第一部分聚L-谷氨酸/殼聚糖材料在脂肪組織工程中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究目的每年全世界有數(shù)百萬的患者因創(chuàng)傷、腫瘤切除手術(shù)和先天性發(fā)育缺陷等原因會導(dǎo)致的大面積軟組織缺損,大范圍的軟組織缺損是無法自愈的,需要通過手術(shù)進(jìn)行等方法修復(fù)重建。組織修復(fù)重建的主要目的不僅僅是恢復(fù)正常的組織結(jié)構(gòu),更重要的是通過對缺損的修復(fù),恢復(fù)正常的組織功能,減輕患者焦慮、自卑等不良心理。傳統(tǒng)的軟組織修復(fù)重建方法主要包括游離脂肪移植,復(fù)合組織瓣移植或人工合成替代物的植入等方式,它們都存在著各自的缺點(diǎn),如游離脂肪移植成活率低、容易吸收（體積降低40%-60%）；復(fù)合組織瓣移植,對供區(qū)組織損傷大,操作復(fù)雜,不易塑形；人工合成替代物,如硅膠等可能會引起機(jī)體不同程度的排異反應(yīng),長期效果可能不理想。隨著細(xì)胞生物學(xué)與生物材料科學(xué)的發(fā)展,以種子細(xì)胞、支架材料構(gòu)建組織為基本特征的組織工程學(xué)應(yīng)運(yùn)而生,為解決組織乃至器官缺損提供了新的思路。脂肪組織工程的基本策略就是利用種子細(xì)胞與具有生物相容性和生物降解性的生物材料結(jié)合經(jīng)過生長因子誘導(dǎo)構(gòu)建脂肪組織。成功構(gòu)建組織工程化脂肪的關(guān)鍵在于：①種子細(xì)胞的選擇和獲得；②具有良好生物降解性和組織相容性的三維支架... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：174 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
第一部分 聚L-谷氨酸/殼聚糖材料在脂肪組織工程應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究
    前言
    材料
    方法
        一、人脂肪干細(xì)胞體外成脂分化潛能的研究
            1. ADSCs的分離與培養(yǎng)
            2. 流式細(xì)胞術(shù)檢測ADSCs分化群表面抗體的表達(dá)
            3. ADSCs成骨、成脂、成軟骨三向分化性能的鑒定
            4. 油紅O染色及定量
        二、ADSCs于PLGA/CS支架材料體外成脂的研究
            1. PLGA/CS支架材料的制備
            2. ADSCs在PLGA/CS支架材料上的接種
            3. ADSCs在PLGA/CS支架上的粘附與細(xì)胞外基質(zhì)分泌的觀測
            4. DiL熒光標(biāo)記觀測ADSCs在PLGA/CS支架材料上的增殖情況
            5. ADSCs在PLGA/CS支架材料上的生長曲線檢測
            6. PLGA/CS支架材料細(xì)胞毒性的檢測
            7. ADSCs接種于PLGA/CS支架材料后成脂分化的檢測
        三、ADSCs-PLGA/CS復(fù)合物體內(nèi)成脂的研究
        四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    結(jié)果
        一、人脂肪干細(xì)胞體外成脂分化潛能的研究
            1. ADSCs分化群表面抗原的表達(dá)
            2. ADSCs三向分化能力的檢測
            3. ADSCs體外成脂油紅O染色及定量
        二、ADSCs于PLGA/CS支架材料體外成脂的研究
            1. ADSCs于PLGA/CS材料上的粘附、細(xì)胞外基質(zhì)分泌及增值情況的檢測
            2. PLGA/CS支架材料的細(xì)胞毒性檢測
            3. ADSCs接種于PLGA/CS支架材料后的成脂分化的檢測
        三、體內(nèi)脂肪形成及回植物體積的測定
    討論
    小結(jié)
    附圖表
    參考文獻(xiàn)
第二部分 聚L-谷氨酸/殼聚糖支架材料在構(gòu)建膽管癌三維培養(yǎng)模型中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究
    第一節(jié) TGF-β1誘導(dǎo)人膽管癌HCCC9810細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究
        前言
        材料
        方法
            一、HCCC9810細(xì)胞培養(yǎng)及誘導(dǎo)
            二、體外劃痕試驗(yàn)
            三、細(xì)胞免疫熒光染色
            四、real-time PCR
            五、Western blot檢測
            六、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        結(jié)果
            一、TGF-β1誘導(dǎo)HCCC9810細(xì)胞發(fā)生形態(tài)發(fā)生變化,移動能力增強(qiáng)
            二、EMT各指標(biāo)的蛋白水平和mRNA水平的變化
        討論
        小結(jié)
    第二節(jié) 聚L-谷氨酸/殼聚糖支架構(gòu)建三維培養(yǎng)模型及對腫瘤生長及侵襲的影響
        前言
        材料
        方法
            一、HCCC9810細(xì)胞的培養(yǎng)
            二、PLGA/CS支架材料的制備
            三、HCCC9810細(xì)胞接種于PLGA/CS支架材料
            四、HCCC9810細(xì)胞在PLGA/CS支架材料上的粘附和細(xì)胞外基質(zhì)分泌的檢測
            五、DiL熒光標(biāo)記觀測HCCC9810細(xì)胞在PLGA/CS材料表面的增殖情況
            六、DNA標(biāo)記法檢測HCCC9810細(xì)胞于PLGA/CS材料上的生長曲線
            七、real-time PCR對細(xì)胞-材料復(fù)合物的EMT相關(guān)指標(biāo)及TGF-β1的mRNA水平的檢測
            八、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        結(jié)果
            一、HCCC9810細(xì)胞于PLGA/CS材料上粘附和生長增殖情況
            二、PLGA/CS支架為基礎(chǔ)的三維培養(yǎng)模型對HCCC9810細(xì)胞EMT各指標(biāo)及TGF-β1表達(dá)的影響
        討論
        小結(jié)
    附圖表
    參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間主要科研成果
附件1 文獻(xiàn)綜述
附件2 英文文章1
附件3 英文文章2
學(xué)位論文評閱及答辯情況表



本文編號：3129300