46(15)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1引言
2材料與方法
    2.1材料
    2.2殼聚糖/明膠水凝膠支架的制備
    2.3水凝膠支架物理性能檢測
        2.3.1掃描電鏡觀察支架材料結構
        2.3.2支架的機械強度檢測
        2.3.3支架孔隙率及吸水率檢測
    2.4脂肪干細胞的分離培養(yǎng)及軟骨誘導
    2.5細胞-水凝膠工程化軟骨的構建
    2.6水凝膠支架內(nèi)細胞的代謝分析
    2.7動靜態(tài)環(huán)境中支架內(nèi)細胞軟骨分化檢測
    2.8水凝膠支架的生物相容性檢測
    2.9細胞在水凝膠支架中粘附及滲透情況
    2.10水凝膠支架上細胞的生長分布和基質(zhì)分泌
3結果
    3.1殼聚糖/明膠水凝膠物理性質(zhì)
        3. 1. 1水凝膠孔結構的形態(tài)分析
        3.1.2水凝膠支架的機械強度檢測
        3.1.3水凝膠孔隙率及吸水率
    3.2ADSCs的軟骨分化潛能檢測
    3.3殼聚糖/明膠水凝膠支架中細胞的代謝
    3.4支架內(nèi)細胞軟骨分化檢測
    3.5水凝膠支架的生物相容性
    3.6細胞在水凝膠支架中的粘附及滲透
    3.7水凝膠支架上細胞的生長及基質(zhì)分泌
4討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3172039