【摘要】：背景:研究發(fā)現(xiàn)載細(xì)胞的組織工程骨植入體內(nèi)后面臨嚴(yán)峻的"血管再生"難題;前期研究發(fā)現(xiàn)丹參素可改善血管內(nèi)皮祖細(xì)胞功能,發(fā)揮血管保護(hù)作用。目的:制備丹參素涂層β-磷酸三鈣支架材料,觀察其細(xì)胞相容性。方法:采用負(fù)壓吸附法構(gòu)建載藥劑量分別為10-7,10-6,10-5 mol的丹參素涂層β-磷酸三鈣支架材料,采用掃描電鏡觀察材料表面丹參素涂層分布,采用紅外光譜分析材料內(nèi)部成分。分別以β-磷酸三鈣支架材料浸提液與不同載藥量丹參素涂層β-磷酸三鈣支架材料浸提液培養(yǎng)人血管內(nèi)皮祖細(xì)胞,培養(yǎng)2,4,6,8,10 d,檢測(cè)細(xì)胞增殖;培養(yǎng)1,7,14 d,檢測(cè)細(xì)胞上清液中NO和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平;培養(yǎng)14 d,觀察細(xì)胞在血管基質(zhì)膠上的管腔形成。將人血管內(nèi)皮祖細(xì)胞接種于β-磷酸三鈣支架與不同載藥量丹參素涂層β-磷酸三鈣支架上,培養(yǎng)7 d,掃描電鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)。結(jié)果與結(jié)論:(1)丹參素涂層均勻一致地平鋪于材料孔隙內(nèi)表面,隨載藥劑量增加,丹參素涂層的結(jié)晶結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)出更加致密狀態(tài);(2)丹參素涂層β-磷酸三鈣支架中丹參素和磷酸三鈣的紅外光譜特征吸收峰位置均未發(fā)生變化;(3)丹參素涂層β-磷酸三鈣支架對(duì)人血管內(nèi)皮祖細(xì)胞具有促增殖作用,以10-6,10-5 mol丹參素涂層β-磷酸三鈣支架為有效;(4)與β-磷酸三鈣比較,10-6,10-5 mol丹參素涂層β-磷酸三鈣支架可在第14天顯著提高細(xì)胞上清液中NO水平(P0.05),在第7,14 d顯著提高細(xì)胞上清液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平(P0.05);(5)不同載藥量丹參素涂層β-磷酸三鈣支架組浸提液培養(yǎng)細(xì)胞均有形成管腔結(jié)構(gòu)趨勢(shì),以10-5 mol丹參素涂層β-磷酸三鈣支架組形成的管腔結(jié)構(gòu)最為成熟;(6)結(jié)果表明,丹參素涂層β-磷酸三鈣支架可促進(jìn)人血管內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖及向成熟內(nèi)皮細(xì)胞分化,具有良好的細(xì)胞相容性。

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