目的:本文以模擬天然軟骨發(fā)育過程中間充質(zhì)凝聚階段為目的,探究軟骨發(fā)育過程中細(xì)胞間作用（cell-cell）和細(xì)胞-微環(huán)境相互作用（cell-ECM）對(duì)MSC成軟骨分化的影響。首先,通過體外細(xì)胞微球的構(gòu)建達(dá)到只有cell-cell相互作用的目的;然后,又建立了膠原水凝膠包裹細(xì)胞微球體系,為細(xì)胞微球提供了良好的生物微環(huán)境;最后,通過PLL促進(jìn)N-cadherin基因CDH2表達(dá)的作用,進(jìn)一步探究細(xì)胞間作用（cell-cell）和細(xì)胞-微環(huán)境相互作用（cell-ECM）對(duì)軟骨發(fā)育的協(xié)同作用。方法和結(jié)果:第一部分,我們通過免疫熒光篩選出1ml濃度為50μg/ml的anti-N-cadherin可以封閉4×10⁶個(gè)間充質(zhì)干細(xì)胞。然后,又通過384孔懸滴板成功制備了細(xì)胞微球（MSC microspheres,MMs）。實(shí)驗(yàn)分為兩組:細(xì)胞微球加封閉抗體組（MMA+）,細(xì)胞微球不加封閉抗體組（MMA-）。經(jīng)過兩周的體外培養(yǎng)并分別在1D、3D、7D、14D時(shí)取樣,FDA/PI染色證明兩組細(xì)胞活性良好;定量檢測(cè)了DNA、GAG的表達(dá)量,得出兩組間DNA表達(dá)量差異不大,但GAG/DNA... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

軟骨發(fā)育過程示意圖

天然軟骨形成過程中的事件序列

間充質(zhì)發(fā)育過程中機(jī)械微環(huán)境演變的示意圖


本文編號(hào)：3079703