【摘要】：目的探索含銅生物玻璃陶瓷對(duì)骨軟骨界面修復(fù)的作用及誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的免疫應(yīng)答。方法以生物玻璃陶瓷為基底材料,制備含銅生物玻璃陶瓷(Cu-BGC),配置不同濃度的浸提液分別培養(yǎng)軟骨細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞在不同濃度下的增殖情況選擇合適的濃度范圍檢測(cè)軟骨細(xì)胞相關(guān)的基因和蛋白表達(dá)水平,以及巨噬細(xì)胞相關(guān)的炎性因子和表面標(biāo)志物的表達(dá)情況,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果并用單獨(dú)的銅離子溶液相應(yīng)的濃度分別培養(yǎng)軟骨細(xì)胞和巨噬細(xì)胞進(jìn)一步驗(yàn)證。隨后,通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證銅離子在體內(nèi)對(duì)軟骨和軟骨下骨界面的修復(fù)作用,并用組織化學(xué)染色評(píng)估其修復(fù)情況。結(jié)果本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)研究了Cu-BGC支架體外和體內(nèi)對(duì)骨軟骨生物活性的影響。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Cu-BGC釋放的銅離子顯著促進(jìn)軟骨細(xì)胞的增殖、分化,并能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向抗炎表型極化。組織切片染色表明,Cu-BGC支架顯著促進(jìn)軟骨再生和骨軟骨界面的修復(fù)。其潛在機(jī)制與Cu~(2+)密切相關(guān),Cu~(2+)通過(guò)激活HIF信號(hào)通路觸發(fā)軟骨的免疫應(yīng)答,并抑制骨軟骨組織的炎癥反應(yīng)。結(jié)論Cu-BGC支架顯著刺激軟骨和骨軟骨界面的再生,并抑制炎癥反應(yīng),這為治療骨關(guān)節(jié)炎引起的骨軟骨缺損提供了新的策略。
【圖文】：

表 3 Cu-BGC 浸提液中 Cu、Ca、Si、P 離子濃度如圖表 3，配置 200 mg/mL 浸提原液后稀釋至相應(yīng)濃度后，通過(guò) ICP 測(cè)試浸提液中 Cu、Ca、Si、 P 的濃度。其中，25 mg/mLCu-BGC 浸提液中 Cu2+濃度為 16 ppm。1.2 Cu-BGC 支架的表征離子濃度(mg/L) 0 (CTR)粉體浸提液中離子濃度 (ppm)BGC Cu-BGC0.781 3.125 12.5 25 0.781 3.125 12.5 25Cu 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00 0.50±0.01 2.00±0.05 8.00±0.19 16.02±0.39Ca 69.31±3.03 69.73±3.05 71.00±3.09 76.05±3.27 82.79±3.52 69.21±2.11 68.91±3.01 67.72±3.00 66.13±2.89Si 0.24±0.09 0.75±0.07 2.29±0.02 8.45±0.22 16.67±0.52 0.70±0.07 2.09±0.03 7.65±0.16 15.07±0.41P 26.06±1.69 25.96±1.68 25.67±1.66 24.50±1.58 22.94±1.47 25.98±1.69 25.75±1.67 24.85±1.60 23.64±1.51

15圖 2.1 BGC 和 Cu-BGC 離子浸提液對(duì)軟骨細(xì)胞增殖的影響。(A) CCK8 分析后用 BGC 和Cu-BGC 浸提液培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞的結(jié)晶紫染色。(B)用 BGC 和 Cu-BGC 浸提液培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞的增殖。* p <0.05，，n=6。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08

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本文編號(hào)：2630391