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磷酸鹽納米酶的構(gòu)建及細(xì)胞釋放超氧負(fù)離子檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2021-04-29 00:01
  超氧負(fù)離子在生命體新陳代謝過程中具有非常重要的作用,在正常生理情況下,機(jī)體內(nèi)活性氧(ROS)的產(chǎn)生和清除會(huì)維持在一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡。而當(dāng)活性氧濃度失常往往伴隨著疾病的發(fā)生。高濃度的活性氧會(huì)導(dǎo)致DNA和蛋白質(zhì)的氧化損傷,甚至?xí)䦟?dǎo)致癌癥、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病和衰老等。超氧負(fù)離子的快速、可靠、靈敏、實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)于相關(guān)病理研究、疾病診斷和健康篩查具有重要意義。但由于超氧負(fù)離子半衰期短,活性高,易與生物環(huán)境中其他小分子發(fā)生反應(yīng)等問題,要想實(shí)現(xiàn)超氧負(fù)離子實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)極具挑戰(zhàn)。目前檢測(cè)超氧負(fù)離子的方法得到一定的發(fā)展,但仍不足,其中電子自旋共振捕獲法,需要昂貴的設(shè)備和相應(yīng)的捕獲劑。分光光度法操作簡(jiǎn)單,成本低,但檢測(cè)限、靈敏度和抗干擾能力有待提高;瘜W(xué)發(fā)光法是另一種易于操作和快速檢測(cè)的方法,可用于活性氧的痕量分析,然而,它需要開發(fā)一種專用熒光素。熒光光度法可以提供細(xì)胞內(nèi)目標(biāo)分子的時(shí)空信息檢測(cè),但靈敏度和選擇性不足。與上述方法相比,電化學(xué)分析法由于能在復(fù)雜系統(tǒng)中快速進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),被認(rèn)為是最有前途的測(cè)定超氧負(fù)離子的方法。但電化學(xué)分析方法中,構(gòu)建具備生物相容性、高催化活性及靈敏的檢測(cè)平臺(tái),是超氧負(fù)離子原... 

【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 細(xì)胞釋放ROS的生理、病理意義
    1.3 細(xì)胞釋放ROS的檢測(cè)現(xiàn)狀
    1.4 納米酶生物傳感器的構(gòu)建
        1.4.1 生物傳感器的發(fā)展、原理及特點(diǎn)
        1.4.2 納米酶用于傳感的檢測(cè)原理
        1.4.3 納米酶構(gòu)建傳感器的優(yōu)勢(shì)及存在的問題
    1.5 選題依據(jù)及創(chuàng)新點(diǎn)
第2章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 主要試劑與儀器
        2.1.1 試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 材料合成及性質(zhì)表征
        2.2.1 材料的合成方法
        2.2.2 材料性質(zhì)表征
    2.3 電化學(xué)性能測(cè)試
        2.3.1 工作電極的制備
        2.3.2 絲網(wǎng)印刷電極的制備
        2.3.3 實(shí)驗(yàn)裝置
        2.3.4 性能測(cè)試
第3章 靜電紡絲制備FePO_4/rGO-C納米纖維及其超氧負(fù)離子傳感應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 FePO_4/rGO-C納米纖維的制備
        3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞釋放O_2~―·
        3.2.3 物理表征
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 FePO_4/rGO-C和FePO_4/C的物理表征和元素組成分析
        3.3.2 電化學(xué)測(cè)量與分析
        3.3.3 芯片用于細(xì)胞樣品分析
    3.4 結(jié)論
第4章 構(gòu)建納米-Mn_3(PO_4)_2-殼聚糖傳感界面原位檢測(cè)細(xì)胞釋放超氧負(fù)離子
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 制備CTS-Mn_3(PO_4)_2樣品
        4.2.2 材料的物理表征
        4.2.3 電極的制備
        4.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞固定
        4.2.5 CTS-Mn_3(PO_4)_2樣品生物相容性研究(活/死染法)
        4.2.6 電子順磁共振光譜分析(EPR)
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 CTS-Mn_3(PO_4)_2樣品的物理表征及形成機(jī)理分析
        4.3.2 電化學(xué)測(cè)試和分析
        4.3.3 CTS-Mn_3(PO_4)_2樣品的生物相容性
        4.3.4 細(xì)胞粘附在CTS-Mn_3(PO_4)_2樣品上用于原位檢測(cè)活細(xì)胞釋放超氧負(fù)離子
        4.3.5 電子順磁共振光譜(EPR)分析
    4.4 結(jié)論
第5章 類卷曲石墨烯狀BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2納米酶用于超氧負(fù)離子的檢測(cè)
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 制備BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2樣品
        5.2.2 材料的物理表征
        5.2.3 電極的制備
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2樣品的元素分析及物理表征
        5.3.2 電化學(xué)測(cè)試和分析
        5.3.3 CTS-Mn_3(PO_4)_2樣品的生物相容性
        5.3.4 細(xì)胞在BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2樣品上的粘附生長(zhǎng)
    5.4 結(jié)論
第6章 總結(jié)與展望
    6.1 全文總結(jié)
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士在讀期間發(fā)表論文和學(xué)術(shù)交流情況



本文編號(hào):3166430

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