【摘要】：聚己內(nèi)酯(PCL)是一種生物高分子材料,被廣泛地應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。為了增強(qiáng)聚己內(nèi)酯的生物相容性,需要在聚己內(nèi)酯材料表面進(jìn)行肝素化修飾,使肝素以共價(jià)鍵的形式穩(wěn)定地結(jié)合在聚己內(nèi)酯表面。通過(guò)終點(diǎn)固定的方法,利用醛基和氨基發(fā)生席夫堿反應(yīng),把肝素固定在聚己內(nèi)酯材料表面。用甲苯胺藍(lán)染色法測(cè)得肝素固定化效率為6μg/cm~2。用X射線光電子能譜(XPS)和傅里葉紅外光譜進(jìn)一步檢測(cè)分析材料結(jié)構(gòu)。XPS分析發(fā)現(xiàn)肝素化聚己內(nèi)酯材料表面增加了氮、硫、鈉等元素信號(hào);傅里葉紅外光譜分析表明該材料增加了C-N和N-H振動(dòng)峰。這些實(shí)驗(yàn)證明肝素已經(jīng)與聚己內(nèi)酯形成了共價(jià)結(jié)合。為了研究固定化肝素的結(jié)構(gòu)和功能,本文還構(gòu)建了gor trxB缺陷型大腸桿菌,用該菌株表達(dá)了五種肝素修飾酶。谷胱甘肽還原酶(Gor)和硫氧還蛋白還原酶(TrxB)是氧化還原體系中重要的兩種酶,敲除trxB基因和gor基因能阻斷大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的氧化還原途徑,增強(qiáng)二硫鍵的形成,保證外源蛋白的正常折疊。本文通過(guò)λ-red重組系統(tǒng)敲除大腸桿菌中的gor和trxB基因,構(gòu)建了gor trxB缺陷型菌株;利用gor trxB缺陷菌株表達(dá)純化出四種硫酸轉(zhuǎn)移酶和C5差向異構(gòu)酶。這四種硫酸轉(zhuǎn)移酶和C5差向異構(gòu)酶可用于后續(xù)探索肝素化聚己內(nèi)酯材料的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)活性。終點(diǎn)固定法能夠把肝素分子有效地固定在聚己內(nèi)酯材料表面,為進(jìn)一步研究該材料的功能和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R318.08
【圖文】：

第一章 緒論第一章 緒論酯酯（polycaprolactone，PCL），是一種半結(jié)晶型脂肪族聚酯材于化工、材料、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域[1]。其外觀為白色固體顆粒，可溶、二氯甲烷、苯、甲苯、環(huán)己酮等有機(jī)溶劑，不溶于水[2]。PC圖 1.1 所示[3]。PCL 的玻璃化溫度為-60℃，熔點(diǎn) 59℃到 64℃ 350℃。PCL 具有良好的熱塑性，可以加工成各種形狀和尺寸良好的生物相容性和生物可降解性，因此被廣泛的應(yīng)用于各種給藥系統(tǒng)，組織工程和納米醫(yī)學(xué)[4-10]。

現(xiàn)性和可控制性。Massella 等用瞬時(shí)納米沉淀法，用于經(jīng)皮給藥，構(gòu)建的 PCL 納米粒子能精確，包埋過(guò)程非常高效[5]。泛使用的抗凝血藥物，首先從肝臟發(fā)現(xiàn)而得名和肝、肺、小腸等組織中[20, 21]。目前市面上的中提取，提取純化得到的肝素平均分子量在 1胺聚糖，由艾杜糖醛酸和葡萄糖胺以 1-4 糖苷鍵，具有多種生物學(xué)功能。肝素結(jié)構(gòu)如圖 1.2 所位，分子量 4000-20000，平均分子量為 12000硫酸-N-硫酸-A-D 葡萄糖胺是其中的主要單糖糖醛酸，B-D 葡萄糖醛酸，6-O-硫酸葡萄糖胺等

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本文編號(hào)：2742032