【摘要】：[目的]通過(guò)研究大耳白兔外周血來(lái)源的血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(BP-EPCs)對(duì)骨髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)體外增殖和分化能力的影響,篩選更有潛力兩種細(xì)胞共培養(yǎng)系統(tǒng)從而為構(gòu)建組織工程骨的基礎(chǔ)研究和臨床治療提供更多的資料支持。[方法]通過(guò)密度梯度離心法結(jié)合貼壁法分離純化兔EPCs和BMSCs,實(shí)驗(yàn)分兩組:PB-EPCs和BMSCs間接共培養(yǎng)組中BMSCs為實(shí)驗(yàn)組,單獨(dú)BMSCs組為對(duì)照組。觀察兩組細(xì)胞形態(tài)。對(duì)兩組第三代細(xì)胞進(jìn)行成骨和成脂誘導(dǎo)并評(píng)估兩組BMSCs分化能力。[結(jié)果]兩組細(xì)胞體外培養(yǎng)形態(tài)規(guī)則,增殖能力強(qiáng),生長(zhǎng)曲線呈S型。其中兔EPCs和BMSCs間接共培養(yǎng)組較BMSCs單獨(dú)培養(yǎng)組細(xì)胞增長(zhǎng)速度更快,兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)成骨誘導(dǎo)后,間接共培養(yǎng)組BMSCs出現(xiàn)鈣結(jié)節(jié)時(shí)間早且茜素紅染色較深,堿性磷酸酶和骨鈣素分泌量較單獨(dú)BMSCs組顯著增高,兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)成脂誘導(dǎo)后,間接共培養(yǎng)組油紅O染色較深,兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]兔EPCs和BMSCs間接共培養(yǎng)組細(xì)胞在增殖速度和分化能力方面均優(yōu)于BMSCs單獨(dú)培養(yǎng)組,提示將BP-EPCs和BMSCs共培養(yǎng)系統(tǒng)作為種子細(xì)胞構(gòu)建組織工程骨有更大的使用潛能。
[Abstract]:[objective] to study the effect of vascular endothelial progenitor cells (BP-EPCs) from peripheral blood of white rabbits on the proliferation and differentiation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) in vitro. Screening of two cell coculture systems has more potential to provide more data for the basic research and clinical treatment of tissue engineering bone. [methods] EPCs and BMSCs, were isolated and purified by density gradient centrifugation combined with adherent method. The two groups were divided into two groups: in the PB-EPCs and BMSCs coculture group, BMSCs was used as the experimental group and the BMSCs group as the control group. Cell morphology was observed in both groups. The third generation cells were induced by osteogenesis and adipogenesis and the differentiation ability of BMSCs was evaluated. [results] the cells of the two groups were cultured in vitro with regular morphology, strong proliferative ability and S-shaped growth curve. The rate of cell growth in EPCs and BMSCs indirect co-culture group was faster than that in BMSCs alone group, and the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). After osteogenesis induction, BMSCs in indirect co-culture group appeared calcium nodule earlier and alizarin red staining was deeper, alkaline phosphatase and osteocalcin secretion were significantly higher than those in BMSCs group, the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). After fat-forming induction, indirect co-culture group oil red O staining was deeper, the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). [conclusion] the proliferation rate and differentiation ability of rabbit EPCs and BMSCs indirect co-culture group were better than that of BMSCs alone group, suggesting that BP-EPCs and BMSCs co-culture system could be used as seed cells to construct tissue engineered bone.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形外科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81460298):《功能性微血管化自體生物骨動(dòng)態(tài)追蹤及基因篩選》
【分類號(hào)】：R687;R318.08

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本文編號(hào)：2425886