本文關(guān)鍵詞：納米材料體外細(xì)胞毒性試驗標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵項目研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:參考ASTM標(biāo)準(zhǔn),研究納米材料體外細(xì)胞毒性檢測方法(MTT試驗和LDH試驗)中的關(guān)鍵項目指標(biāo),為制定納米材料體外細(xì)胞毒性試驗標(biāo)準(zhǔn)提供實驗依據(jù)。方法:通過全波長掃描獲得MTT試驗和LDH試驗的檢測波長;測試陽性對照品APAP的使用劑量和保存條件;通過改變MTT試劑的配制介質(zhì),以及DMSO溶解后加入和不加入甘氨酸緩沖液來測試MTT試驗條件;考察含不同濃度血清(10%,5%,2.5%)的細(xì)胞培養(yǎng)液對LDH試驗的背景影響;在確定優(yōu)化的實驗條件下用MTT試驗和LDH試驗,對某納米銀凝膠產(chǎn)品進(jìn)行細(xì)胞毒性評價。結(jié)果:MTT試驗和LDH試驗在測定吸光度時雙波長可分別設(shè)定為540～570/680 nm和490/680 nm。APAP作為陽性對照的合適濃度為20～30 mmol.L-1,該溶液保存條件為-20℃,14 d內(nèi)有效。血清對LDH試驗的干擾與濃度呈正相關(guān),為確保細(xì)胞正常生長,該方法中血清濃度確定為10%,血清造成的背景值干擾可從空白組扣除。納米銀凝膠產(chǎn)品MTT試驗和LDH試驗結(jié)果(IC50)分別為26.8 mg.mL-1和61.8 mg.mL-1。結(jié)論:MTT試驗和LDH試驗相結(jié)合可以在1個實驗體系內(nèi)獲得2個檢測結(jié)果,能夠更全面地評價納米材料可能引起的細(xì)胞毒性。本課題確定了納米材料體外細(xì)胞毒性檢測方法(MTT試驗和LDH試驗)的關(guān)鍵項目指標(biāo),使該方法具有良好的操作性與可行性。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院;
【關(guān)鍵詞】： 納米材料 細(xì)胞毒性 -( -二甲基--噻唑)- 二苯基-氫-四氮唑溴鹽試驗 乳酸脫氫酶試驗 標(biāo)準(zhǔn)研究 醫(yī)療器械
【基金】：國家科技支撐計劃:支撐認(rèn)證認(rèn)可的評價分析/檢測驗證與有效性保障技術(shù)研究與示范;(2012BAK26B00),子課題:快速檢測關(guān)鍵材料評價技術(shù)研究與示范 東南大學(xué)生物電子學(xué)國家重點實驗室開放研究基金:納米醫(yī)療器械的免疫學(xué)研究(2011E04) 北京市自然基金:納米銀透過體外血腦屏障模型引起腦神經(jīng)毒性的機理研究(311204) 中國食品藥品檢定研究院學(xué)科帶頭人基金:金銀敷料中銀存在形式和釋放特性的表征方法研究(2012X2) 中央財政支持國家局醫(yī)療器械行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(N2012099－T－zjs)
【分類號】：R318.08
【正文快照】： 醫(yī)療器械生物學(xué)評價系列標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 16886)中細(xì)胞毒性評價是一項常規(guī)評價項目[1],其中的MTT試驗主要是評價醫(yī)療器械本身或浸提液可能引起的細(xì)胞線粒體功能障礙,即琥珀酸脫氫酶活性的抑制,從而考察細(xì)胞活性和生長狀態(tài),可以用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5二苯基-2氫-四氮唑溴鹽(MTT

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 楊輝;楊丹鳳;張華山;張偉;劉煥亮;劉超;襲著革;;4種典型納米材料對小鼠胚胎成纖維細(xì)胞毒性的初步研究[J];生態(tài)毒理學(xué)報;2007年04期

2 徐麗明;陳亮;董U，

本文編號：269034