生物材料的表面性質(zhì)對于調(diào)控細(xì)胞與材料間的相互作用,包括細(xì)胞在生物材料表面粘附、遷移及分化等生物學(xué)行為具有至關(guān)重要的作用。從某種意義上講,生物材料界面就是材料與生命之間的紐帶。如何進(jìn)行生物材料表面功能化、進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞生理功能,對生物材料的研究/設(shè)計(jì)提出了更高的要求。隨著生物材料的發(fā)展,新型生物材料的設(shè)計(jì)被期望具有在分子水平刺激特異性細(xì)胞/基因響應(yīng)的能力,達(dá)到界面調(diào)控細(xì)胞命運(yùn)的目的。在過去幾十年,聚乳酸及鈦材作為植入體,被廣泛地應(yīng)用于臨床治療。然而,聚乳酸及鈦材自身生物相容性差,缺乏誘導(dǎo)組織形成性能,是其臨床應(yīng)用面臨的普遍挑戰(zhàn)。很多諸如感染、移位、異體反應(yīng)、纖維包囊及植入體與骨組織界面的細(xì)胞死亡等因素都可能導(dǎo)致植入失敗�；诰廴樗峒扳伈乃嬖诘膯栴},為了實(shí)現(xiàn)界面調(diào)控細(xì)胞生物學(xué)行為,誘導(dǎo)損傷組織的修復(fù),急需發(fā)展新的研究思路及技術(shù)手段。層層自組裝技術(shù)（Layer-by-Layer assembly technique, LBL）是基于靜電相吸而形成多層膜自組裝體系的技術(shù),是一種簡單而又高效地構(gòu)建生物活性表面的方法。本論文利用層層自組裝技術(shù)并結(jié)合基因釋放/治療,在聚乳酸及鈦材表面構(gòu)建生物活性界面... 

【文章來源】：重慶大學(xué)重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：199 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
主要縮略詞
1 緒論
    1.1 問題的提出及研究意義
        1.1.1 聚乳酸的研究現(xiàn)狀
        1.1.2 鈦材的研究現(xiàn)狀
        1.1.3 聚乳酸及鈦材普遍存在的問題
    1.2 層層自組裝技術(shù)
        1.2.1 層層自組裝技術(shù)的原理及性能
        1.2.2 層層自組裝技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用
    1.3 研究思路及主要研究內(nèi)容
        1.3.1 研究思路
        1.3.2 研究內(nèi)容
    1.4 本文的創(chuàng)新點(diǎn)
2 聚乳酸表面殼聚糖/DNA 多層膜的構(gòu)建
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.2.2 聚乳酸表面殼聚糖/DNA 多層膜的構(gòu)建
        2.2.3 殼聚糖/DNA 多層膜化聚乳酸的表征
        2.2.4 殼聚糖/DNA 多層膜的降解及DNA 的釋放研究
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 紅外光譜檢測
        2.3.2 XPS 表征
        2.3.3 接觸角的檢測
        2.3.4 拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的表征
        2.3.5 多層膜的降解與DNA 的釋放
    2.4 小結(jié)
3 基因功能化聚乳酸表面調(diào)控細(xì)胞特異性/非特異性基因原位 轉(zhuǎn)染及機(jī)理
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備
        3.2.2 材料的制備與表征
        3.2.3 聚乳酸表面GC/pDNA、GP/pDNA 及PEI-CD/ pDNA 多層膜的構(gòu)建
        3.2.4 多層膜的表征
        3.2.5 多層膜的降解與質(zhì)粒DNA 的釋放
        3.2.6 基因活化聚乳酸表面生物相容性檢測
        3.2.7 基因活化聚乳酸表面基因原位轉(zhuǎn)染
        3.2.8 界面介導(dǎo)的基因原位轉(zhuǎn)染機(jī)制研究
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 LA-NHS 酯、GC、GP 及PEI-CD 的合成與表征
        3.3.2 多層膜的表征
        3.3.3 多層膜降解與DNA 的釋放
        3.3.4 細(xì)胞相容性檢測
        3.3.5 材料表面介導(dǎo)細(xì)胞特異性基因原位轉(zhuǎn)染
        3.3.6 材料表面介導(dǎo)基因原位轉(zhuǎn)染的機(jī)制
    3.4 小結(jié)
4 基因活化鈦材表面原位介導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分化
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        4.2.2 質(zhì)粒pEGFP-hBMP2（pGB）的構(gòu)建
        4.2.3 基因活化鈦材表面的構(gòu)建
        4.2.4 鈦材表面殼聚糖/pGB 多層膜的表征
        4.2.5 多層膜的降解與質(zhì)粒DNA 的釋放行為
        4.2.6 基因活化鈦材表面基因的原位轉(zhuǎn)染
        4.2.7 細(xì)胞響應(yīng)性檢測
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 轉(zhuǎn)基因載體pEGFP–hBMP2 的構(gòu)建
        4.3.2 接觸角檢測
        4.3.3 多層膜的降解與質(zhì)粒DNA 的釋放
        4.3.4 體外基因轉(zhuǎn)染
        4.3.5 RT-PCR
        4.3.6 細(xì)胞響應(yīng)
    4.4 小結(jié)
5 鈦膜表面殼聚糖、絲素蛋白多層膜的構(gòu)建及細(xì)胞響應(yīng)性研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        5.2.2 鈦膜表面殼聚糖（Chi）
        5.2.3 鈦膜表面Chi/SF 及Chi/PSS 多層膜的表征
        5.2.4 細(xì)胞在Chi/SF 及Chi/PSS 多層膜修飾的鈦膜表面的響應(yīng)研究
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 鈦材表面Chi/SF 多層膜的表征
        5.3.2 Chi/SF 多層膜修飾的鈦材表面細(xì)胞響應(yīng)研究
        5.3.3 鈦材表面Chi/PSS 多層膜的表征
        5.3.4 Chi/PSS 多層膜修飾的鈦膜表面成骨細(xì)胞的響應(yīng)研究
    5.4 小結(jié)
6 鈦材表面激素功能化介孔硅的層層自組裝及其在骨動態(tài)平衡中的應(yīng)用
    6.1 前言
    6.2 實(shí)驗(yàn)部分
        6.2.1 材料與設(shè)備
        6.2.2 介孔硅的制備與表征
        6.2.3 介孔硅的藥物裝載及表征
        6.2.4 載藥介孔硅表面多層膜修飾及表征
        6.2.5 鈦材表面激素功能化介孔硅多層膜的構(gòu)建及表征
        6.2.6 多層膜的降解與藥物的釋放行為
        6.2.7 細(xì)胞在鈦材表面激素功能化介孔硅多層膜上的響應(yīng)性研究
    6.3 結(jié)果與討論
        6.3.1 介孔硅納米顆粒的合成與表征
        6.3.2 藥物裝載及表征
        6.3.3 E2-MSN@ PEM 體系的構(gòu)建
        6.3.4 激素功能化鈦材的表征
        6.3.5 Chi/Gel 多層膜的降解與藥物的釋放行為
        6.3.6 細(xì)胞活性檢測
        6.3.7 堿性磷酸酶的表達(dá)
        6.3.8 礦化檢測
        6.3.9 骨保護(hù)素及骨橋蛋白mRNA 的表達(dá)水平
    6.4 小結(jié)
2納米管調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移與分化">7 細(xì)胞因子活化的 TO₂納米管調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移與分化
    7.1 前言
    7.2 實(shí)驗(yàn)部分
        7.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
2 納米管的制備">        7.2.2 細(xì)胞因子活化TO₂ 納米管的制備
2 納米管表面殼聚糖/明膠多層膜的構(gòu)建">        7.2.3 細(xì)胞因子活化TO₂ 納米管表面殼聚糖/明膠多層膜的構(gòu)建
2 納米管的表征">        7.2.4 細(xì)胞因子活化TO₂ 納米管的表征
        7.2.5 SOD 活性檢測
        7.2.6 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定
2 納米管表面細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察">        7.2.7 細(xì)胞因子活化TO₂ 納米管表面細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        7.2.8 細(xì)胞遷移檢測----傷口愈合測試
        7.2.9 細(xì)胞活性檢測
        7.2.10 堿性磷酸酶的檢測
    7.3 結(jié)果與討論
2 納米管的表征">        7.3.1 細(xì)胞因子活化TO₂ 納米管的表征
        7.3.2 SOD 活性檢測
        7.3.3 細(xì)胞形態(tài)觀察
        7.3.4 細(xì)胞遷移
        7.3.5 細(xì)胞活性
        7.3.6 堿性磷酸酶活性檢測
    7.4 小結(jié)
8 鈦合金表面細(xì)胞微環(huán)境的構(gòu)建及其對干細(xì)胞分化和體內(nèi)骨生成的調(diào)控
    8.1 前言
    8.2 實(shí)驗(yàn)部分
        8.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        8.2.2 多層膜的構(gòu)建
        8.2.3 多層膜的表征
        8.2.4 FN 沉積的免疫檢測
        8.2.5 BMP2 釋放研究
        8.2.6 間充質(zhì)干細(xì)胞在TC4/LbL/rhBMP2/FN 表面的響應(yīng)性研究
        8.2.7 體內(nèi)試驗(yàn)
    8.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        8.3.1 多層膜結(jié)構(gòu)的表征
        8.3.2 BMP2 體外釋放研究
        8.3.3 細(xì)胞形態(tài)
        8.3.4 細(xì)胞分化
        8.3.5 定量PCR 分析
        8.3.6 破骨細(xì)胞分化
        8.3.7 體內(nèi)試驗(yàn)
    8.4 小結(jié)
9 主要結(jié)論與后續(xù)建議
    9.1 主要結(jié)論
    9.2 后續(xù)工作建議
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
    A. 作者攻讀學(xué)位期間發(fā)表的文章
    B. 作者攻讀學(xué)位期間取得的科研成果目錄
    C. 作者攻讀學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝靶向性磁共振成像造影劑──含D-半乳糖基的DTPA雙酰胺釓配合物的研究[J]. 傅雁軍,卓仁禧.  高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報. 1997(07)



本文編號：3055582