發(fā)布時間：2021-01-25 19:53

　　目的:探討負載二甲基乙二酰甘氨酸（dimethyloxalyl glycine,DMOG）的光交聯(lián)明膠（gelatin methacryloyl,GelMA）水凝膠的促成骨分化作用以及對大鼠顱骨骨缺損的修復(fù)效果。方法:制備GelMA-DMOG水凝膠后,掃描電鏡下觀察其表面特征,體外檢測其降解時間;將小鼠成骨前體細胞MC3T3-E1培養(yǎng)于GelMA和GelMA-DMOG水凝膠表面,鬼筆環(huán)肽染色熒光觀察細胞骨架形態(tài),CCK-8法檢測其細胞毒性;成骨誘導(dǎo)后,通過堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色、茜素紅染色和qRTPCR檢測成骨相關(guān)基因的表達,觀察其對MC3T3-E1細胞成骨向分化的影響;構(gòu)建大鼠顱骨骨缺損模型,4周和8周后觀察GelMA和GelMA-DMOG水凝膠對骨缺損的修復(fù)效果。結(jié)果:GelMA-DMOG水凝膠孔徑大小、分布及降解時間與GelMA水凝膠相比沒有明顯差異;兩種水凝膠對MC3T3-E1細胞增殖均無明顯影響;與培養(yǎng)在24孔板上的對照組相比,GelMA組可促進MC3T3-E1細胞成骨向分化,而GelMA-DMOG組明顯增強了細胞的成骨向分化和成骨... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2020,40(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

Gel MA/Gel MA-DMOG水凝膠的大體觀、表面形貌和降解率

MC3T3-E1細胞在Gel MA/Gel MA-DMOG水凝膠上的黏附生長和增殖情況

Gel MA是一種經(jīng)過改良修飾的天然ECM水凝膠，兼具了天然和人工水凝膠的優(yōu)勢。而通過一定的手段方法來調(diào)控Gel MA的孔隙率、孔徑和降解率，可以使其獲得一個理想的力學(xué)性能，適宜所有種類的細胞的黏附、伸展和增殖。這一特性比Ⅰ型膠原水凝膠有更為明顯的優(yōu)勢[11]。而且，Gel MA的主要成分為明膠，是來源于膠原水解產(chǎn)物的生物高分子，富含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸黏附肽序列（arginine glycine aspartic acid,RGD）和基質(zhì)金屬蛋白酶敏感性降解位點。RGD序列存在于多種細胞外基質(zhì)中，可與多種整合素特異性結(jié)合，能有效地促進細胞對生物材料的黏附，具有更佳的骨組織工程應(yīng)用潛能。如Gel MA復(fù)合軟骨來源基質(zhì)顆粒能夠促進多能干細胞軟骨向分化[6],Gel MA作為支架材料負載成骨生長肽能夠用于大鼠股骨髁骨缺損的修復(fù)[12]。研究發(fā)現(xiàn)材料表面孔徑大于100μm能促進新骨形成[13]。本研究制備的Gel MA水凝膠具有多微孔和相互交通的結(jié)構(gòu)，孔徑大小合適，非常利于骨的形成。體外細胞實驗也可以發(fā)現(xiàn)，Gel MA水凝膠對細胞沒有毒性，具有良好的生物相容性。圖4 Gel MA/Gel MA-DMOG水凝膠對大鼠顱骨骨缺損的修復(fù)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]殼聚糖/亞磷酸殼聚糖海綿復(fù)合人臍帶間充質(zhì)干細胞構(gòu)建組織工程骨修復(fù)骨缺損的實驗研究[J]. 呂振京,孫國棟,焦延鵬,周長忍,林永新,李志忠.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(10)



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