本文關(guān)鍵詞：多肽P-15改性后的豬松質(zhì)骨支架材料與人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞相容性的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究經(jīng)P-15多肽改性后的豬松質(zhì)骨支架材料是否更適合人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的粘附、增殖以及分化。方法:(1)綜合目前去抗原方法對(duì)豬松質(zhì)骨支架材料進(jìn)行脫脂、脫蛋白處理。(2)傳代培養(yǎng)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞至第5代。(3)將骨支架材料分為兩組,每組36塊,實(shí)驗(yàn)組用P-15溶液浸泡24小時(shí),室溫干燥,對(duì)照組用PBS溶液浸泡24小時(shí),室溫干燥。每塊骨支架材料上滴加濃度為1×106/ml的人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞懸液250μl。分別在第6、12、24、48小時(shí)采用胰蛋白酶消化細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)算兩組的細(xì)胞粘附率;在第3、5、7、9天同樣采用胰蛋白酶消化細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)得兩組的細(xì)胞增殖情況,繪制增殖曲線;在3、7、14、21天將支架上細(xì)胞消化、裂解,測(cè)其成骨堿性磷酸酶的活性。結(jié)果:(1)經(jīng)過(guò)脫脂、脫蛋白處理的骨支架材料外觀呈白色,輕度發(fā)灰,似海綿狀的多孔隙材料,孔壁光滑,總體硬度無(wú)明顯變化,但脆性增加。(2)原代h AMSCs呈梭形、多角形或星形,貼壁生長(zhǎng),傳代培養(yǎng)后,細(xì)胞表現(xiàn)為成纖維細(xì)胞樣克隆,呈細(xì)長(zhǎng)的梭形,排列緊密,多呈放射狀或漩渦狀貼壁生長(zhǎng)。(3)h AMSCs在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組支架上細(xì)胞粘附率有明顯不同,第6小時(shí)實(shí)驗(yàn)組粘附率(20.0±2.6,%)對(duì)照組(19.3±1.5,%),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);實(shí)驗(yàn)組第12小時(shí)(40.7±1.5,%)、24小時(shí)(45.3±2.5,%)、48小時(shí)(52.7±1.2,%)粘附率均對(duì)照組12小時(shí)(24.3±4.1,%)、24小時(shí)(31.0±1.7,%)、48小時(shí)(37.3±4.7,%)粘附率,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);實(shí)驗(yàn)組第3天(20.7±2.5,×104)、第5天(30.3±2.3,×104)、第7天(42.3±3.5,×104)、第9天(41.3±6.5,×104)增殖細(xì)胞數(shù)均對(duì)照組第3天(14.7±0.6,×104)、第5天(20.7±4.0,×104)、第7天(29.7±1.1,×104)、第9天(33.0±5.6,×104)增殖細(xì)胞數(shù),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),比較結(jié)果實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖情況明顯優(yōu)于對(duì)照組;實(shí)驗(yàn)組第3天(0.362±0.052)、第7天(0.551±0.011)、第14天(0.785±0.034)、第21天(0.812±0.125)ALP OD值均對(duì)照組第3天(0.171±0.027)、第7天(0.383±0.055)、第14天(0.445±0.043)、第21天(0.580±0.662)ALP OD值,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:用P-15多肽將豬松質(zhì)骨支架進(jìn)行表面改性后,其更適合細(xì)胞的粘附、生長(zhǎng),此外P-15多肽還具有促進(jìn)成骨的作用。
【關(guān)鍵詞】：P-15多肽 豬松質(zhì)骨支架 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞相容性
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08;R687
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料11-13
• 實(shí)驗(yàn)方法13-17
• 結(jié)果17-23
• 討論23-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 綜述29-35
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 致謝35-36
• 作者簡(jiǎn)介36

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：多肽P-15改性后的豬松質(zhì)骨支架材料與人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞相容性的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：282892