本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用膠原支架結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建犬膀胱的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：近年來(lái)隨著在組織工程領(lǐng)域的進(jìn)步與發(fā)展，該技術(shù)已在一些臨床應(yīng)用中獲得了成功，作為該領(lǐng)域在泌尿系統(tǒng)中應(yīng)用也逐漸成為研究和探索的熱點(diǎn)。臨床上常見到由于先天性疾病、創(chuàng)傷、炎癥、感染、腫瘤等各種因素導(dǎo)致膀胱結(jié)構(gòu)與功能的嚴(yán)重破壞，需要進(jìn)行修復(fù)與重建。目前臨床上主要采取胃腸道節(jié)段作為膀胱修復(fù)與重建的替代品，但因組織器官來(lái)源與功能的迥異，存在諸多難以避免的并發(fā)癥，嚴(yán)重影響到患者的生存質(zhì)量。 既往組織工程技術(shù)修復(fù)與重建膀胱的研究表明，單純應(yīng)用支架材料修復(fù)與重建膀胱，存在如支架攣縮、瘢痕形成、炎癥反應(yīng)嚴(yán)重以及移植物萎縮和鈣化等并發(fā)癥及膀胱平滑肌層再生能力弱，從而影響到重建器官結(jié)構(gòu)與功能的恢復(fù)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為一種具有極強(qiáng)分化潛能的種子細(xì)胞，并且具備易于自體獲取、擴(kuò)增傳代能力強(qiáng)、免疫排斥低等優(yōu)勢(shì)，成為近年來(lái)在組織工程研究領(lǐng)域的新焦點(diǎn)。 第一部分：通過(guò)利用膠原支架材料復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞建立犬膀胱缺損重建模型 目的：利用膠原支架材料重建修補(bǔ)犬膀胱，從而建立可行的組織工程犬膀胱修復(fù)重建模型。 方法：選用健康的10月齡成年比格犬12只，隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照組、單純膠原支架修復(fù)組、膠原支架結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)組。行犬膀胱次全切除，將膀胱上部約占膀胱總體積2/3予以切除，保留膀胱三角區(qū)及膀胱頸，分別應(yīng)用單純膠原支架或結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膠原支架修補(bǔ)重建膀胱缺損，術(shù)后對(duì)犬切口恢復(fù)情況、排尿及存活情況進(jìn)行嚴(yán)密觀察。 結(jié)果：術(shù)后除B組一只動(dòng)物因膀胱破裂導(dǎo)致腹腔感染于術(shù)后2天死亡外，其余均正常生存，在拔除尿管后可自行正常排尿。 結(jié)論：選用該組織工程材料復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)重建膀胱具有較好的可行性。 第二部分：膠原支架結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建犬膀胱后對(duì)重建膀胱的結(jié)構(gòu)及功能的初步實(shí)驗(yàn)研究 目的：通過(guò)利用膠原生物材料結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞嘗試修復(fù)重建犬膀胱。 方法：將12只雄性比格犬隨機(jī)分為三組，A組（n=4）：對(duì)照組，B組（n=4）：?jiǎn)渭兡z原生物材料修復(fù)組，C組（n=4）：膠原生物材料結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)組，建立B和C組犬膀胱缺損動(dòng)物模型，分別利用單純膠原生物材料或膠原材料結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建膀胱。各組于修復(fù)后23周行尿動(dòng)力學(xué)檢查及泌尿系影像學(xué)檢查，均于術(shù)后24周處死動(dòng)物后，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行取材，并通過(guò)對(duì)標(biāo)本大體觀察及組織學(xué)檢查評(píng)估膀胱膀胱再生情況。 結(jié)果：術(shù)后除B組一只動(dòng)物因膀胱破裂導(dǎo)致腹腔感染于術(shù)后2天死亡外，其余均正常生存，在拔除尿管后可自行正常排尿。取材行大體觀察發(fā)現(xiàn)支架生物材料均降解吸收，膀胱內(nèi)未發(fā)現(xiàn)占位、結(jié)石病變。尿動(dòng)力學(xué)檢查數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)證實(shí)A、C組在最大膀胱容量、膀胱順應(yīng)性、最大膀胱逼尿肌壓差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），與B組在最大膀胱容量、膀胱順應(yīng)性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。影像學(xué)檢查各組間未見明顯異常。通過(guò)組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)各組膀胱移行上皮細(xì)胞再生情況均較滿意，但B組膀胱平滑肌再生明顯較差，無(wú)完整正常形態(tài)肌層組織再生，其中C組膀胱平滑肌層再生尚可，有較為完整的各層平滑肌結(jié)構(gòu)。 結(jié)論：通過(guò)生物支架材料結(jié)合種子細(xì)胞這種組織工程技術(shù)重建修復(fù)膀胱，證實(shí)利用膠原支架材料結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有較好的促進(jìn)膀胱組織再生修復(fù)能力，尤其在膀胱平滑肌再生方面。 第三部分：膠原支架結(jié)合重建犬膀胱后對(duì)上尿路結(jié)構(gòu)及功能影響的探討 目的：應(yīng)用膠原支架重建犬膀胱后，觀察其對(duì)上尿路可能造成的結(jié)構(gòu)和功能的影響。 方法：隨機(jī)將8只雄性比格犬分為兩組，A組（n=4）：?jiǎn)渭儗?duì)照組，B組（n=4）：膠原材料修復(fù)組，通過(guò)對(duì)B組比格犬建立起膀胱缺損模型，應(yīng)用膠原材料對(duì)膀胱缺損進(jìn)行修復(fù)重建。各組于修復(fù)前后23周行腎臟彩色超聲檢查及血流顯像觀察、腎功相關(guān)生化指標(biāo)測(cè)定以及24h尿量、24h尿蛋白定量測(cè)定，并于術(shù)后24周處死動(dòng)物，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行取材，對(duì)腎臟、輸尿管行大體觀察及組織學(xué)相關(guān)檢查，通過(guò)對(duì)上述指標(biāo)觀察從而分析膀胱重建后對(duì)上尿路結(jié)構(gòu)和功能所產(chǎn)生的影響。 結(jié)果：術(shù)后除B組一只動(dòng)物因膀胱破裂導(dǎo)致腹腔感染于術(shù)后2天死亡外，其余均正常生存，在拔除尿管后可自行正常排尿。通過(guò)對(duì)手術(shù)前后腎功相關(guān)生化指標(biāo)測(cè)定、24h尿量及24h尿蛋白定量結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組間上述指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。腎臟彩色超聲檢查及血流顯像觀察發(fā)現(xiàn)各組動(dòng)物腎臟形態(tài)、結(jié)構(gòu)、腎臟動(dòng)靜脈血流信號(hào)均無(wú)異常，未發(fā)現(xiàn)腎結(jié)石、腎盂腎盞擴(kuò)張積水、腎臟囊實(shí)性占位改變。通過(guò)對(duì)大體標(biāo)本觀察發(fā)現(xiàn)各組動(dòng)物腎臟、輸尿管未發(fā)現(xiàn)結(jié)石、腫瘤形成，無(wú)明顯占位及新生物改變。組織學(xué)檢查觀察發(fā)現(xiàn)各組間粘膜細(xì)胞層完整，上皮細(xì)胞排列整齊致密，輸尿管及腎間質(zhì)未發(fā)現(xiàn)充血水腫及明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)改變，各組腎小球、腎小管無(wú)明確病理改變情況，腎臟系膜細(xì)胞未出現(xiàn)大量增生。 結(jié)論：應(yīng)用膠原支架材料重建犬膀胱后未對(duì)上尿路產(chǎn)生不良影響，這種組織工程重建膀胱方法具有進(jìn)一步的應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：膠原支架材料 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 膀胱重建 膠原支架材料 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 膀胱重建 膀胱平滑肌 膠原支架 組織工程 腎臟 輸尿管
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R699;R318.08
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-5
• Abstract5-9
• 摘要9-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 通過(guò)利用膠原支架材料復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞建立犬膀胱缺損重建模型14-22
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-20
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-21
• 2.4 討論21
• 2.5 小結(jié)21-22
• 第三章 膠原支架結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建犬膀胱后對(duì)重建膀胱的結(jié)構(gòu)及功能的初步實(shí)驗(yàn)研究22-33
• 3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑22-23
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法23-26
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-30
• 3.4 討論30-32
• 3.5 小結(jié)32-33
• 第四章 組織工程重建犬膀胱后對(duì)上尿路結(jié)構(gòu)及功能影響的探討33-40
• 4.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑33-34
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法34-35
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-39
• 4.4 討論39
• 4.5 小結(jié)39-40
• 全文總結(jié)40-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 文獻(xiàn)綜述43-50
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 碩士期間所發(fā)表的文章50-51
• 致謝51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用膠原支架結(jié)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建犬膀胱的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：295479