發(fā)布時(shí)間：2019-07-22 16:39

【摘要】：為提高重組畢赤酵母Pichia pastoris發(fā)酵重組人Ⅲ型膠原蛋白產(chǎn)量,采用響應(yīng)面對(duì)其生長(zhǎng)階段的BMGY培養(yǎng)基(Buffered minimal glycerol-complex medium)組成進(jìn)行優(yōu)化。通過(guò)Placket-Burman試驗(yàn),得出酵母提取物、蛋白胨、甘油對(duì)膠原蛋白產(chǎn)量有顯著影響,通過(guò)Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)以及Design-Expert分析軟件建立了以膠原蛋白產(chǎn)量為響應(yīng)值的響應(yīng)方程,得到最適濃度分別為酵母提取物1.13%,蛋白胨1.61%,甘油0.86%。經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,在最優(yōu)BMGY培養(yǎng)基條件下培養(yǎng)12 h后,所得到畢赤酵母干重為4.41 g/L,生長(zhǎng)階段的菌重量增加了26%。在22 L發(fā)酵罐中通過(guò)高密度發(fā)酵,產(chǎn)量達(dá)到4.71 g/L。該重組膠原蛋白對(duì)大鼠乙酸灼傷胃粘膜有明顯修復(fù)作用,為生物醫(yī)用材料的應(yīng)用制備奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to increase the yield of recombinant human type III collagen fermented by recombinant Pichia pastoris, the composition of BMGY medium (Buffered minimal glycerol-complex medium in response to the growth stage was optimized. Through Placket-Burman test, it was concluded that yeast extract, peptone and glycerol had significant effects on collagen production. The response equation with collagen yield as response value was established by Box-Behnken central combination experiment and Design-Expert analysis software. The optimum concentrations were 1.13%, 1.61% and 0.86%, respectively. The results showed that the dry weight of Pichia pastoris was 4.41 g 路L ~ (- 1) and the weight of Pichia pastoris increased by 26% after 12 h culture in the optimal BMGY medium. Through high density fermentation in 22 L fermentor, the yield reached 4.71 g 路L ~ (- 1) 路L ~ (- 1). The recombinant collagen can repair the gastric mucosa of rats with acetic acid burn, which lays a foundation for the preparation of biomedical materials.
【作者單位】： 西北大學(xué)化工學(xué)院陜西省可降解生物醫(yī)用材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;西北大學(xué)化工學(xué)院陜西省生物材料與發(fā)酵工程技術(shù)研究中心;
【基金】：陜西省教育廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室科研計(jì)劃項(xiàng)目(No.16JS104) 博士后科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No.2015M582698) 西北大學(xué)科研啟動(dòng)金(No.338050025)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：TQ931;R318.08

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