【摘要】：背景:實(shí)驗(yàn)一:利用第8天至第12天雞胚尿囊膜(Chicken embryo allantoic membrane,CAM)血管的快速生長期,可研究羥基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)對CAM血管生長的影響情況。實(shí)驗(yàn)二:將外源性直流電場(Direct Current Electric Field,DCEF)加入雞胚尿囊膜載羥基磷灰石模型后,觀察CAM血管化變化,可觀察DCEF對區(qū)域血管生長的影響。目的:實(shí)驗(yàn)一:HA加載于雞胚CAM模型,建立研究血管化的模型。實(shí)驗(yàn)二:于建立好的雞胚尿囊膜載羥基磷灰石模型上,加載穩(wěn)恒DCEF,觀察其對CAM血管化的影響,探討穩(wěn)恒DCEF在促進(jìn)組織工程骨的快速預(yù)血管化及成骨方面可能具有的重大作用。方法:實(shí)驗(yàn)一:將12枚羅曼品系雞蛋于相同適宜條件下孵化至第8天,開窗后隨機(jī)分為2組,實(shí)驗(yàn)組植入羥基磷灰石材料,建立雞胚尿囊膜載羥基磷灰石模型;對照組放入濾紙材料,密封后移入恒溫恒濕箱內(nèi)繼續(xù)孵化。待孵化至第12天后,通過CSW-X視頻顯微鏡采集圖像,Image J收集CAM血管長度及單位面積血管長度數(shù)據(jù)資料,以及切片觀察羥基磷灰石及濾紙材料上的血管新生狀況。實(shí)驗(yàn)二:將12枚孵化至第8天的羅曼品系雞蛋開窗后,植入羥基磷灰石材料,建立雞胚尿囊膜載羥基磷灰石模型后,于羥基磷灰石表面滴加融化瓊脂覆蓋,隨機(jī)均分為2組;密封后移入恒溫恒濕箱內(nèi),使用銀針插入瓊脂內(nèi)導(dǎo)電,實(shí)驗(yàn)組加載-1.5v外源性穩(wěn)恒dcef后繼續(xù)孵化,對照組不加載dcef繼續(xù)孵化。待加電24、48小時(shí)后,通過csw-x視頻顯微鏡采集圖像,imagej和angiotool軟件收集血管長度及血管生長方向數(shù)據(jù)資料,以及切片觀察羥基磷灰石材料內(nèi)血管新生狀況。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:(1)待孵化至12天后,實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本平均cam血管新生成長度為24.031±2.735mm,平均單位面積血管新生成長度為0.242±0.046mm/mm2;對照組標(biāo)本平均cam血管新生成長度為23.561±1.661mm,平均單位面積血管新生成長度為0.212±0.052mm/mm2,組間血管新生成長度及平均cam血管新生成長度比較差異無顯著性意義(p0.05);(2)實(shí)驗(yàn)組羥基磷灰石材料切片標(biāo)本有明顯類血管組織生成。實(shí)驗(yàn)二:(1)加電孵化24小時(shí)后,實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本平均cam血管生成長度為11.93±0.89mm,對照組標(biāo)本平均cam血管生成長度為8.69±0.71mm。待孵化48小時(shí)后,實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本平均cam血管生成長度為12.66±0.65mm,對照組標(biāo)本平均cam血管生成長度為9.65±0.57mm,差值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);(2)加電孵化48小時(shí)后,實(shí)驗(yàn)組平均血管角度87.16°±54.76°變?yōu)?3.36°±21.63°,血管向心性生長趨勢明顯。對照組平均血管角度81.07°±47.23°變?yōu)?3.17°±51.64°,血管生成方向無明顯改變。(3)加電孵化48小時(shí)后,實(shí)驗(yàn)組血管生成速率為0.101mm/h,對照組血管生成速率為0.047mm/h。結(jié)論:實(shí)驗(yàn)一:結(jié)果表明,雞胚尿囊膜載羥基磷灰石模型可以作為研究理想植骨材料及影響血管生成藥物的體外動(dòng)物模型,且外載HA對CAM上血管生成無影響。實(shí)驗(yàn)二:結(jié)果表明,加載外源性穩(wěn)恒DCEF能夠促進(jìn)雞胚尿囊膜載羥基磷灰石模型血管向電場負(fù)極生長。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2447093