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蜣螂疏水殼聚糖的止血作用及其機(jī)制初探

發(fā)布時(shí)間:2020-09-09 14:34
   研究背景據(jù)統(tǒng)計(jì)每年各類(lèi)傷害發(fā)生上億次,而失血過(guò)多則是導(dǎo)致受創(chuàng)致死的最主要因素,因此,受創(chuàng)后急救止血是治療的關(guān)鍵。傳統(tǒng)急救止血材料如普通紗布、止血帶或繃帶等,止血效果有限,難以適應(yīng)復(fù)雜出血的情況,急需更加靈活、簡(jiǎn)便高效的止血材料。受創(chuàng)后止血過(guò)程最早的反應(yīng)程序是血管收縮,從而減慢血流,促進(jìn)凝血及止血。止血材料要起作用,通常是聚集血小板和激活凝血系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn),但目前還沒(méi)有一種能夠完全滿(mǎn)足作為理想急救止血?jiǎng)┑牟牧。殼聚糖由于其?yōu)越的生物相容性、可降解性、安全性,以及兼具抗菌特性和成本低廉等特點(diǎn),是一種最具潛力的可不斷開(kāi)發(fā)的急救止血?jiǎng)。研究目的從蜣螂疏水殼聚糖的制備與表征、止血效果考察和機(jī)制探究三方面揭示其作為止血材料的可行性,并探究影響其止血的因素,為新型止血材料的開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法采用實(shí)驗(yàn)室自主專(zhuān)利技術(shù)提取制備蜣螂疏水殼聚糖,對(duì)制備產(chǎn)物進(jìn)行表征,通過(guò)元素分析儀和接觸角等儀器進(jìn)行理化分析,以紅外光譜儀和核磁波譜儀對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,以CCK8和流式細(xì)胞儀對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)評(píng)價(jià)。采用血液凝集和止血實(shí)驗(yàn)研究蜣螂疏水殼聚糖的止血功效,再以此為基礎(chǔ)進(jìn)一步研究其與血液中主要成分如紅細(xì)胞、核酸、蛋白和無(wú)機(jī)鹽等成分之間的作用關(guān)系,從而初步探明凝血機(jī)制。結(jié)果和結(jié)論蜣螂殼聚糖提取產(chǎn)率約為17.27%,蜣螂疏水殼聚糖改性產(chǎn)率約為91.54%。蜣螂疏水殼聚糖與疏水市售殼聚糖相比,溶解性好,黏度低,取代度高。接觸角、紅外、核磁結(jié)果顯示合成了疏水殼聚糖。生物學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果顯示,蜣螂疏水殼聚糖對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用;血液凝集與小鼠凝血實(shí)驗(yàn)表明,蜣螂疏水殼聚糖具有優(yōu)良的止血作用;止血機(jī)制探究表明,蜣螂疏水殼聚糖與細(xì)胞膜上的物質(zhì)有著某種作用,能富集細(xì)胞,改變細(xì)胞膜的通透性,從而牢固鏈接各個(gè)細(xì)胞。核酸和蛋白與蜣螂疏水殼聚糖之間均無(wú)凝集作用,而無(wú)機(jī)鹽離子與蜣螂疏水殼聚糖之間存在牢固的離子鍵合作用,能形成離子凝膠。因此,推斷蜣螂疏水殼聚糖能與血液中的血細(xì)胞和無(wú)機(jī)鹽作用形成血凝塊而止血,而非依賴(lài)瀑布凝血機(jī)制。
【學(xué)位單位】:西南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類(lèi)】:O636.1;R318.08
【部分圖文】:

接觸角,純水,疏水性


圖 3-1 接觸角測(cè)試結(jié)果由圖 3-1 的結(jié)果可知,純水與 CCS 的接觸角為 49.35°,純水與 CS 的接觸角為67.26°,純水與 CHMC 的接觸角為 91.51°,純水與 HMC 的接觸角為 104.46°,疏水改性前后差異極其顯著,表明合成了疏水產(chǎn)物,且產(chǎn)物的疏水性較強(qiáng)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn),HMC 的疏水性比 CHMC 強(qiáng),這與溶解性實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。3.2.2 結(jié)構(gòu)表征3.2.2.1 紅外分析4000 3000 2000 1000 0CSHMCC-CSC-HMC138816211670289429333459

核磁,圖譜,質(zhì)子,殼聚糖


圖 3-3 核磁圖譜如圖 3-3 所示,在δ=1.08 左右出現(xiàn)了-CH3對(duì)應(yīng)的三重質(zhì)子峰,δ=1.18 左右出現(xiàn)的質(zhì)子峰,其中亞甲基的峰面積明顯大于甲基的峰面積,說(shuō)明有烷基長(zhǎng)鏈的.90 左右出現(xiàn)了羥基和氨基的質(zhì)子峰。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與紅外光譜的測(cè)定結(jié)果一致應(yīng)發(fā)生在殼聚糖的氨基上,且生成了疏水殼聚糖。3.2.3 生物學(xué)表征3.2.3.1 CCK8 實(shí)驗(yàn)0.60.81.01.21.4lviabilityCCSCSCHMCHMC

流式,細(xì)胞凋亡


空白對(duì)照 CCSCS圖 3-6 細(xì)胞凋亡流式檢測(cè)圖100500024Apoptoticrate(%)Concentration(ug/ml)CKCCSCSCHMCHMC

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本文編號(hào):2815095

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