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3D打印半月板支架的制作、細(xì)胞親和性及移植效果研究

發(fā)布時(shí)間:2021-02-25 11:14
  半月板是位于膝關(guān)節(jié)間隙內(nèi)的“半月形”纖維軟骨組織,具有承重、傳遞負(fù)荷、穩(wěn)定膝關(guān)節(jié)、營(yíng)養(yǎng)和潤(rùn)滑關(guān)節(jié)軟骨等功能,半月板損傷是臨床上的常見(jiàn)疾病,損傷后會(huì)引起患者劇烈疼痛,關(guān)節(jié)腫脹和膝關(guān)節(jié)交鎖等癥狀。由于半月板內(nèi)部2/3區(qū)域無(wú)血管分布,一旦發(fā)生損傷,很難通過(guò)自身修復(fù)而愈合,臨床上針對(duì)此類(lèi)損傷采用半月板部分切除術(shù)或全部切除術(shù)治療,但半月板切除后會(huì)進(jìn)一步造成骨性關(guān)節(jié)炎的過(guò)早發(fā)生,因此,目前的治療手段是盡可能修復(fù)和保留完整的半月板,而組織工程技術(shù)的出現(xiàn)為半月板損傷提供了一種新的治療手段。組織工程化半月板是將種子細(xì)胞接種到支架材料上,在生物反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)一段時(shí)間來(lái)構(gòu)建工程化半月板,然后通過(guò)移植替代損傷的半月板。組織工程三要素的包括種子細(xì)胞,支架和生物反應(yīng)器,其中支架是組織工程技術(shù)中至關(guān)重要的一環(huán),其為種子細(xì)胞的粘附,增殖和分化提供理想的場(chǎng)所,是工程化半月板制備成功的關(guān)鍵。理想的半月板支架應(yīng)具備良好的生物相容性,一定的機(jī)械力學(xué)特性和一定的三維多孔形態(tài)結(jié)構(gòu)、孔隙率和內(nèi)表面積。因此本試驗(yàn)選用聚己內(nèi)酯(polycaprolactone,PCL)材料,利用3D打印技術(shù)制作三種不同孔隙率的支架,而后通過(guò)壓縮模量檢測(cè)... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
文獻(xiàn)綜述
    第一章 組織工程半月板支架材料的研究進(jìn)展
        1.1 半月板的解剖結(jié)構(gòu)
        1.2 半月板組成
        1.3 半月板生物力學(xué)和功能特性
        1.4 半月板的損傷與修復(fù)
        1.5 組織工程化半月板的細(xì)胞來(lái)源
            1.5.1 自體細(xì)胞
            1.5.2 胚胎干細(xì)胞來(lái)源
            1.5.3 成體干細(xì)胞來(lái)源
        1.6 組織工程化半月板支架
            1.6.1 組織衍生支架
            1.6.2 細(xì)胞外基質(zhì)組分支架
            1.6.3 合成聚合物支架
            1.6.4 水凝膠支架
        1.7 半月板支架的結(jié)構(gòu)特征和制作工藝
            1.7.1 多孔支架的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
            1.7.2 纖維支架的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
            1.7.3 半月板制造技術(shù)
        1.8 3 D打印半月板支架的生物相容性
        1.9 展望
試驗(yàn)研究
    第二章 3D打印PCL半月板支架的制作及理化特征檢測(cè)
        2.1 試驗(yàn)材料
            2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要儀器與材料
        2.2 試驗(yàn)方法
            2.2.1 PCL半月板支架的設(shè)計(jì)與制備
            2.2.2 支架孔隙率的測(cè)定
            2.2.3 支架壓縮模量的測(cè)定
            2.2.4 支架孔徑的測(cè)定
            2.2.5 支架吸水性的測(cè)定
            2.2.6 支架體外降解率的測(cè)定
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
        2.4 試驗(yàn)結(jié)果
            2.4.1 激光掃描天然半月板及3D打印半月板支架
            2.4.2 支架孔隙率
            2.4.3 支架壓縮模量
            2.4.4 支架掃描電鏡結(jié)果
            2.4.5 支架吸水性測(cè)定
            2.4.6 支架體外降解率測(cè)定
        2.5 討論
            2.5.1 組織工程半月板支架的制作工藝
            2.5.2 組織工程半月板支架材料的選擇
    第三章 3D打印PCL半月板支架的細(xì)胞親和性試驗(yàn)
        3.1 試驗(yàn)材料
            3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            3.1.2 試驗(yàn)耗材與儀器設(shè)備
        3.2 試驗(yàn)方法
            3.2.1 犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與傳代培養(yǎng)
            3.2.2 犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨、軟骨和脂肪細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
            3.2.3 半月板支架的細(xì)胞親和性檢測(cè)
        3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
        3.4 試驗(yàn)結(jié)果
            3.4.1 BMSCs分離與傳代培養(yǎng)結(jié)果
            3.4.2 BMSCs三系分化鑒定結(jié)果
            3.4.3 支架細(xì)胞親和性結(jié)果
        3.5 討論
            3.5.1 種子細(xì)胞的選擇
            3.5.2 細(xì)胞與支架材料的粘附
    第四章 3D打印PCL半月板支架移植效果研究
        4.1 試驗(yàn)材料
            4.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            4.1.2 試驗(yàn)試劑與藥品
            4.1.3 試驗(yàn)儀器與耗材
        4.2 試驗(yàn)方法
            4.2.1 動(dòng)物分組
            4.2.2 半月板犬缺損模型構(gòu)建與PCL半月板支架移植
            4.2.3 術(shù)后觀(guān)察并評(píng)估膝關(guān)節(jié)修復(fù)效果
        4.3 試驗(yàn)結(jié)果
            4.3.1 術(shù)后大體觀(guān)察及膝關(guān)節(jié)功能Lysholm評(píng)分結(jié)果
            4.3.2 剖檢觀(guān)察結(jié)果
            4.3.3 組織學(xué)觀(guān)察結(jié)果
        4.4 討論
            4.4.1 手術(shù)過(guò)程
            4.4.2 半月板支架、組織工程化半月板對(duì)于關(guān)節(jié)軟骨的保護(hù)作用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]生物降解高分子——一類(lèi)重要的生物材料 2.生物相容性及脂肪族聚酯的表面改性[J]. 王身國(guó),貝建中.  高分子通報(bào). 2017(11)
[2]軟骨組織工程研究進(jìn)展——我們的經(jīng)驗(yàn)與未來(lái)展望[J]. 劉豫,周廣東,曹誼林.  Engineering. 2017(01)
[3]組織工程技術(shù)修復(fù)半月板損傷:從基礎(chǔ)到臨床的差距[J]. 侯立剛,楊建義.  中國(guó)組織工程研究. 2016(11)
[4]組織工程半月板研究進(jìn)展[J]. 李尚福,戎利民.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2013(01)



本文編號(hào):3050885

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