本文關(guān)鍵詞：金石墨納米囊的細胞內(nèi)吞機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：納米材料獨特的理化性質(zhì)使他們已經(jīng)廣泛的用于構(gòu)建多功能納米復(fù)合體系并應(yīng)用于癌癥的診斷和治療,細胞成像,生物傳感等領(lǐng)域。納米材料也可作為載體在體內(nèi)高效的轉(zhuǎn)運一些小分子物質(zhì),如藥物,DNA,蛋白等。隨著納米材料在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的飛速發(fā)展,人們對納米材料的生物學(xué)效應(yīng)仍需要深入的研究,其中最重要的就是納米材料與細胞的相互作用。細胞攝取納米材料是納米材料產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的根本,因此研究細胞對納米材料的攝取具有重要的意義。研究細胞對納米材料的攝取尤其是對其內(nèi)吞機制的研究能夠有效的提高診斷的靈敏度和治療的效率,進一步拓展納米材料在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用范圍。我們通過化學(xué)氣相沉積法合成了核殼結(jié)構(gòu)的金石墨納米囊,具有很好的生物相容性。金石墨納米囊是由表面單層石墨烯包裹金納米顆粒構(gòu)成。本文中我們重點研究了金納米材料的細胞內(nèi)吞方式,主要內(nèi)容如下：(1)我們利用合成的GIAN,石墨烯具有拉曼信號可作為拉曼標(biāo)簽,金可作為拉曼增強基底從而使該材料具有很強的表面拉曼增強散射特性可用于拉曼成像,另一方面,GIAN也具有雙光子信號。我們利用GIAN這種獨特的雙模式成像可以更簡單便捷的觀察其與細胞的相互作用,進一步研究其進入細胞的方式。(2)核酸適配體是一種寡聚核苷酸鏈,通過分子內(nèi)折疊能夠形成三級結(jié)構(gòu),同時可以準確的特異性的靶向細胞蛋白。核酸適配體可以通過通過π-π堆積作用修飾GIAN,使GIAN具有靶向性,能夠特異的靶向細胞膜上的特異的蛋白,核酸適配體的修飾能夠影響GIAN進入細胞的方式。(3)納米材料的尺寸也會影響其被細胞攝取的方式,我們利用牛血清白蛋白介導(dǎo)合成了2nm尺寸的金納米簇,極小尺寸的金簇使得研究更小粒徑納米顆粒的內(nèi)吞途徑成為可能。這種金簇產(chǎn)物量子產(chǎn)率高,合成的金簇可以近紅外激發(fā),且具有極好的膠體穩(wěn)定性和極低的細胞毒性,通過利用熒光共聚焦顯微鏡成像,對細胞熒光分析研究其具體的細胞內(nèi)吞途徑。小尺寸的金簇進入細胞的方式與主要是通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑。
【關(guān)鍵詞】：金石墨納米囊 雙光子成像 拉曼成像 細胞內(nèi)吞 核酸適配體 金簇
【學(xué)位授予單位】：湖南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 第一章 緒論9-30
• 1.1 石墨烯概述9-18
• 1.1.1 石墨烯的性質(zhì)10-11
• 1.1.2 石墨烯的合成方法11-13
• 1.1.3 石墨烯在生物領(lǐng)域中的應(yīng)用13-18
• 1.2 金納米材料概述18-25
• 1.2.1 金納米材料的性質(zhì)19-20
• 1.2.2 金納米材料的合成方法20-21
• 1.2.3 金納米材料的修飾21-22
• 1.2.4 金納米材料在生物領(lǐng)域中的應(yīng)用22-25
• 1.3 納米顆粒與細胞的相互作用25-29
• 1.3.1 影響細胞攝取納米材料的因素26
• 1.3.2 細胞攝取納米材料的主要機制26-27
• 1.3.3 研究納米材料細胞攝取機制的方法27-28
• 1.3.4 納米材料在細胞內(nèi)的分布28-29
• 1.4 本研究論文構(gòu)思29-30
• 第2章 金石墨納米囊的細胞內(nèi)吞機制的研究30-40
• 2.1 前言30-31
• 2.2 實驗部分31-34
• 2.2.1 試劑與儀器31-32
• 2.2.2 GIAN的制備32
• 2.2.3 金石墨納米囊的表面親水修飾32
• 2.2.4 GIAN的表征32
• 2.2.5 細胞毒性實驗32-33
• 2.2.6 不同時間點細胞對于GIAN的攝取量的研究33
• 2.2.7 不同內(nèi)吞抑制劑對細胞攝取GIAN的影響33-34
• 2.2.8 GIAN的細胞成像實驗34
• 2.3 結(jié)果與討論34-39
• 2.3.1 GIAN的表征34-35
• 2.3.2 細胞毒性實驗35-36
• 2.3.3 共孵育時間對GIAN的細胞內(nèi)吞量的影響36-37
• 2.3.4 GIAN的細胞內(nèi)吞途徑的研究37-39
• 2.4 小結(jié)39-40
• 第3章 核酸適配體修飾的金石墨納米囊的細胞內(nèi)吞機制的研究40-46
• 3.1 前言40-41
• 3.2 實驗部分41-42
• 3.2.1 試劑與儀器41
• 3.2.2 核酸適配體修飾GIAN41-42
• 3.2.3 對核酸適配體修飾的GIAN進入細胞的途徑的研究42
• 3.3 結(jié)果與討論42-45
• 3.3.1 核酸適配體修飾GIAN的可行性驗證42-43
• 3.3.2 核酸適配體的修飾對GIAN與細胞相互作用的影響43-45
• 3.4 小結(jié)45-46
• 第4章 金納米簇與細胞相互作用及其細胞內(nèi)吞機制的研究46-52
• 4.1 前言46-47
• 4.2 實驗部分47-48
• 4.2.1 試劑和儀器47
• 4.2.2 AuNC@BSA的合成47
• 4.2.3 AuNC@BSA的表征47
• 4.2.4 不同pH對AuNC@BSA熒光的影響47-48
• 4.2.5 AuNC@BSA的細胞內(nèi)吞的研究48
• 4.3 結(jié)果與討論48-51
• 4.3.1 AuNC@BSA的熒光光譜表征48-49
• 4.3.2 金納米簇的動力學(xué)半徑及表面電勢表征49-50
• 4.3.3 共孵育時間對細胞內(nèi)吞的影響50
• 4.3.4 不同pH對AuNC@BSA熒光的影響50-51
• 4.3.5 AuNCs@BSA細胞內(nèi)吞途徑的研究51
• 4.4 小結(jié)51-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻53-62
• 附錄A 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文62-63
• 致謝63

  本文關(guān)鍵詞：金石墨納米囊的細胞內(nèi)吞機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：283206