【摘要】：目的： 研究納米銀的潛在毒性機(jī)制,探索納米銀的安全有效使用方法及最低有效濃度。將具有抗菌及抗炎作用的納米銀顆粒與組織工程真皮支架結(jié)合制備功能性真皮支架,評(píng)價(jià)并探討所構(gòu)建的支架對(duì)組織誘導(dǎo)及創(chuàng)面修復(fù)的作用及相關(guān)機(jī)制。 方法： 感染對(duì)皮膚移植物的成活具有重要影響。對(duì)于自體皮移植,皮片本身有血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),移植到創(chuàng)面部位通過(guò)血管的吻合,即可對(duì)植入物進(jìn)行免疫保護(hù),抵抗感染。雖然皮膚組織工程已經(jīng)有很多產(chǎn)品,而且有越來(lái)越多的組織工程皮膚被構(gòu)建,但感染仍是組織工程皮膚替代物移植存活與否的關(guān)鍵問(wèn)題之一。目前,已經(jīng)有較多促進(jìn)移植物本身的抗感染作用的方法,包括支架的改性、添加抗感染的成分或藥物(藻酸鹽,銀離子)等。但目前尚無(wú)有效的方法及途徑改善組織工程產(chǎn)品移植后感染的問(wèn)題。 納米銀(NAg)作為一種新型的人工抗菌材料,具有粒徑微小,表面積大,活性大、熔點(diǎn)低的特點(diǎn),其抗菌活性遠(yuǎn)大于傳統(tǒng)的銀離子抑菌劑。NAg目前已經(jīng)廣泛運(yùn)用于臨床及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面,且取得了較為肯定的抗菌效果。NAg可以加速燒傷創(chuàng)面的愈合,縮短住院時(shí)間,減少醫(yī)療費(fèi)用,在耐藥性、安全性、過(guò)敏性及促進(jìn)創(chuàng)面愈合方面等方面確實(shí)優(yōu)于磺胺嘧啶銀霜及凡士林油紗布。隨著大面積燒傷及難愈性創(chuàng)面治療研究的逐步推進(jìn),組織工程皮膚的研發(fā)成為研究的熱點(diǎn),但這些產(chǎn)品往往缺乏抗菌性能,難以抵抗病原微生物的侵害。在生物材料中添加NAg顆�？梢悦黠@抑制致病菌的生長(zhǎng),在一定程度上解決了這一問(wèn)題。組織工程支架作為天然ECM的仿生替代物其結(jié)構(gòu)越接近生理狀態(tài),越有利于修復(fù)細(xì)胞生物學(xué)行為的恢復(fù)。膠原/殼聚糖多孔支架具有合適的孔徑、良好的生物相容性和較低的抗原性,是構(gòu)建組織工程真皮替代物的較理想材料,然而其本身不具備抗感染等生物活性,在體內(nèi)外復(fù)雜環(huán)境中極易被創(chuàng)面污染或者微生物等感染,從而使組織、細(xì)胞及血管的長(zhǎng)入受到限制,移植失敗。 因此我們?cè)O(shè)想通過(guò)納米銀與膠原殼聚糖支架復(fù)合,預(yù)防和抵抗創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中的感染和炎癥,以促進(jìn)局部組織更好的血管化。結(jié)合臨床實(shí)際和我們的研究基礎(chǔ),我們將納米銀與膠原-殼聚糖支架以不同的形式復(fù)合以觀(guān)察體內(nèi)和體外抗感染和炎癥的作用。如能取得預(yù)期效果,則不僅拓展了納米銀的臨床應(yīng)用范圍,還可進(jìn)一步闡明納米銀促進(jìn)傷口愈合的機(jī)制,為有效使用組織工程產(chǎn)品提供一種新的促進(jìn)手段。體外研究納米銀對(duì)皮膚細(xì)胞的毒性作用,及對(duì)常見(jiàn)細(xì)菌的抗菌作用,探索最低有效抗菌濃度,探索安全有效使用納米銀的方法。研究納米銀對(duì)巨噬細(xì)胞活化的影響及機(jī)制。并將該功能性支架運(yùn)用于大鼠及豬的創(chuàng)面,研究含納米銀的真皮支架促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)的作用,在體內(nèi)進(jìn)一步驗(yàn)證納米銀對(duì)巨噬細(xì)胞活化作用的影響及在創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中的作用。結(jié)論： (1)納米銀具有一定的細(xì)胞毒性,但在10PPM以下的濃度無(wú)明顯毒性改變,且該濃度具有明顯抗菌作用。(2)納米銀對(duì)巨噬細(xì)胞的活化有明顯的影響作用,可以改變M1/M2型的細(xì)胞比例,促進(jìn)可替代巨噬細(xì)胞的活化,降低經(jīng)典巨噬細(xì)胞的異�；罨�。(3)該功能性支架可以明顯的減少創(chuàng)面感染,控制炎癥,能夠有效的加速創(chuàng)面修復(fù)。
【圖文】：

如圖1-1所示，A為納米銀溶液的圖片，10000PPM的納米銀呈深揭，，隨著濃度的稀釋?zhuān)伾饾u變淺；B為該網(wǎng)的掃描電鏡照片，納米銀呈圓形，視野中均勻分散，粒徑分布相對(duì)均勻，粒後在10-15nm。

XTT法檢測(cè)納米銀共培養(yǎng)人Fb增殖實(shí)驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08

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本文編號(hào)：2580795