【摘要】：Anillin是細(xì)胞內(nèi)一種重要的腳手架蛋白和調(diào)節(jié)因子,作用于細(xì)胞的整個(gè)周期,與肌動(dòng)蛋白纖維(F-actin),肌球蛋白II,Rho A以及隔膜蛋白等多種蛋白相互連接、相互作用。細(xì)胞內(nèi)的Anillin維持一個(gè)適當(dāng)?shù)钠胶馐潜匾?Anillin過(guò)量表達(dá)會(huì)增加癌細(xì)胞的遷移能力或者導(dǎo)致局灶性節(jié)段性腎小球硬化,而太少或者不表達(dá)Anillin則會(huì)擾亂分裂細(xì)胞的收縮環(huán)和細(xì)胞膜的完整性。同時(shí),細(xì)胞表面彈性模量等力學(xué)特性又是區(qū)別癌細(xì)胞的重要指標(biāo)。因此,研究Anillin對(duì)細(xì)胞骨架蛋白和力學(xué)特性的調(diào)節(jié)作用,能夠?yàn)榘┌Y等病癥的臨床診斷與治療提供有價(jià)值的參考。本文主要研究的是Anillin的缺失對(duì)細(xì)胞骨架蛋白和細(xì)胞力學(xué)特性的影響。使用RNA干擾技術(shù)篩選獲得了Anillin RNA穩(wěn)定敲降的Hela細(xì)胞株,并轉(zhuǎn)入mCherry-肌球蛋白II A熒光蛋白。分別利用熒光漂白恢復(fù)(FRAP),線熒光強(qiáng)度分析等方法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)肌球蛋白IIA沿細(xì)胞長(zhǎng)軸的分布和轉(zhuǎn)運(yùn)速率;熒光染色檢測(cè)肌動(dòng)蛋白纖維分布特征;采用原子力顯微鏡測(cè)定細(xì)胞不同位置的表面彈性模量和長(zhǎng)軸邊緣區(qū)域的破膜力。結(jié)果如下:(1)Anillin缺失會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)肌球蛋白II長(zhǎng)軸末端分布減少,轉(zhuǎn)運(yùn)速率變慢;(2)肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞邊緣聚集但無(wú)明顯規(guī)則排列的肌動(dòng)蛋白纖維,胞體中的肌動(dòng)蛋白纖維無(wú)沿長(zhǎng)軸分布的特征;(3)Anillin敲降細(xì)胞的表面彈性模量明顯增大,但長(zhǎng)軸邊緣破膜力并無(wú)明顯差別。本文的結(jié)果表明:Anillin主要通過(guò)作用于細(xì)胞邊緣的骨架結(jié)構(gòu)與分布對(duì)胞內(nèi)進(jìn)行區(qū)域性調(diào)節(jié),這種結(jié)果對(duì)應(yīng)著細(xì)胞表面彈性模量分布的特征,但是不顯著影響破膜力。Anillin通過(guò)與骨架蛋白、細(xì)胞表面彈性模量共同作用影響著細(xì)胞-細(xì)胞相互作用、極性建立等生理活動(dòng)。
【學(xué)位授予單位】：太原理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R318.01

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本文編號(hào)：2792700