【摘要】：背景:組織工程骨早期血管化是目前亟待解決的難題,細胞共培養(yǎng)以及添加生物活性因子來促進血管生成均是很好地促進早期血管化的方法。目的:探討人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)過表達血管內(nèi)皮生長因子165(vascular endothelial growth factor,VEGF165)后與小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)在血管形成中的作用。方法:腺病毒介導VEGF165轉(zhuǎn)染HUVECs,并分離培養(yǎng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,進行共培養(yǎng)。實驗分組如下:(1)轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組:Ad VEGF165-HUVECs+骨髓間充質(zhì)干細胞;(2)轉(zhuǎn)染非共培養(yǎng)組:Ad VEGF165-HUVECs;(3)空載體共培養(yǎng)組:Ad GFP-HUVECs+骨髓間充質(zhì)干細胞;(4)空載體組:Ad GFP-HUVECs;(5)未轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組:HUVECs+骨髓間充質(zhì)干細胞;(6)空白對照組:HUVECs。采用CCK8法檢測HUVECs的增殖能力,結(jié)晶紫染色檢測HUVECs的遷移能力,Matrigel法檢測HUVECs的血管形成能力。結(jié)果與結(jié)論:(1)與空白對照組相比,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組、轉(zhuǎn)染非共培養(yǎng)組、空載體共培養(yǎng)組、未轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組的細胞增殖能力均明顯增加(P0.05);(2)與空白對照組相比,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組人臍靜脈內(nèi)皮細胞數(shù)量最多(P0.05);(3)與空白對照組相比,轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組形成的小管數(shù)目更多形成時間更早,更穩(wěn)定(P0.05);(4)結(jié)果表明,VEGF165轉(zhuǎn)染HUVECs和骨髓間充質(zhì)干細胞共同作為種子細胞能更好地促進早期血管生成。
【圖文】：

括計算機數(shù)據(jù)庫)記錄及樣本已按照有關(guān)規(guī)定保存、分享和銷毀，可接受核查。文章版權(quán)：文章出版前雜志已與全體作者授權(quán)人簽署了版權(quán)相關(guān)協(xié)議。開放獲取聲明：這是一篇開放獲取文章，文章出版前雜志已與全體作者授權(quán)人簽署了版權(quán)相關(guān)協(xié)議。根據(jù)《知識共享許可協(xié)議》“署名-非商業(yè)性使用-相同方式共享3.0”條款，在合理引用的情況下，允許他人以非商業(yè)性目的基于原文內(nèi)容編輯、調(diào)整和擴展，同時允許任何用戶閱讀、下載、拷貝、傳遞、打英檢索、超級鏈接該文獻，并為之建立索引，用作軟件的輸入數(shù)據(jù)或其它任何合法用途。圖1腺病毒轉(zhuǎn)染結(jié)果(×100)Figure1Humanumbilicalveinendothelialcellstransfectedwithvascularendothelialgrowthfactor165gene(×100)圖注：圖中A，C為普通光鏡下細胞形態(tài)；B，D為熒光顯微鏡下細胞形態(tài)。Ad-GFP為空載體組，Ad-VEGF為VEGF過表達組，熒光檢測結(jié)果顯示兩組大部分細胞顯示綠色熒光。Ad-GFPAd-VEGF圖2HUVECs、Ad-GFP-HUVECs和Ad-VEGF-HUVECs的增殖曲線Figure2ThecellgrowthcurvesofHUVECs,Ad-GFP-HUVECsandAd-VEGF-HUVECs圖注：3組之間差異無顯著性意義(P>0.05)。VEGF：血管內(nèi)皮生長因子；HUVECs：人臍靜脈內(nèi)皮細胞。胞數(shù)量細×10(5)圖3小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的形態(tài)(×100)Figure3Themorphologyofmousebonemarrowmesenchymalstemcells(×100)圖注：圖中A為原代培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞，大部分細胞貼壁，呈多邊形、梭形；B為傳代培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞，細胞多呈梭形。光度值吸圖4人臍靜脈內(nèi)皮細胞/骨髓間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)后人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖能力變化Figure4Theproliferationabilityofhumanumbilicalveinendothelialcellsafterco-culturewithbonemarrowmesenchymalstemcells圖注：轉(zhuǎn)染?

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本文編號：2575085