【摘要】：[目的]利用兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與豬小腸粘膜下層復(fù)合構(gòu)建組織工程骨膜,體外觀察其生物學(xué)特性并檢測成骨活性,為將來體內(nèi)移植提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法]以豬小腸粘膜下層基質(zhì)作為支架材料,與新西蘭大白兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)或體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后的BMSCs,采用沉淀法復(fù)合構(gòu)建兩種組織工程化骨膜(M2及M1),用MTT法檢測種子細(xì)胞在支架材料上的生長情況;掃描電鏡(SEM)觀察種子細(xì)胞在支架材料上的生長、粘附狀態(tài);通過ELISA檢測堿性磷酸酶活性和骨鈣素分泌水平。[結(jié)果]種子細(xì)胞在SIS上生長良好,M2及M1在含有成骨誘導(dǎo)劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可分泌一定量骨鈣素(11 d達(dá)峰值),并表達(dá)堿性磷酸酶活性(7 d達(dá)峰值)。而且,Ml所分泌骨鈣素的量與堿性磷酸酶活性高于M2,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]利用兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與豬小腸粘膜下層復(fù)合構(gòu)建組織工程化骨膜能夠保持較穩(wěn)定的生物活性,種子細(xì)胞能良好地在支架上附著、生長增殖,并穩(wěn)定地分泌一定量的骨鈣素和堿性磷酸酶,在體外表達(dá)較強(qiáng)的成骨活性。
[Abstract]:[objective] to construct tissue engineered periosteum with rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and porcine intestinal submucosa, observe its biological characteristics and determine its osteogenic activity in vitro, and provide experimental evidence for future in vivo transplantation. [methods] two kinds of tissue-engineered periosteum (M2 and M1) were constructed with porcine small intestinal submucosal matrix as scaffold, combined with bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) of New Zealand white rabbits or BMSCs, induced by osteogenesis in vitro, and two kinds of tissue engineered periosteum (M2 and M1) were constructed by precipitation method. The growth of seed cells on scaffold material was detected by MTT method. The growth and adhesion of seed cells on scaffold materials were observed by scanning electron microscope (SEM), alkaline phosphatase activity and osteocalcin secretion were detected by ELISA. [results] the seed cells grew well on SIS. M2 and M1 could secrete a certain amount of osteocalcin (up to the peak at 11 days) and express alkaline phosphatase activity (up to the peak at 7 days) in the medium containing osteogenic inducer. Moreover, the amount of osteocalcin secreted by Ml and alkaline phosphatase activity was higher than that of M _ 2, the difference was statistically significant (P0.05). [conclusion] using rabbit bone marrow mesenchymal stem cells combined with porcine small intestinal submucosa to construct tissue engineered periosteum can maintain stable biological activity, and seed cells can adhere to scaffold and grow and proliferate well. And stable secretion of osteocalcin and alkaline phosphatase in vitro expression of strong osteogenic activity.
【作者單位】： 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院骨科甘肅省骨與關(guān)節(jié)疾病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;甘肅省中醫(yī)院放射科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:30973064) 國家留學(xué)回國人員優(yōu)選資助課題(甘人社通【2010】343號)
【分類號】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2427999