【摘要】：在日常生活中,皮膚創(chuàng)傷難以避免,輕微的傷口如果不加處理很容易引起細(xì)菌感染。輕者會(huì)出現(xiàn)紅腫,嚴(yán)重的傷口感染會(huì)出化膿,甚至?xí){到患者的生命。在傷口感染中,細(xì)菌是罪魁禍?zhǔn)住Ｊ芗?xì)菌感染的傷口會(huì)出現(xiàn)大量的滲出液,細(xì)胞外基質(zhì)蛋白被分解及多種生長(zhǎng)因子受到抑制,表皮再生被阻礙,從而影響康復(fù)的進(jìn)程。一種具有良好抑菌效果的創(chuàng)傷敷料可以有效抵御細(xì)菌感染,促進(jìn)傷口愈合,對(duì)于減少患者痛苦,增進(jìn)人民身體健康具有十分重要的意義。本項(xiàng)研究結(jié)合天然繭層中絲蛋白的優(yōu)良性能,利用蠶繭的天然結(jié)構(gòu),通過(guò)探討蠶繭繭層的在CaCl_2-C_2H_5OH-H_2O三元溶液中進(jìn)行部分溶解處理的工藝條件,使其具備多孔性、高延展性能,并利用絲膠蛋白的還原性,原位負(fù)載納米銀,賦予其良好抗菌性能。同時(shí)對(duì)這種抗菌敷料的理化性能、抗菌性能、細(xì)胞毒性以及傷口愈合能力進(jìn)行系統(tǒng)的評(píng)估,得到研究結(jié)果如下:(1)利用木瓜蛋白酶來(lái)對(duì)繭層進(jìn)行部分脫膠,并對(duì)脫膠時(shí)間進(jìn)行單因素控制,得到不同脫膠程度的繭層材料。對(duì)處理后繭層材料的脫膠率計(jì)算、掃描電鏡觀察以及力學(xué)性能測(cè)試我們發(fā)現(xiàn),絲膠對(duì)于繭層的結(jié)構(gòu)影響很大,絲膠含量越低,繭層的結(jié)構(gòu)越松散,彈性和強(qiáng)力也隨之降低,透氣性能隨之升高。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,繭層處理30min后的繭層具有疏松的空隙,有利于細(xì)胞的增殖,但是質(zhì)地較硬,不適合用作創(chuàng)傷敷料。(2)采用摩爾比為1:2:8的CaCl_2-C_2H_5OH-H_2O三元溶液來(lái)處理未脫膠的繭層,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)探討了不同處理?xiàng)l件對(duì)繭層結(jié)構(gòu)、形態(tài)、透明度和力學(xué)性能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn):在CaCl_2-C_2H_5OH-H_2O三元溶液中,溫度越高,繭層的溶解速度越快,在40、50℃下處理的繭層,繭層幾乎不溶解,繭層的結(jié)構(gòu)基本不發(fā)生變化;當(dāng)溫度上升到60℃時(shí),繭層開(kāi)始緩慢溶解,形態(tài)開(kāi)始變得透明且柔軟;當(dāng)溫度升到70℃時(shí),繭層會(huì)快速溶解,并收縮成一團(tuán)。在以60℃為處理溫度時(shí),隨著處理時(shí)間延長(zhǎng),繭層變得越透明,延展性變得越好,當(dāng)處理時(shí)間為120min時(shí),繭層薄膜的透明度達(dá)到85%,最大斷裂強(qiáng)度為2MPa,最大應(yīng)變可達(dá)到150%。經(jīng)掃描電鏡觀察,具有較為均勻的孔隙結(jié)構(gòu),孔徑約為36μm,總體質(zhì)地柔軟,十分適合作為傷口敷料,因此用摩爾比為1:2:8的CaCl_2-C_2H_5OH-H_2O三元溶液進(jìn)行蠶繭繭層前處理的最佳工藝為:蠶繭繭層處理溫度為60±2℃,處理時(shí)間為120min,完成后經(jīng)大量清水沖洗,即可得到透明狀的蠶繭繭層薄膜(Silkworm cocoon wound film,簡(jiǎn)稱SCWF)。(3)在蠶繭繭層多孔薄膜原位負(fù)載納米銀實(shí)驗(yàn)中,利用單因素和L9(34)正交實(shí)驗(yàn)研究硝酸銀的濃度、處理溫度和處理時(shí)間等三個(gè)因素對(duì)SCWF原位還原納米銀粒徑的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)納米銀粒徑影響的程度分別是:處理溫度硝酸銀濃度處理時(shí)間。制備SCWF-Ag NPs的最佳工藝條件是:硝酸銀濃度在150m M、處理溫度在20℃、處理時(shí)間為3h。研究還發(fā)現(xiàn):納米銀對(duì)SCWF結(jié)構(gòu)和理化性能均有影響,隨著納米銀含量的越高,SCWF材料的孔徑變得越大,透氣性和吸水性能明顯提升,同時(shí)延展性能也得到提升,但斷裂強(qiáng)力會(huì)下降,與Mepitel?對(duì)比發(fā)現(xiàn),SCWF-Ag NP的吸收性能和透氣性能都高于Mepitel?。(4)納米銀的抗菌性與其粒徑和濃度有密切關(guān)系,通過(guò)對(duì)SC、SCWF、SCWFAg NP的抗菌性能進(jìn)行比較,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明SCWF-Ag NPs敷料對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌都具有良好的抗菌效果。不同Ag NPs含量的SCWF-Ag NP150和SCWFAg NP200敷料的抗菌性能呈現(xiàn)差異性,Ag NPs含量高的SCWF-Ag NP200敷料其抗菌性不如SCWF-Ag NPs150的好,原因是SCWF-Ag NP200中還原得到的納米銀粒徑較大,且粒徑分布不均,所以抗菌性能反而下降。經(jīng)MTT法和細(xì)胞熒光染色評(píng)測(cè)SCWF-Ag NP150和SCWF-Ag NP200的細(xì)胞毒性,結(jié)果表明納米銀含量較高的SCWFAg NP200敷料的具有明顯的細(xì)胞毒性,不適用用作創(chuàng)傷敷料,而SCWF-Ag NP150無(wú)明顯的細(xì)胞毒性,適宜用作創(chuàng)傷敷料。(5)在新西蘭大白兔背構(gòu)建真皮層缺損的活體創(chuàng)傷模型中,對(duì)無(wú)明顯細(xì)胞毒性且抗菌性最佳的SCWF-Ag NP150促進(jìn)傷口愈合性能進(jìn)行研究,并以臨床得到認(rèn)可的Mepitel?作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,SCWF-Ag NP150能有效的防止創(chuàng)面細(xì)菌感染,同時(shí)能抑制巨噬細(xì)胞的增殖,促進(jìn)創(chuàng)面的愈合,對(duì)創(chuàng)面促進(jìn)愈合效果明顯要好于Mepitel?。結(jié)果說(shuō)明含納米銀的SCWF-Ag NP150繭層薄膜敷料具有抗菌抑制炎癥等多重效應(yīng),并且無(wú)明顯的細(xì)胞毒性,對(duì)于全層皮缺損傷口具有明顯促進(jìn)愈合作用,可以作為促進(jìn)真皮再生的皮膚替代物,具有十分良好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：TB383.1;R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2375459