角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2（KGF-2）在損傷修復(fù)等很多方面都發(fā)揮著很重要的作用,但是KGF-2的應(yīng)用受到自身生物學(xué)特性和外界環(huán)境的影響相當(dāng)大,在體內(nèi)應(yīng)用時(shí)蛋白的穩(wěn)定性和生物活性不容易保持,比如37℃時(shí)在磷酸鹽緩沖液或生理鹽水中KGF-2的活性還維持不到1h,不能有效發(fā)揮其生物學(xué)功能。因此需要有效的生長(zhǎng)因子緩釋傳輸途徑解決這一問題,而理想的緩釋載體是關(guān)鍵。生物蛋白海綿具有優(yōu)良的生物相容性、生物可降解性、止血性、可吸收性和緩釋性,并可在溫和的條件下加工成各種形狀的載體。其能夠與生長(zhǎng)因子以一種簡(jiǎn)單、可靠的方式可逆性結(jié)合,即固定生長(zhǎng)因子,有效保持生長(zhǎng)因子活性和緩慢控制釋放,發(fā)揮其促血管生成、創(chuàng)傷修復(fù)、抑制疤痕形成等效應(yīng)。本研究設(shè)計(jì)利用生物蛋白海綿作為KGF-2的緩釋載體,一方面可以使KGF-2的半衰期延長(zhǎng),在體內(nèi)發(fā)揮有效作用的時(shí)間也相應(yīng)延長(zhǎng),從而能更好的發(fā)揮其作用；另一方面,生物蛋白海綿復(fù)合KGF-2,并不會(huì)影響生物蛋白海綿發(fā)揮其自身的優(yōu)勢(shì),從而使兩者均能很好的發(fā)揮作用。目的：制備出KGF-2生物蛋白復(fù)合海綿,建立對(duì)KGF-2生物蛋白復(fù)合海綿體外生物學(xué)活性測(cè)定的方法,測(cè)定KGF-2生物蛋白復(fù)合海綿... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖I-I一股螺旋模型

1.1.2膠原蛋白海綿及其組成膠原蛋白分子是一個(gè)長(zhǎng)3000A，直徑為15A的桿狀物，是己知的最長(zhǎng)蛋白質(zhì)之一。膠原蛋白分子是由3條大小相似的多膚鏈組成，3條多膚鏈都有螺旋構(gòu)象(見圖1一1)。3條螺旋互相纏繞，形成一個(gè)超螺旋(見圖1一2)。在這個(gè)超螺旋中，每個(gè)殘基上升2.9A，每一圓周有3.3個(gè)殘基。這三股多膚互相以氫鍵形式結(jié)合起來[91。圖1一1一股螺旋模型Figurel一 1Single一 strandedhelicaleonformation圖1一2三股螺旋模型Figurel一 2TriPle一 strandedheliealstrueturel

3.1.1提取的膠原蛋白溶液經(jīng)在酸性條件下酶解提取出去端膚膠原蛋白，鹽析后呈透明狀的小塊膠體狀。透析3一5d后，呈白色致密凝膠狀如圖3一1，手觸摸有光滑感，若透析袋裝入量較少，則粘稠性液態(tài)，流動(dòng)性良好。纓纓纓黝黝黝 :::::顴顴 筆筆筆鬢鬢嘿 嘿蘸蘸 {{{{{夔 夔 夔 圖3一1(a、b)提取的膠原蛋白溶液樣品Fig3一1(a、 b)SamPlesofeollagenProteinsolutionextracted3.1.2膠原蛋白的鑒定(1)蛋白電泳分析膠原蛋白的蛋白電泳分析表明膠原蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量較大，膠原蛋白的電泳條帶為3條，在IOOkD附近出現(xiàn)的2條泳帶是膠原蛋白分子a膚鏈的al鏈和a2鏈，在ZO0kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原蛋白分子的p月太鏈，p膚鏈為a肚鏈的二聚體。膠原蛋白的每條多膚鏈相對(duì)28


本文編號(hào)：3024149