【摘要】：發(fā)展組織工程學(xué),對于組織工程支架材料的研究無疑是其關(guān)鍵部分。人體內(nèi),各種生物物理和生物化學(xué)刺激控制著組織和器官的生長發(fā)育過程,維持它們的生理結(jié)構(gòu)及其功能,利用這些促進(jìn)因素提高組織工程植入物的功能表達(dá),是組織工程研究的重要思路之一。細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)是由來自生物體組織特定的細(xì)胞進(jìn)行分泌,與細(xì)胞間存在一種可逆的動態(tài)平衡,對于細(xì)胞貼附,分化和細(xì)胞與生物材料之間的連接起到重要作用。通過脫細(xì)胞技術(shù)獲取的脫細(xì)胞外基質(zhì)(decellularized extracellular matrix,D-ECM)支架材料已被廣泛應(yīng)用,并因其具有良好的生物相容性、可降解性和誘導(dǎo)分化能力備受青睞。但是,不同組織來源的D-ECM支架,對細(xì)胞增殖和分化具有不同影響,尤其是對多能干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的影響規(guī)律,仍需進(jìn)行深入研究。為更好的保留種子細(xì)胞的生長能力和功能性,并獲得具有完整片層的細(xì)胞外基質(zhì)材料,組織工程研究中提供了一種無需消化處理,通過細(xì)胞層技術(shù)來獲取種子細(xì)胞的新思路。本論文選取了不同來源的成纖維細(xì)胞(L929)、成骨細(xì)胞(MC3T3)、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)三種細(xì)胞,分別通過體外培養(yǎng)構(gòu)建了細(xì)胞層,再通過物理(反復(fù)凍融循環(huán))和生物酶共同作用的方式對細(xì)胞層進(jìn)行脫細(xì)胞處理得到了三種D-ECM材料,采用體外培養(yǎng)和大鼠皮下埋植,對比研究了它們對BMSCs增殖和成骨分化行為的影響。在三種D-ECM上進(jìn)行BMSCs的增殖和成骨分化性能相關(guān)表征。結(jié)果顯示,所有D-ECM都利于BMSCs的貼附和鋪展,其中BMSCs來源的D-ECM促進(jìn)細(xì)胞增殖和成骨分化能力最強(qiáng),其次是成骨細(xì)胞D-ECM,最后是成纖維細(xì)胞D-ECM,分析原因認(rèn)為是BMSCs來源的D-ECM含有最為豐富的COL-I和GAG，，以及VEGF和BMP-2表達(dá)。最后,利用靜電紡絲獲得的聚乳酸/明膠纖維膜作為支撐孵育以上三種細(xì)胞層,經(jīng)脫細(xì)胞處理獲得D-ECM與靜電紡絲膜的復(fù)合結(jié)構(gòu),將它們植入小鼠背部,培養(yǎng)3個月表征發(fā)現(xiàn):靜電紡絲膜可以促進(jìn)細(xì)胞層的形成,并賦予D-ECM可操作性;與單純纖維膜組相比,負(fù)載了 D-ECM的纖維膜在生物體內(nèi)所引起的纖維囊結(jié)構(gòu)更薄,且并未引起較大的免疫排斥反應(yīng)及炎癥反應(yīng)現(xiàn)象,表現(xiàn)為良好的生物相容性。由此,D-ECM/纖維膜復(fù)合物有望作為一種新型的引導(dǎo)組織再生修材料,在牙周組織和骨組織再生修復(fù)領(lǐng)域具有更好的應(yīng)用前景。
【圖文】：

圖１＿１由組織（小腸粘膜上層）或者器官（腎臟，心臟肝等）制備的脫細(xì)胞外基質(zhì)示意圖逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ邋ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｄ－ＥＣＭ邋ｐｒｅｐａｒｅｄ邋ｂｙ邋ｔｉｓｓｕｅｓ邋（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ邋ｍｕｃｏｓａ）邋ｏｒ邋ｏｒｇａｎｓ逡逑ｋｉｄｎｅｈｅａｒｔｌｉｖｅｒｅｔｃ．＾逡逑

圖１－４對大鼠心臟灌注脫細(xì)胞處理圖示
【學(xué)位授予單位】：北京化工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R318

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 陳博;彭代智;;組織和器官脫細(xì)胞方法的研究進(jìn)展[J];中華損傷與修復(fù)雜志(電子版);2012年06期

2 張榮莉;姜爾烈;王玫;周征;翟文靜;翟衛(wèi)華;王華;王志永;包宇實(shí);杜宏;韓明哲;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2008年05期

3 張國安;寧方剛;鐘京鳴;于東寧;趙南明;;反復(fù)凍融配合超聲振蕩洗滌制備豬脫細(xì)胞真皮基質(zhì)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年41期

本文編號：2601650