【摘要】：隨著人們生活節(jié)奏的加快,生活壓力也越來(lái)越大,繼而導(dǎo)致了越來(lái)越多的人患上心肌梗塞,肝硬化等疾病。因此每年都有大量的人死于肝病(如肝癌、肝硬化)和心臟病(如冠心病等)。肝癌和冠心病更是嚴(yán)重的威脅了人類(lèi)的健康。肝病和心臟病的通常采用的治療手段是肝移植和心臟支架。目前使用的各種支架都有各自的弊端,因此尋找一種各方面都較好的支架材料迫在眉睫。木素-碳水化合物復(fù)合體(Lignin-carbohydrate complexes,LCC)具有良好的兩親性、生物相容性、無(wú)毒性、可降解性等特性,是一種很好的醫(yī)用高分子材料。本研究對(duì)LCC在組織工程支架中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。本文從以不同球磨時(shí)間(48h和72h)下制得的楊木的水不溶部分LCC-48和LCC-72,在聚乙二醇縮水甘油醚存在下,由上述LCC制備的干凝膠多孔載體。FT-IR光譜表明兩種LCC樣品由木素和多糖組成,并且顯示典型的LCC結(jié)構(gòu)。LCC-48和LCC-72的半乳糖含量分別為3.02%和5.67%,表明LCC-72更容易被人肝細(xì)胞識(shí)別。LCC-48和LCC-72分子量分別為9836和7153。LCC-48和LCC-72基多孔載體比表面積為26.311 m~2/g、21.263 m~2/g它們的孔徑分別為29.627nm和23.812 nm。將上述干凝膠多孔載體用于人肝細(xì)胞L-02,隨著球磨時(shí)間的延長(zhǎng),LCC制成的多孔材料的孔隙率和孔徑隨之下降。通過(guò)倒置顯微鏡、SEM觀察發(fā)現(xiàn)大量的肝細(xì)胞粘附在多孔載體上。在LCC-72基載體上生長(zhǎng)的肝細(xì)胞優(yōu)于LCC-48基載體和對(duì)照組。細(xì)胞體外培養(yǎng)的白蛋白分泌量、血尿素氮分泌量以及葡萄糖消耗量的測(cè)定表明LCC-72的結(jié)果優(yōu)于LCC-48和空白樣。以LCC-48、LCC-72以及NCC為原料,通過(guò)液氮冷凍制備復(fù)合球形載體,通過(guò)紅外光譜、SEM等實(shí)驗(yàn)對(duì)球形載體形態(tài)及組分進(jìn)行分析,然后通過(guò)人體肝細(xì)胞L-02培養(yǎng),對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行倒置顯微鏡觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)、SEM觀察,并檢測(cè)其細(xì)胞的代謝活性。結(jié)果表明復(fù)合球形載體具有典型的木素和聚糖復(fù)合物的結(jié)構(gòu),LCC-72/NCC復(fù)合球形載體和LCC-48復(fù)合球形載體的比表面積分別為24.262 g/m~2和28.938 m~2/g,它們的孔徑分別為28.617nm和33.565 nm,通過(guò)倒置顯微鏡、SEM觀察表明大量的肝細(xì)胞粘附在多孔載體上。在LCC-72/NCC基復(fù)合球形載體上生長(zhǎng)的肝細(xì)胞優(yōu)于LCC-48/NCC基復(fù)合球形載體和對(duì)照組。細(xì)胞體外培養(yǎng)的白蛋白分泌量,血尿素氮分泌量以及葡萄糖消耗量的測(cè)定結(jié)果表明LCC-72/NCC球形復(fù)合載體的生物相容性?xún)?yōu)于LCC-48/NCC球形復(fù)合載體和空白組,且在LCC/NCC球形載體中其生物相容性隨LCC含量的增加而提高,當(dāng)LCC含量為超過(guò)50%,LCC/NCC生物相容性不再隨LCC含量的變化而變化。以LCC-48、LCC-72以及CNF為原料,通過(guò)流延成膜法和卷曲成型法制備復(fù)合管狀載體,并對(duì)形態(tài)進(jìn)行分析,然后通過(guò)人體冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng),對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行倒置顯微鏡觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)、SEM觀察,并檢測(cè)其細(xì)胞活性。結(jié)果表明LCC-72/CNF復(fù)合管狀載體和LCC-48/CNF復(fù)合管狀載體的比表面積分別為3.497 m~2/g、3.956 m~2/g,它們的孔徑分別為8.302nm、9.001 nm,通過(guò)倒置顯微鏡、SEM觀察表明大量的人心臟冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞粘附在多孔載體上。在LCC-72/CNF復(fù)合管狀載體上生長(zhǎng)的肝細(xì)胞優(yōu)于LCC-48/CNF基載體以及對(duì)照組。細(xì)胞體外培養(yǎng)的白蛋白分泌量,血尿素氮分泌量以及葡萄糖消耗量的測(cè)定結(jié)果表明LCC-72/CNF管狀復(fù)合載體的生物相容性?xún)?yōu)于LCC-48/CNF管狀復(fù)合載體和空白樣生物活性,且在LCC/CNF球形載體的生物相容性隨LCC含量的增加而提高,當(dāng)LCC含量為超過(guò)60%,LCC/CNF生物相容性不再隨LCC含量的變化而變化。
【圖文】：

[96-97]。木質(zhì)素大分子是通過(guò)三種單木質(zhì)醇的脫氫聚合形成的：香豆醇，松柏醇和芥子醇，其結(jié)構(gòu)如圖1.1所示。木質(zhì)素是合成環(huán)境友好聚合物的主要生物資源原料之一，其高含量的芳香族結(jié)構(gòu)提供了替代了工業(yè)上相關(guān)的芳香聚合物和精細(xì)化學(xué)品[98]。但是，，每年只有大約2％的木質(zhì)素能夠從造紙和制漿工業(yè)中提取出來(lái)，但是大部分提取的木質(zhì)素主要用于低價(jià)值應(yīng)用，如作為分散劑，粘合劑和填料[99]。這主要是由于木質(zhì)素結(jié)構(gòu)復(fù)雜多變性，多分散性和不混溶性�？朔@些限制的另一種方式是制備木質(zhì)素納米顆粒，其改善了木質(zhì)素的性質(zhì)，并對(duì)木質(zhì)素的形態(tài)和結(jié)構(gòu)進(jìn)行可變的控制[100-102]。除此之外納米結(jié)構(gòu)木質(zhì)素的制備也為以高價(jià)值應(yīng)用木質(zhì)素基材料開(kāi)辟了可能性

圖 1.3 LCC 材料與肝細(xì)胞的結(jié)合Fig1.3 Binding of LCC material to hepatocyte 制備支架材料的方法為了分析LCC的生物相容性并將其用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，需要對(duì)LCC材料進(jìn)行支架的，目前，對(duì)于組織工程支架較為成熟的制備有以下5種常見(jiàn)的方法：1、霧化涂層方法，2、靜電紡絲，3、粒子浸出-常溫模壓成型，4、3D打印方法，5、成膜法等。.1 霧化/噴霧涂層方法所謂霧化/噴霧涂層方法首先將對(duì)組織細(xì)胞無(wú)害、易得的高分子材料進(jìn)行壓縮，然后對(duì)此高分子材料進(jìn)行消毒處理，對(duì)處理后的成型的高分子進(jìn)行噴上一解于醋酸的不溶于水的LCC溶解。除去有機(jī)溶劑，得到表面有不規(guī)則的孔隙層材料，通過(guò)卷曲薄層材料使其變成圓柱狀支架，通過(guò)此材料卷曲的圓柱支有較好的機(jī)械強(qiáng)度、較強(qiáng)的彈性、較高的孔隙率以及具有很好的在弱酸弱堿
【學(xué)位授予單位】：湖北工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2690259