富血小板血漿復(fù)合膠原水凝膠誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨分化作用的研究
發(fā)布時間:2020-12-21 13:38
關(guān)節(jié)軟骨缺損在臨床中較為常見,因關(guān)節(jié)軟骨缺乏神經(jīng)血管分布、再生能力差,當關(guān)節(jié)軟骨出現(xiàn)損傷后極難自我修復(fù),因此軟骨缺損的徹底治愈成為了臨床治療和基礎(chǔ)研究的難點和熱點。隨著組織工程學(xué)和再生醫(yī)學(xué)對軟骨缺損研究的不斷深入,為軟骨缺損的修復(fù)提供了更為合適的治療方案。本實驗以兔的BMSCs作為軟骨缺損修復(fù)的種子細胞,膠原水凝膠作為組織工程化軟骨的支架材料,以自體富血小板血漿作為細胞的生長因子,三者共同構(gòu)建組織工程軟骨,觀察其體內(nèi)外成軟骨和軟骨修復(fù)的效果。第一部分PRP復(fù)合BMSCs/膠原水凝膠(COL)在體外成軟骨誘導(dǎo)中的作用目的:PRP復(fù)合BMSCs/COL構(gòu)建組織工程化軟骨,觀察PRP激活后釋放的生長因子對組織工程化軟骨中細胞增殖、分化及細胞外基質(zhì)分泌的情況。方法:采用Ⅰ型膠制備膠原水凝膠,取三代間充質(zhì)干細胞與膠原水凝膠混勻構(gòu)建三維程組織,取兔外周血經(jīng)二次離心提取富血小板血漿,并加入Ca Cl2激活。實驗分組:BC組為膠原材料組,第三代BMSCs與COL構(gòu)建組織工程化軟骨;BCT組為第三代BMSCs與COL構(gòu)建組織工程化軟骨,添加含有TGF-β的軟骨誘導(dǎo)液進行培養(yǎng);BCP組為第三代BMSCs與...
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
DNA標準曲線
BC 組,BCP 組進行培養(yǎng) 7,、14、21 天后檢測細胞增殖情況。(*P<0.05,**P***P<0.001)ure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of cu(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001) HE 染色組織工程化軟骨行 HE 染色結(jié)果如圖 1.3 所示,BC 組,BCT 組與 B觀察到典型的軟骨細胞形態(tài),軟骨細胞呈現(xiàn)圓形或者橢圓型,同到典型的軟骨陷窩樣結(jié)構(gòu),接近軟骨細胞的特征形態(tài)。BCP 組、B骨樣細胞數(shù)量優(yōu)于 BC 組,BCP 組細胞質(zhì)明顯增多。
圖 1-2 B 組,BC 組,BCP 組進行培養(yǎng) 7,、14、21 天后檢測細胞增殖情況。(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)Figure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of culture.(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001)3.2 HE 染色組織工程化軟骨行 HE 染色結(jié)果如圖 1.3 所示,BC 組,BCT 組與 BCP 組均能觀察到典型的軟骨細胞形態(tài),軟骨細胞呈現(xiàn)圓形或者橢圓型,同時能夠見到典型的軟骨陷窩樣結(jié)構(gòu),接近軟骨細胞的特征形態(tài)。BCP 組、BCT 組的軟骨樣細胞數(shù)量優(yōu)于 BC 組,BCP 組細胞質(zhì)明顯增多。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]含精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰環(huán)兩親性肽自組裝凝膠與骨髓間充質(zhì)干細胞相容性研究[J]. 肖仁順,阮宏,蔣星海,吳凱,王曉梅,宋玉林. 重慶醫(yī)學(xué). 2017(35)
[2]單一生物材料聚乳酸/羥基乙酸共聚物構(gòu)建組織工程骨軟骨的可行性[J]. 段平國,郭潤生,余興元,潘震,李曉峰,李虎,劉俊,姚浩群. 中國組織工程研究. 2017(34)
[3]軟骨細胞及骨髓間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損[J]. 陳剛,錢明權(quán),杜煒. 中國組織工程研究. 2017(32)
[4]使用透明質(zhì)酸鈉復(fù)合海藻酸鈉水凝膠球3D培養(yǎng)軟骨細胞抑制細胞去分化的研究[J]. 劉鑫成,孟星星,祝瑞,張煜珅,成西俠,范宏斌. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2017(16)
[5]組織工程支架材料性質(zhì)對干細胞分化的影響[J]. 鄭力恒,吳昊,尚玉攀,張嘉晴. 中國組織工程研究. 2017(14)
[6]構(gòu)建組織工程軟骨支架材料:現(xiàn)狀及未來[J]. 周勇,朱偉民,彭亮權(quán),王大明,劉威,徐曉,王大平. 中國組織工程研究. 2017(10)
[7]實驗兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J]. 馬篤軍,彭力平,王立新,余闐,裴軍宇,李明華,徐寧達,肖偉. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2017(01)
[8]富血小板血漿在骨關(guān)節(jié)外科研究及應(yīng)用的進展[J]. 黃宇陽,姚詠嫦. 中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2016(05)
[9]富血小板血漿治療骨關(guān)節(jié)炎的研究進展[J]. 周祝興,邱冰. 貴州醫(yī)藥. 2016(04)
[10]骨髓間充質(zhì)干細胞與殼聚糖復(fù)合修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷[J]. 陳路,夏先學(xué),蔣科. 中國組織工程研究. 2015(45)
博士論文
[1]MicroRNA在胚胎干細胞分化過程中作用機制研究[D]. 姚南.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2014
[2]定向結(jié)構(gòu)軟骨支架復(fù)合骨髓基質(zhì)干細胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的研究[D]. 賈帥軍.第四軍醫(yī)大學(xué) 2012
碩士論文
[1]仿貽貝明膠基雙層水凝膠的性能及其用于骨/軟骨修復(fù)的研究[D]. 王志雄.西南交通大學(xué) 2017
[2]殼聚糖/改性納米羥基磷灰石復(fù)合水凝膠的制備及其軟骨缺損修復(fù)有效性評價[D]. 楊慎宇.暨南大學(xué) 2016
[3]組織工程骨軟骨修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)全層軟骨缺損的實驗研究[D]. 徐步強.河北北方學(xué)院 2014
本文編號:2929920
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
DNA標準曲線
BC 組,BCP 組進行培養(yǎng) 7,、14、21 天后檢測細胞增殖情況。(*P<0.05,**P***P<0.001)ure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of cu(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001) HE 染色組織工程化軟骨行 HE 染色結(jié)果如圖 1.3 所示,BC 組,BCT 組與 B觀察到典型的軟骨細胞形態(tài),軟骨細胞呈現(xiàn)圓形或者橢圓型,同到典型的軟骨陷窩樣結(jié)構(gòu),接近軟骨細胞的特征形態(tài)。BCP 組、B骨樣細胞數(shù)量優(yōu)于 BC 組,BCP 組細胞質(zhì)明顯增多。
圖 1-2 B 組,BC 組,BCP 組進行培養(yǎng) 7,、14、21 天后檢測細胞增殖情況。(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)Figure 1-2. In group B, BC and BCP, cell proliferation was detected after 7, 14, and 21 days of culture.(*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001)3.2 HE 染色組織工程化軟骨行 HE 染色結(jié)果如圖 1.3 所示,BC 組,BCT 組與 BCP 組均能觀察到典型的軟骨細胞形態(tài),軟骨細胞呈現(xiàn)圓形或者橢圓型,同時能夠見到典型的軟骨陷窩樣結(jié)構(gòu),接近軟骨細胞的特征形態(tài)。BCP 組、BCT 組的軟骨樣細胞數(shù)量優(yōu)于 BC 組,BCP 組細胞質(zhì)明顯增多。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]含精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰環(huán)兩親性肽自組裝凝膠與骨髓間充質(zhì)干細胞相容性研究[J]. 肖仁順,阮宏,蔣星海,吳凱,王曉梅,宋玉林. 重慶醫(yī)學(xué). 2017(35)
[2]單一生物材料聚乳酸/羥基乙酸共聚物構(gòu)建組織工程骨軟骨的可行性[J]. 段平國,郭潤生,余興元,潘震,李曉峰,李虎,劉俊,姚浩群. 中國組織工程研究. 2017(34)
[3]軟骨細胞及骨髓間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損[J]. 陳剛,錢明權(quán),杜煒. 中國組織工程研究. 2017(32)
[4]使用透明質(zhì)酸鈉復(fù)合海藻酸鈉水凝膠球3D培養(yǎng)軟骨細胞抑制細胞去分化的研究[J]. 劉鑫成,孟星星,祝瑞,張煜珅,成西俠,范宏斌. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2017(16)
[5]組織工程支架材料性質(zhì)對干細胞分化的影響[J]. 鄭力恒,吳昊,尚玉攀,張嘉晴. 中國組織工程研究. 2017(14)
[6]構(gòu)建組織工程軟骨支架材料:現(xiàn)狀及未來[J]. 周勇,朱偉民,彭亮權(quán),王大明,劉威,徐曉,王大平. 中國組織工程研究. 2017(10)
[7]實驗兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J]. 馬篤軍,彭力平,王立新,余闐,裴軍宇,李明華,徐寧達,肖偉. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2017(01)
[8]富血小板血漿在骨關(guān)節(jié)外科研究及應(yīng)用的進展[J]. 黃宇陽,姚詠嫦. 中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2016(05)
[9]富血小板血漿治療骨關(guān)節(jié)炎的研究進展[J]. 周祝興,邱冰. 貴州醫(yī)藥. 2016(04)
[10]骨髓間充質(zhì)干細胞與殼聚糖復(fù)合修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷[J]. 陳路,夏先學(xué),蔣科. 中國組織工程研究. 2015(45)
博士論文
[1]MicroRNA在胚胎干細胞分化過程中作用機制研究[D]. 姚南.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2014
[2]定向結(jié)構(gòu)軟骨支架復(fù)合骨髓基質(zhì)干細胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的研究[D]. 賈帥軍.第四軍醫(yī)大學(xué) 2012
碩士論文
[1]仿貽貝明膠基雙層水凝膠的性能及其用于骨/軟骨修復(fù)的研究[D]. 王志雄.西南交通大學(xué) 2017
[2]殼聚糖/改性納米羥基磷灰石復(fù)合水凝膠的制備及其軟骨缺損修復(fù)有效性評價[D]. 楊慎宇.暨南大學(xué) 2016
[3]組織工程骨軟骨修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)全層軟骨缺損的實驗研究[D]. 徐步強.河北北方學(xué)院 2014
本文編號:2929920
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