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銀杏LCC制備多孔生物載體及在人體肝細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

發(fā)布時間:2019-11-25 12:18
【摘要】:以銀杏木質(zhì)素-碳水化合物復(fù)合體(LCC)為原料,通過洗脫支架的方法制備醫(yī)用多孔生物載體,并利用紅外光譜、液相色譜、核磁共振波譜及掃描電子顯微鏡對該生物載體的主要成分含量、化學(xué)結(jié)構(gòu)以及表面形態(tài)進(jìn)行分析。結(jié)果表明:以銀杏LCC為原料可以制備性能優(yōu)良的生物載體。該載體不僅含有愈創(chuàng)木基型苯丙烷結(jié)構(gòu)單元,而且糖組分中對人體肝細(xì)胞有較高生物相容性的半乳糖和甘露糖分別占3.30%和21.94%。制備的多孔生物載體孔隙率可達(dá)60%以上,平均孔徑約為130μm。用多孔生物載體進(jìn)行人體肝細(xì)胞培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)人體肝細(xì)胞能夠成功地在銀杏LCC多孔生物載體上生長,且細(xì)胞增殖較快,白蛋白分泌和葡萄糖代謝活性的測定結(jié)果表明肝細(xì)胞具有較高的代謝活性。研究結(jié)果表明銀杏LCC多孔生物載體具有良好的生物相容性。
【圖文】:

曲線,生物載體,生長情況,細(xì)胞


86林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)第34卷圖4人體肝細(xì)胞L-02在多孔生物載體上黏附生長情況Fig.4GrowthsituationofhumanhepatocytesL-02adhesiononthebiologicalcarrier學(xué)觀察。圖4為細(xì)胞第4天在多孔生物載體上的生長情況。從圖中可以可看出多孔生物載體表面黏附有許多肝細(xì)胞(如圖中箭頭所示),表明肝細(xì)胞能夠在銀杏LCC多孔生物載體上生長,,證明銀杏LCC具有良好的生物相容性。同時也證實了該載體所含的半乳糖和甘露糖對人體肝細(xì)胞有良好的親和性。說明該多孔生物載體可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞組織工程中。2.2.2人體肝細(xì)胞增殖在人體肝細(xì)胞L-02培養(yǎng)第1~5天,用血細(xì)胞計數(shù)板在倒置生物相差顯微鏡下對實驗組和對照組細(xì)胞分別進(jìn)行計數(shù),計數(shù)結(jié)果如圖5(a)所示。從圖中可以看出,實驗組和對照組培養(yǎng)的細(xì)胞在前4天均呈現(xiàn)增長趨勢,細(xì)胞在前2天都增長較慢,在第3-4天細(xì)胞增幅最快,細(xì)胞數(shù)量達(dá)到最高值,并且實驗組的人體肝細(xì)胞增殖速度明顯高于空白對照組人體肝細(xì)胞的增殖速度。2.2.3人體肝細(xì)胞的代謝活性白蛋白分泌和葡萄糖代謝是肝細(xì)胞代謝功能的兩個重要指標(biāo),加入多孔生物載體培養(yǎng)的肝細(xì)胞的白蛋白分泌和葡萄糖代謝活性如圖5(b)和圖5(c)所示。圖5肝細(xì)胞生長曲線和代謝活性Fig.5Hepatocytesgrowthcurveandmetabolicactivity由圖5中可見,在培養(yǎng)過程中,加入多孔生物載體培養(yǎng)的人肝細(xì)胞的白蛋白分泌活性比空白對照組高,在培養(yǎng)的第4天達(dá)到最高值,最高為10.45g/(d·L),而空白對照組最高值為6.89g/(d·L),說明加入多孔生物載體培養(yǎng)的人體肝細(xì)胞具有較高的代謝活性。與空白試驗相比,加入多孔生物載體培養(yǎng)的人體肝細(xì)胞的葡萄糖代謝活性較高,進(jìn)一步說明用銀杏LCC制備的多孔生物載體有利于人體肝細(xì)胞的培養(yǎng)并維持較高的代謝活性。3結(jié)論3.1以銀杏木質(zhì)素

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2565709

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