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突變蛋白導向構筑三維等離激元石墨烯凝膠用于細胞SERS成像

發(fā)布時間:2020-06-13 15:08
【摘要】:尋求用于多種模式下生物成像和治療的多功能納米平臺是一項具有挑戰(zhàn)性的任務。本文提出了用于控制3D超分子組裝的通用自下而上生物納米技術。通過基因工程突變二聚體蛋白和等離子體工程GO可以證明超分子結構的工程概念證明。在GO的3D超分子結構中摻入各向異性等離子體納米顆粒作為中間層可以提供共價共軛位點并同時賦予GO的可調光學性質,其范圍從紫外到近紅外區(qū)域。有趣的是,精確設計目的基因的特異性雙位點突變有利于給出有序的組裝而不是GO的隨機網狀結構,這有助于提供優(yōu)異的增強拉曼成像以跟蹤癌細胞的行為。通過亞微米超分子組裝體能夠滲透到細胞核中表現出優(yōu)異的癌細胞核內治療潛力。由于蛋白質在癌癥治療、疫苗接種和再生醫(yī)學等領域的廣泛應用,其在細胞內的傳遞一直受到人們的關注。然而,將治療性蛋白質遞送至包括細胞質、細胞核和線粒體等細胞器是非常具有挑戰(zhàn)性的任務,因為其難以逃避內體通路,避免通過內膜隔室被轉運。因此,制備用于蛋白質遞送至細胞內的有效納米載體,例如基于聚合物、脂質介導、基于無機和蛋白質介導的納米載體,已經引起了了越來越多研究者的興趣。將性能互補蛋白質和納米顆粒進行結合,將無機基納米載體和功能性生物分子結合到納米結構中,以納米材料支架為依托加載蛋白質。蛋白質和無機納米粒子的自組裝其基于疏水相互作用,主客體包封或靜電吸引的非共價偶聯(lián)作用,這主要依賴于天然互補相互作用。在此,我們提出了用于給出蛋白質納米顆粒超分子結構的程序化合成的共同工程組裝方法。我們通過基因工程蛋白和等離子體工程無機/有機聚合物氧化石墨烯的代表性實例證明了該提議。作為柔性2D材料,石墨烯或氧化石墨烯(GO)由于其水分散性、低細胞毒性以及與碳納米管相比具有大的表面積,而已廣泛應用于生物傳感和生物醫(yī)學應用。將柔性2D石墨烯片組裝成3D結構促進了石墨烯材料在能量、傳感、生物領域的廣泛應用。因為它們具有優(yōu)異的性能,因此一些先進技術包括已經開發(fā)出模板制導、化學氣相沉積、膠體球合成、溶劑熱合成、溶膠凝膠合成等,已經被開放用于制造石墨烯3D結構。對石墨烯或氧化石墨烯3D結構的研究一直專注于3D隨機互連石墨烯網絡的制造和應用;相比之下,由于其層疊良好、高度有序的多層結構,以此構建有組織的體系結構,如層疊結構或液晶結構,顯得更具挑戰(zhàn)性。到目前為止,GO層狀結構的研究僅限于聚合物引導技術;然而到目前為止,還沒有關于工程化蛋白質氧化石墨烯超分子組裝的報道。在本文中,為了控制GO的3D超分子結構(GO 3D SA),設計了氧化石墨烯與基因工程蛋白結合的金屬夾層等離子體工程。該途徑解決了GO生物醫(yī)學應用的幾個關鍵問題。(Ⅰ)無機/有機三維雜化物作為穩(wěn)定的膠囊,為離子和分子的進入和擴散以及治療性蛋白質的細胞內遞送提供了有效途徑。(Ⅱ)利用基因工程突變蛋白代替野生型蛋白與納米粒子共組裝,賦予超分子結構。(Ⅲ)各向異性等離子體中間層可以避免GO的糾纏,為跟蹤癌細胞提供可調的光學能力。(Ⅳ)有效的藥物負載特征是可以實現超分子組裝的刺激響應藥物釋放。
【圖文】:

再生醫(yī)學,石墨,組織工程,烯基


1.1石墨烯簡介逡逑石墨烯是碳的結晶形式之一,它是sp雜化的單層軌道,,緊密堆積到二維逡逑(2D)蜂窩晶格中(圖1.1)。每個碳原子都有三個0鍵和一個平面外的71鍵,逡逑它們可以與相鄰的原子結合[1]。該原子結構與石墨烯的電子分布相結合,導致高逡逑導熱性、獨特的光學行為、優(yōu)異的機械性能、極端條件下的化學穩(wěn)定性和大的表逡逑面積。此外,通過化學和物理改性,石墨烯片可以轉化為石墨烯相關材料,例如逡逑單層和多層石墨烯,氧化石墨烯(GO)和還原GO邋(rGO),每種材料都具有獨逡逑特的可調特性。自從2004[J>年被發(fā)現,它己被廣泛地應用于各種領域,諸如柔性逡逑電子[3,4]、超級電容器[51、電池[6]、可打印的油墨[7]、光學及電化學傳感器&1Q]和逡逑儲能等[iw3]。逡逑Aft邋ftp邐f邋a!逡逑Tissue邋Engineering逡逑;邐Gene邋Sc.邋Dma邋delh邋ervr逡逑Grapl^ene逡逑(邐Wr'r邐\逡逑!邐Mecltanical邋Strength邋-邋1邋TPa邐I逡逑\邋Electrical邋Conductivity邋 ̄邋IO4邋S邋cm邋I逡逑\邋Optical邋Transimittance邋-邋97,7°0邋J逡逑QD-graphene邋M|逡逑m逡逑**邐Biosensor逡逑Bioimage逡逑3D邋prim

納米材料,石墨,復合物,轉染效率


[7Q]。GFP用于評估轉染效率,結果顯示PEI-GO復合物在EGFP轉染的細胞中提逡逑高了邋9倍。在制備了邋GO-PEI復合物以有效加載mRNA用于臨床應用[71](圖1.4邋b)。逡逑8逡逑
【學位授予單位】:安徽大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R318

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本文編號:2711355

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