目的:當(dāng)今口腔頜面外科發(fā)展迅速,頜骨缺損已成為一個(gè)急需解決的難題。有證據(jù)表明鍶不僅可以調(diào)控脂肪干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化,還可以加快骨基質(zhì)蛋白的形成及沉淀。并促進(jìn)骨基質(zhì)蛋白的合成和沉淀。羥基磷灰石是當(dāng)今臨床上廣泛應(yīng)用的代骨材料,且已有大量研究報(bào)道了摻鍶納米磷灰石能夠促進(jìn)干細(xì)胞成骨分化。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)有著多向分化能力的脂肪干細(xì)胞,其離體培養(yǎng)具有較高的穩(wěn)定增殖能力,且具有廣泛的來源和較易的分離與培養(yǎng)的特點(diǎn),是理想的種子細(xì)胞。故本實(shí)驗(yàn)以脂肪干細(xì)胞為基礎(chǔ)細(xì)胞,探究摻鍶納米羥基磷灰石對(duì)脂肪干細(xì)胞成骨效率的影響。本實(shí)驗(yàn)通過比較三組不同培養(yǎng)條件下的ADSCs在不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)的堿性磷酸酶活性;細(xì)胞增殖情況,明確時(shí)間條件對(duì)摻鍶納米羥基磷灰石調(diào)節(jié)脂肪干細(xì)胞成骨效率影響。實(shí)驗(yàn)方法:1、脂肪干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定;2、制備定濃度摻鍶羥基磷灰石支架;3、材料與ASCs的復(fù)合形成ADSCs/Sr-HA支架為A組,并設(shè)置對(duì)照組:B組:成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液+ASCs/HA支架;C組:普通細(xì)胞培養(yǎng)液+ADSCs/HA支架;4、在不同時(shí)間結(jié)點(diǎn)對(duì)三組支架上的ADSCs進(jìn)行細(xì)胞行為檢測(cè)明確時(shí)間條件對(duì)摻鍶納米羥基磷灰石調(diào)節(jié)脂肪干細(xì)胞成骨分化... 

【文章來源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：35 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

小時(shí)ADSCs形態(tài)觀察（倒置顯微鏡，200X）

圖2 ADSCs分化能力的檢測(cè) 成脂誘導(dǎo)14d后的油紅O染色（光學(xué)顯微鏡，200X） ADSCs成骨誘導(dǎo)21天后經(jīng)茜素紅染色（光學(xué)顯微鏡，羥基磷灰石支架(Sr-HA)表征的大體觀察如肉眼觀為色白，表面觸感略粗糙，壓之變形能與冷凍過程中水的膨脹效應(yīng)有關(guān)。Sr-HA支B

細(xì)胞內(nèi)的融合的脂滴越多。14天后經(jīng)油紅O染色鏡下觀察，細(xì)胞內(nèi)布滿被染成橘紅色圓形顆粒狀的脂滴(圖2A)；P3代ADSCs在成骨誘導(dǎo)下細(xì)胞核變圓、細(xì)胞體積變大，外基質(zhì)中出現(xiàn)較多沉淀。21天后經(jīng)茜素紅染色后，鏡下呈大小不一的紅色鈣化結(jié)節(jié)(圖2B)；以上結(jié)果證明P3代的細(xì)胞具有分化成脂肪，成骨細(xì)胞的能力，提示其具有ADSCs的多向分化潛能。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示：ADSCs表面標(biāo)記物CD13，CD39表型表達(dá)陽性，造血干細(xì)胞CD34表型表達(dá)陰性。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2924606