【摘要】：目的:瓷熔附金屬全冠(PFM)是口腔臨床中最常用的修復(fù)手段之一,但是PFM金屬基底的體內(nèi)毒性尚未明確。本研究選擇臨床常用的PFM的金屬基底,檢測(cè)和比較其對(duì)斑馬魚胚胎及幼魚發(fā)育的影響,對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)估,進(jìn)而為臨床修復(fù)體材料的選擇提供參考依據(jù)。材料和方法:將金合金、銀鈀合金、鎳鉻合金、鈷鉻合金、鈦合金烤瓷冠的金屬基底制備而成的標(biāo)準(zhǔn)試件,用人工唾液分別浸泡1、4、7周;收集浸提液,將受精后4小時(shí)的斑馬魚胚胎暴露在金屬浸提液中至144小時(shí),以檢測(cè)浸提液對(duì)斑馬魚胚胎和幼魚的影響。通過在不同的時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)計(jì)斑馬魚胚胎及幼魚的死亡率,胎動(dòng),心率,孵化率,畸形率和幼蟲行為測(cè)試毒性。用浸提液預(yù)處理發(fā)育正常的4hpf胚胎,采用DCFH-DA熒光探針檢測(cè)24hpf胚胎體內(nèi)的活性氧水平;在24hpf,使用吖啶橙(AO)染色法檢測(cè)和實(shí)時(shí)熒光定量分析(RT-PCR)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組斑馬魚胚胎體內(nèi)的凋亡細(xì)胞和凋亡相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:5種PFM的1W浸提液沒有顯示斑馬魚毒性。而4W和7W浸提液中,鎳鉻合金組斑馬魚死亡率、畸形率明顯升高,胎動(dòng)、心率和游泳距離明顯降低,鈷鉻合金組和銀鈀合金組同樣出現(xiàn)斑馬魚死亡率、畸形率升高及胎動(dòng)、心率和游泳距離的降低但程度較鎳鉻合金組低,而且鎳鉻合金、鈷鉻合金、銀鈀合金的7D浸提液毒性均大于4W浸提液,而4W、7W鈦合金組、金鈀合金組和人工唾液組死亡率、畸形率、胎動(dòng)、心率及游泳距離與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。鎳鉻合金浸提液對(duì)斑馬魚胚胎內(nèi)ROS水平以及SOD活性的影響:24 hpf時(shí),1W組斑馬魚胚胎體內(nèi)ROS水平及SOD活性與對(duì)照組無差異,4W、7W組斑馬魚胚胎體內(nèi)ROS水平顯著升高,SOD活性顯著降低(P0.001)。鎳鉻合金浸提液對(duì)斑馬魚胚胎凋亡的影響:AO染色顯示1W組斑馬魚胚胎的早期凋亡細(xì)胞較對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,4W、7W組可顯著增加細(xì)胞凋亡;RT-PCR顯示1W實(shí)驗(yàn)組的促凋亡基因Bax、Caspase9、Caspase3的表達(dá)量與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組抗凋亡基因Bcl2的表達(dá)量降低(P0.05);而4W、7W實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比,促凋亡基因Bax、Caspase9、Caspase3的表達(dá)明顯上調(diào),抗凋亡相關(guān)基因Bcl2也出現(xiàn)顯著下調(diào)(P0.05)。結(jié)論:臨床常用的PFM的金屬基底中,鎳鉻合金具有較強(qiáng)的毒性,鈷鉻合金和銀鈀合金次之,鈦合金和金合金具有較好的生物相容性,因此在臨床工作中,應(yīng)根據(jù)具體情況和合金的毒性情況選擇最適合患者的合金材料。鎳鉻合金7W組浸提液一方面因金屬離子的的直接作用增加ROS來源,另一方面通過抑制SOD活性減少ROS的消除,使ROS在斑馬魚胚胎內(nèi)堆積,繼而通過氧化應(yīng)激反應(yīng),對(duì)斑馬魚胚胎造成損傷。鎳鉻合金7W組浸提液一方面通過促進(jìn)凋亡相關(guān)基因的表達(dá)產(chǎn)生凋亡作用,另一方面通過抑制抗凋亡相關(guān)基因的表達(dá)抑制DNA損傷的修復(fù),對(duì)斑馬魚胚胎造成損傷。
【圖文】：

圖 1 不同浸泡時(shí)長(zhǎng)的合金浸提液對(duì)死亡率的影響。 每個(gè)值表示為平均值±SEM（N =100）。 與對(duì)照組相比，* P <0.05，** P <0.01 和*** P <0.001。Figure 1 Effect of alloy leaching solution with different durations on mortality. Each value isxpressed as the mean ± SEM (N = 100). *p<0.05, ** p<0.01 and *** p<0.001 versus the control

圖 2 不同浸泡時(shí)長(zhǎng)的合金浸提液對(duì)孵化率的影響。 每個(gè)值表示為平均值±SEM（N = 3）。與對(duì)照組相比，* P <0.05，，** P <0.01 和*** P <0.001。Figure 2 Effect of alloy leaching solution with different durations on hatchability. Eachvalue is expressed as the mean ± SEM (N = 3). *p<0.05, ** p<0.01 and *** p<0.001 versusthe control group.
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R783.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 WANG Zhen Guo;ZHOU Rong;JIANG Dan;SONG Jing E;XU Qian;SI Jing;CHEN Yun Ping;ZHOU Xin;GAN Lu;LI Jian Zhen;ZHANG Hong;LIU Bin;;Toxicity of Graphene Quantum Dots in Zebrafish Embryo[J];Biomedical and Environmental Sciences;2015年05期

本文編號(hào)：2689493