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血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165轉(zhuǎn)染臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)在血管形成中的作用

發(fā)布時(shí)間:2020-01-31 16:10
【摘要】:背景:組織工程骨早期血管化是目前亟待解決的難題,細(xì)胞共培養(yǎng)以及添加生物活性因子來(lái)促進(jìn)血管生成均是很好地促進(jìn)早期血管化的方法。目的:探討人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)過(guò)表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(vascular endothelial growth factor,VEGF165)后與小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)在血管形成中的作用。方法:腺病毒介導(dǎo)VEGF165轉(zhuǎn)染HUVECs,并分離培養(yǎng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行共培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分組如下:(1)轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組:Ad VEGF165-HUVECs+骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;(2)轉(zhuǎn)染非共培養(yǎng)組:Ad VEGF165-HUVECs;(3)空載體共培養(yǎng)組:Ad GFP-HUVECs+骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;(4)空載體組:Ad GFP-HUVECs;(5)未轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組:HUVECs+骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;(6)空白對(duì)照組:HUVECs。采用CCK8法檢測(cè)HUVECs的增殖能力,結(jié)晶紫染色檢測(cè)HUVECs的遷移能力,Matrigel法檢測(cè)HUVECs的血管形成能力。結(jié)果與結(jié)論:(1)與空白對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組、轉(zhuǎn)染非共培養(yǎng)組、空載體共培養(yǎng)組、未轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組的細(xì)胞增殖能力均明顯增加(P0.05);(2)與空白對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量最多(P0.05);(3)與空白對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組形成的小管數(shù)目更多形成時(shí)間更早,更穩(wěn)定(P0.05);(4)結(jié)果表明,VEGF165轉(zhuǎn)染HUVECs和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共同作為種子細(xì)胞能更好地促進(jìn)早期血管生成。
【圖文】:

曲線,腺病毒,轉(zhuǎn)染


括計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)庫(kù))記錄及樣本已按照有關(guān)規(guī)定保存、分享和銷毀,可接受核查。文章版權(quán):文章出版前雜志已與全體作者授權(quán)人簽署了版權(quán)相關(guān)協(xié)議。開放獲取聲明:這是一篇開放獲取文章,文章出版前雜志已與全體作者授權(quán)人簽署了版權(quán)相關(guān)協(xié)議。根據(jù)《知識(shí)共享許可協(xié)議》“署名-非商業(yè)性使用-相同方式共享3.0”條款,在合理引用的情況下,允許他人以非商業(yè)性目的基于原文內(nèi)容編輯、調(diào)整和擴(kuò)展,同時(shí)允許任何用戶閱讀、下載、拷貝、傳遞、打英檢索、超級(jí)鏈接該文獻(xiàn),并為之建立索引,用作軟件的輸入數(shù)據(jù)或其它任何合法用途。圖1腺病毒轉(zhuǎn)染結(jié)果(×100)Figure1Humanumbilicalveinendothelialcellstransfectedwithvascularendothelialgrowthfactor165gene(×100)圖注:圖中A,C為普通光鏡下細(xì)胞形態(tài);B,D為熒光顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)。Ad-GFP為空載體組,Ad-VEGF為VEGF過(guò)表達(dá)組,熒光檢測(cè)結(jié)果顯示兩組大部分細(xì)胞顯示綠色熒光。Ad-GFPAd-VEGF圖2HUVECs、Ad-GFP-HUVECs和Ad-VEGF-HUVECs的增殖曲線Figure2ThecellgrowthcurvesofHUVECs,Ad-GFP-HUVECsandAd-VEGF-HUVECs圖注:3組之間差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。VEGF:血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子;HUVECs:人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。胞數(shù)量細(xì)×10(5)圖3小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)(×100)Figure3Themorphologyofmousebonemarrowmesenchymalstemcells(×100)圖注:圖中A為原代培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,大部分細(xì)胞貼壁,呈多邊形、梭形;B為傳代培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,細(xì)胞多呈梭形。光度值吸圖4人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞/骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)后人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力變化Figure4Theproliferationabilityofhumanumbilicalveinendothelialcellsafterco-culturewithbonemarrowmesenchymalstemcells圖注:轉(zhuǎn)染?

曲線,曲線,共培養(yǎng),轉(zhuǎn)染


硪,

本文編號(hào):2575085

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