生物體內(nèi)的活性分子（即:生物檢測(cè)物）在許多生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用。而它們的異常表達(dá)也與許多疾病息息相關(guān)。因此,對(duì)于活性分子的檢測(cè)可以有助于疾病的研究以及治療。本論文中,我們構(gòu)建了四類新型的熒光探針,實(shí)現(xiàn)了對(duì)各種活性分子的檢測(cè),并且成功地應(yīng)用于多種疾病的成像。1. 我們首先設(shè)計(jì)合成了一個(gè)基于半花菁染料的近紅外熒光探針（Cy-Azo）用來(lái)檢測(cè)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）疾病中的偶氮還原酶（Azo R）。該探針對(duì)Azo R具有高靈敏性和選擇性。該探針首先在兩個(gè)細(xì)胞系（HCT116細(xì)胞和Hep G2細(xì)胞）和三種細(xì)菌（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌）中實(shí)現(xiàn)了Azo R的檢測(cè)。其次,該探針被用于監(jiān)測(cè)急性和慢性UC小鼠中Azo R的活性。這為UC疾病的診斷和治療提供了重要的信息。2. 在UC疾病研究的基礎(chǔ)上,我們研究了UC疾病中出現(xiàn)的“腸-肝軸”機(jī)制。首先,我們合成了一種缺氧敏感型的探針（Cy-AP）。該探針在四個(gè)細(xì)胞系中（Hep G2、HCT116、He La和MCF-7細(xì)胞）實(shí)現(xiàn)了缺氧可視化。然后,該探針可以在肝纖維化小鼠和UC小鼠體內(nèi)監(jiān)測(cè)缺氧情況。最后,該探針可以通過(guò)監(jiān)測(cè)缺氧變化來(lái)驗(yàn)證生物體... 

【文章來(lái)源】：湘潭大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：136 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 前言
    1.2 熒光探針的介紹
        1.2.1 熒光探針的組成
        1.2.2 熒光探針的響應(yīng)機(jī)理
    1.3 熒光探針在生物活性物種中的檢測(cè)
        1.3.1 偶氮還原酶的檢測(cè)
        1.3.2 缺氧的檢測(cè)
        1.3.3 過(guò)氧亞硝酰基的檢測(cè)
        1.3.4 一氧化碳的檢測(cè)
        1.3.5 還原型輔酶的檢測(cè)
    1.4 本論文的研究工作
第2章 一個(gè)檢測(cè)偶氮還原酶近紅外熒光探針在急性和慢性潰瘍性結(jié)腸炎小鼠中的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 藥品與儀器
        2.2.2 探針Cy-Azo的合成
        2.2.3 熒光探針的光譜測(cè)定方法
        2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光成像
        2.2.5 細(xì)菌培養(yǎng)和共聚焦熒光成像
        2.2.6 活體成像
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 探針Cy-Azo光譜性能的研究
        2.3.2 選擇性的研究
        2.3.3 pH的研究
        2.3.4 反應(yīng)溫度的研究
        2.3.5 響應(yīng)時(shí)間的研究
        2.3.6 酶動(dòng)力學(xué)的研究
        2.3.7 抑制劑的研究
        2.3.8 響應(yīng)機(jī)理的研究
        2.3.9 活細(xì)胞成像的研究
        2.3.10 細(xì)菌成像的研究
        2.3.11 急性和慢性結(jié)腸炎小鼠成像的研究
    2.4 小結(jié)
第3章 一個(gè)缺氧敏感型近紅外熒光探針用于生物體內(nèi)“腸-肝軸”的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 藥品與儀器
        3.2.2 探針Cy-AP的合成
        3.2.3 熒光探針的光譜測(cè)定
        3.2.4 細(xì)胞共聚焦熒光成像
        3.2.5 活體成像
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 探針Cy-AP光譜性能的研究
        3.3.2 選擇性的研究
        3.3.3 pH的研究
        3.3.4 響應(yīng)時(shí)間的研究
        3.3.5 響應(yīng)機(jī)理的研究
        3.3.6 活細(xì)胞成像的研究
        3.3.7 肝纖維化小鼠和潰瘍性結(jié)腸炎小鼠缺氧的熒光成像研究
        3.3.8 “腸-肝軸”的熒光成像研究
    3.4 小結(jié)
第4章 新型的近紅外熒光平臺(tái)的構(gòu)建以及在生物研究中的應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 藥品和儀器
        4.2.2 新型染料DDM-R的合成
        4.2.3 熒光探針DDM-ONOO-和DDM-CO的光譜測(cè)定
        4.2.4 細(xì)胞共聚焦熒光成像
        4.2.5 流式細(xì)胞術(shù)分析
        4.2.6 活體成像
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 DDM-R染料的合成及光學(xué)性能的研究
        4.3.2 探針DDM-ONOO-的光譜研究
        4.3.3 選擇性的研究
        4.3.4 響應(yīng)時(shí)間的研究
        4.3.5 pH的研究
        4.3.6 響應(yīng)機(jī)理的研究
        4.3.7 探針DDM-CO的光譜研究
        4.3.8 DDM-CO的選擇性研究
        4.3.9 DDM-CO的時(shí)間響應(yīng)研究
        4.3.10 DDM-CO的 pH響應(yīng)研究
        4.3.11 DDM-CO對(duì) CO的響應(yīng)機(jī)理研究
        4.3.12 細(xì)胞熒光成像研究
        4.3.13 中毒性肝炎小鼠中ONOO-的熒光成像研究
        4.3.14 活體中CO的熒光成像研究
    4.4 小結(jié)
第5章 一個(gè)基于雙鍵重排機(jī)理設(shè)計(jì)的近紅外熒光探針對(duì)細(xì)胞中的NAD（P）H成像研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 藥品和儀器
        5.2.2 熒光探針Cy-N的合成
        5.2.3 熒光探針Cy-N的光譜測(cè)定
        5.2.4 細(xì)胞共聚焦熒光成像
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 新型響應(yīng)機(jī)理的提出
        5.3.2 探針Cy-N的光譜研究
        5.3.3 選擇性的研究
        5.3.4 響應(yīng)時(shí)間的研究
        5.3.5 pH的研究
        5.3.6 響應(yīng)機(jī)理的研究
        5.3.7 細(xì)胞熒光成像研究
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A 實(shí)驗(yàn)藥品
附錄B 實(shí)驗(yàn)儀器
附錄C 部分化合物譜圖
個(gè)人簡(jiǎn)歷、碩士期間研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Update on occult hepatitis B virus infection[J]. Manoochehr Makvandi.  World Journal of Gastroenterology. 2016(39)



本文編號(hào)：3037040