目的:制備低免疫原性異種脫細(xì)胞神經(jīng)基質(zhì)并評估其理化性能。方法:以α-1,3-半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因敲除（GTKO）豬坐骨神經(jīng)為實(shí)驗(yàn)原料對基因敲除豬坐骨神經(jīng)進(jìn)行脫細(xì)胞處理制備低免疫原性異種脫細(xì)胞神經(jīng)基質(zhì),通過HE、DAPI染色及DNA殘留量檢測評價(jià)神經(jīng)組織的脫細(xì)胞效果;I型膠原、層黏連蛋白、纖連蛋白免疫組織化學(xué)及天狼猩紅染色評價(jià)脫細(xì)胞神經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)組分保留情況;α-1,3-半乳糖基（a-gal）免疫熒光檢測異種抗原a-gal的殘留;掃描電鏡（SEM）分析脫細(xì)胞神經(jīng)三維組織結(jié)構(gòu)及孔隙率。結(jié)果:組織染色顯示脫細(xì)胞神經(jīng)基質(zhì)內(nèi)膜、外膜、束膜中的細(xì)胞均去除干凈,DNA定量結(jié)果顯示DNA含量下降了95%。天狼猩紅染色及免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示脫細(xì)胞神經(jīng)組織較好地保留了膠原纖維與細(xì)胞外基質(zhì)主要蛋白。SEM結(jié)果顯示脫細(xì)胞神經(jīng)較好地保留了其三維組織結(jié)構(gòu),細(xì)胞毒性檢測表明脫細(xì)胞神經(jīng)基質(zhì)無細(xì)胞毒性。結(jié)論:本研究自主設(shè)計(jì)的四聯(lián)脫細(xì)胞方案能徹底去除神經(jīng)組織中的細(xì)胞成分與異種抗原,并且較完整地保留了神經(jīng)組織結(jié)構(gòu),與天然神經(jīng)具有高度相似性。 

【文章來源】：溫州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,50(06)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

天然神經(jīng)（A、B）和脫細(xì)胞神經(jīng)（C、D)HE染色

天然神經(jīng)（A）和脫細(xì)胞神經(jīng)（B)DAPI染色（藍(lán)色熒光代表細(xì)胞核）

天然神經(jīng)（A）和脫細(xì)胞神經(jīng)（B）天狼猩紅染色（紅色代表膠原纖維）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[3]脫細(xì)胞神經(jīng)基質(zhì)的制備及組織相容性研究[D]. 姜煒鵬.濱州醫(yī)學(xué)院 2010
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本文編號：3012409