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RGD接枝氧化海藻酸鈉/N-琥珀酰殼聚糖復(fù)合水凝膠的制備及體外誘導(dǎo)分化研究

發(fā)布時間:2021-02-06 00:22
  水凝膠是由高分子材料交聯(lián)而形成的物質(zhì),其骨架為多孔的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。水凝膠的含水量豐富,與人體組織極為相似,可用作組織工程支架材料。本研究以海藻酸鈉和殼聚糖為主要原料,以期制備出具有更好綜合性能的復(fù)合水凝膠骨組織工程支架材料?紤]到海藻酸鈉的降解性能及殼聚糖的溶解性能較差等缺點,且較強的親水性不利于細胞粘附,為此,我們將對它們進行RGD接枝改性及復(fù)合研究。本研究將用高碘酸鈉將海藻酸鈉氧化,從而在其分子鏈上引入活性醛基并改善其降解性能。用丁二酸酐與殼聚糖反應(yīng)生成N-琥珀酰殼聚糖,以提高其溶解性能。通過在氧化海藻酸鈉分子上接枝RGD肽鏈,以提高材料的細胞粘附性能及生物活性。利用氧化海藻酸鈉中的醛基與N-琥珀酰殼聚糖中的氨基發(fā)生席夫堿反應(yīng)交聯(lián)而得到復(fù)合水凝膠。實驗制備了不同V(N-SC)/V(OSA)配比的復(fù)合水凝膠,并研究了其力學和降解等性能。研究發(fā)現(xiàn)V(N-SC)/V(OSA)=8/2的水凝膠的壓縮強度為32.5kPa,降解時間為2個月左右,是各組中最為理想的組織工程支架材料。通過在體外對復(fù)合水凝膠材料與骨髓間質(zhì)干細胞的共培養(yǎng),研究了復(fù)合水凝膠對細胞黏附、增殖等細胞行為的影響。研究結(jié)果顯示:R... 

【文章來源】:西南交通大學四川省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 前言
    1.2 骨組織工程
        1.2.1 組織工程概述
        1.2.2 骨組織工程
        1.2.3 骨組織工程支架
        1.2.4 骨組織工程支架分類
    1.3 骨組織工程支架材料的研究面臨的主要問題
    1.4 水凝膠
        1.4.1 水凝膠的分類
        1.4.2 水凝膠的制備
        1.4.3 水凝膠的應(yīng)用及改性
    1.5 海藻酸鹽和殼聚糖
        1.5.1 海藻酸鹽的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
        1.5.2 殼聚糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
    1.6 本文研究目的和意義、主要內(nèi)容與創(chuàng)新點
        1.6.1 本文研究目的和意義
        1.6.2 本文研究主要內(nèi)容
        1.6.3 本文研究主要創(chuàng)新點
第2章 氧化海藻酸鈉的制備、改性與表征
    2.1 引言
    2.2 實驗材料及設(shè)備
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗設(shè)備
    2.3 實驗部分
        2.3.1 氧化海藻酸鈉的制備
        2.3.2 RGD與氧化海藻酸鈉的接枝
    2.4 氧化海藻酸鈉表征
        2.4.1 紅外光譜分析
        2.4.2 氧化度的測定
    2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學處理
    2.6 結(jié)果與分析
        2.6.1 海藻酸鈉的氧化
        2.6.2 氧化劑的加入量和反應(yīng)時間對海藻酸鈉氧化度的影響
        2.6.3 氧化海藻酸鈉上接枝RGD
    2.7 本章小結(jié)
第3章 N-琥珀酰殼聚糖的合成和表征
    3.1 引言
    3.2 實驗材料及設(shè)備
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗設(shè)備
    3.3 實驗部分
        3.3.1 N-琥珀酰殼聚糖的制備
        3.3.2 N-琥珀酰殼聚糖的表征
    3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學處理
    3.5 結(jié)果與分析
        3.5.1 N-琥珀酰殼聚糖合成機制
        3.5.2 N-琥珀酰殼聚糖的紅外光譜分析
        3.5.3 N-琥珀酰殼聚糖取代度的測定
        3.5.4 N-琥珀酰殼聚糖溶解性分析
    3.6 本章小結(jié)
第4章 復(fù)合水凝膠的制備
    4.1 引言
    4.2 實驗材料及設(shè)備
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗設(shè)備
    4.3 實驗部分
        4.3.1 實驗步驟與方法
        4.3.2 復(fù)合水凝膠的表征
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 紅外光譜分析
        4.4.2 形貌表征
        4.4.3 力學性能測試
        4.4.4 體外降解實驗
    4.5 本章小結(jié)
第5章 復(fù)合水凝膠對骨髓間充質(zhì)干細胞分化的影響
    5.1 前言
    5.2 實驗材料及設(shè)備
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 實驗設(shè)備
    5.3 細胞體外培養(yǎng)
        5.3.1 器材及細胞培養(yǎng)溶液
        5.3.2 材料滅菌和預(yù)處理
        5.3.3 細胞接種
    5.4 rBMSCs細胞體外表征
        5.4.1 Alamar blue
        5.4.2 AO-PI熒光染色
    5.5 體外分化
        5.5.1 體外成骨分化
        5.5.2 體外內(nèi)皮分化
    5.6 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學意義
    5.7 結(jié)果與分析
        5.7.1 細胞增殖結(jié)果分析
        5.7.2 AO-PI熒光染色
        5.7.3 成骨分化分析
            5.7.3.1 堿性碟酸酶活性分析
            5.7.3.2 堿性磷酸酶染色
            5.7.3.3 茜素紅染色分析
        5.7.4 內(nèi)皮分化分析-免疫熒光染色分析
    5.8 本章小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀碩士期間發(fā)表的論文及科研成果



本文編號:3019828

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