【摘要】：膠原海綿主要是從動物體內(nèi)提取的I型膠原經(jīng)過冷凍干燥等工藝制備成的一種醫(yī)用海綿,它作為一種醫(yī)用材料被廣泛的應(yīng)用于創(chuàng)面的止血和修復(fù)過程。當(dāng)前,醫(yī)用膠原主要提取自陸生豬、牛等哺乳動物的結(jié)締組織,但由于近來人畜共患病的傳播,以及成品價格昂貴、材料來源有限等原因,其安全性及經(jīng)濟(jì)性廣受質(zhì)疑。相對而言,以魚類為代表的水產(chǎn)源膠原具有成本較低、材料來源廣、生物安全性高等優(yōu)勢,因此研發(fā)出可以代替或補(bǔ)充傳統(tǒng)牛(或豬)膠原的新型魚源膠原已成為國內(nèi)外諸多相應(yīng)領(lǐng)域的研究熱點。本文研究選取兩種魚皮膠原海綿R和S,膠原原料均來自羅非魚魚皮,是經(jīng)凍干后制成具備疏松多孔架構(gòu)的海綿。該材料計劃開發(fā)為一種創(chuàng)傷止血敷料,達(dá)到傷口止血和促愈合的效果。本文研究的主要內(nèi)容是通過測量和比較兩種海綿的理化性能、生物安全性、體內(nèi)外止血性能等,評定該材料應(yīng)用于創(chuàng)傷止血修復(fù)的可行性。1、分別測定兩種海綿的抗拉強(qiáng)度、微觀結(jié)構(gòu)、孔隙率、熱穩(wěn)定性、吸水率以及酶解穩(wěn)定性,結(jié)果顯示膠原海綿R和S的抗拉強(qiáng)度為0.57±0.13 MPa和0.11±0.04 MPa;斷裂伸長率為6.32%和31.99%;孔隙率為91.25%和97.38%;吸水率為33.6倍和19.9倍;熱變性溫度為49.7±3.5℃和46.1±1.6℃;酶解時間均為85±7.1 min;電鏡掃描結(jié)果顯示兩者結(jié)構(gòu)均疏松多孔,材料R的纖維排列規(guī)則,材料S相對無序且結(jié)構(gòu)更松散。通過實驗檢測,證明兩種海綿均具有較好的吸水性和孔隙率等理化性能,能夠達(dá)到相關(guān)醫(yī)療器械標(biāo)準(zhǔn)對魚皮膠原海綿作為創(chuàng)傷敷料的機(jī)械性能要求。2、通過溶血試驗、體外細(xì)胞毒性試驗、皮下植入后局部反應(yīng)試驗分別測定兩種膠原海綿對血液的影響、對細(xì)胞的急性毒性反應(yīng)和以及在大鼠體內(nèi)的可降解性。結(jié)果顯示,魚皮膠原海綿R、S未產(chǎn)生溶血現(xiàn)象;未發(fā)現(xiàn)潛在的細(xì)胞毒性;膠原海綿R在2周時接近完全降解,膠原海綿S在4周時降解,炎癥反應(yīng)均較弱,且無明顯排異反應(yīng),證明其生物相容性較好。3、通過體外凝血實驗、大鼠肝臟止血實驗、大鼠股動脈止血實驗和大鼠皮膚創(chuàng)傷修復(fù)實驗分別檢驗兩種材料的止血性能和修復(fù)皮膚創(chuàng)傷的生物活性。結(jié)果顯示,膠原海綿S在不同止血測試中都具有更好的綜合止血效能,略優(yōu)于上市膠原產(chǎn)品,海綿R的止血效果也明顯優(yōu)于陰性對照組;兩種材料對大鼠皮膚創(chuàng)傷均有不同程度的促愈合功效。理化指標(biāo)檢測和生物學(xué)評價結(jié)果表明:兩種魚皮膠原海綿R和S都能夠滿足醫(yī)療器械產(chǎn)品的機(jī)械性能要求,對于傷口創(chuàng)面的止血和修復(fù)都有較好功效。魚皮膠原海綿R的止血效能更加突出。
【學(xué)位授予單位】：煙臺大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R318.08
【圖文】：

2 膠原海綿的理化性能研究2.3 實驗方法2.3.1 膠原原液的蛋白含量（1）用微量移液器分別精準(zhǔn)移取牛血清白蛋白溶液 0.0 mL、0.2 mL、0.4 m0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL 置于具塞試管中并加水至 1.0 mL，再分別加入 4.0 m雙縮脲試劑即刻混合。室溫放置 30 min。使用紫外-可見分光光度計，將波長整為 540 nm，測定吸光度。以溶液中蛋白質(zhì)濃度對其相應(yīng)的吸光度計算其線回歸方程并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）將魚皮膠原原液稀釋多個倍數(shù)，分別測定其吸光度。選取其吸光度圍在 0.2-0.6 內(nèi)的一組稀釋倍數(shù)做多次平行。根據(jù)其吸光度從線性回歸方程計膠原液的蛋白質(zhì)濃度，并乘以稀釋倍數(shù)，即可得到膠原原液濃度［67］。

為 m1。海綿浸入離心管中，超聲脫氣 5 分鐘，用移液錄離心管總質(zhì)量 m2。出海綿，稱取離心管和剩余乙醇的總質(zhì)量，記為K(%)=100%×(m2-m3-m)/(m1-m3)皮膠原海綿(圖 2-1 所示)壓成啞鈴狀的樣品。個樣品測三次取平均值。用電子萬能試驗機(jī)測。將啞鈴形樣品固定在微電腦控制的電子萬能-2 所示）。在 25℃，50％恒定溫度和濕度下，以拉伸，以10 mm/min的速率增加拉力測試濕樣品室溫下將干樣品浸沒在 PBS 緩沖溶液中使其模量、抗張強(qiáng)度、斷裂伸長率。

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10 何先

本文編號：2739666