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羥丁基幾丁糖膜修補(bǔ)硬腦膜缺損的實驗研究

發(fā)布時間:2018-11-22 10:27
【摘要】:第一部分:羥丁基幾丁糖膜的制備、結(jié)構(gòu)及性能的研究目的:羥丁基幾丁糖膜的制備、表征、性能研究:制備羥丁基幾丁糖膜,研究其微觀結(jié)構(gòu)、力學(xué)性能、生物安全性、生物相容性、降解性能、防粘連性能及對成纖維細(xì)胞的作用。評估羥丁基幾丁糖膜作為硬腦膜替代材料的優(yōu)缺點。方法:利用明膠與溫敏性幾丁糖反向溫敏特性,采用明膠相變涂層的方式制備羥丁基幾丁糖膜,電鏡下觀察其超微結(jié)構(gòu),對其拉伸強(qiáng)度及拉伸韌性進(jìn)行檢測,與正常硬腦膜進(jìn)行比較,并探討羥丁基幾丁糖膜作為硬腦膜替代材料的生物相容性、可降解性、以及對成纖維細(xì)胞生長的影響,評估其是否具有防粘連作用。結(jié)果:羥丁基幾丁糖膜干態(tài)下呈現(xiàn)極高的拉伸強(qiáng)度,濕態(tài)下呈現(xiàn)出較好的拉伸韌性,其拉伸韌性強(qiáng)于人硬腦膜。電鏡下觀察羥丁基幾丁糖膜橫切面及縱切面均為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),呈蜂窩狀的立體結(jié)構(gòu)。羥丁基幾丁糖膜具有良好生物相容性和防粘連作用,成纖維細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示出對成纖維細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用。結(jié)論:羥丁基幾丁糖膜力學(xué)性能、生物相容性良好,對成纖維細(xì)胞生長有促進(jìn)作用,具有良好預(yù)防粘連的作用第二部分:羥丁基幾丁糖膜即時封堵腦脊液漏實驗研究目的:羥丁基幾丁糖膜即刻封堵腦脊液漏的研究:構(gòu)建兔硬腦膜缺損致腦脊液漏的動物模型,使用羥丁基幾丁糖膜修復(fù),評價羥丁基幾丁糖膜即刻封堵腦脊液漏的效果。方法:取健康成年新西蘭家兔5只,在兔顱中線兩側(cè)對稱造成兩個1.2*1.2CM顱骨缺損,暴露硬腦膜,并造成0.8*0.8CM硬腦膜及蛛網(wǎng)膜缺損,使腦脊液外漏,實驗組使用羥基丁幾丁糖膜修復(fù)硬腦膜缺損;對照組僅造成相同大小硬腦膜及蛛網(wǎng)膜缺損不做處理。再于距兩側(cè)硬腦膜缺損約3CM顱骨中線處鉆一小孔,采用頭皮針導(dǎo)管沿小孔置入蛛網(wǎng)膜下腔,用20ML注射器抽取10ML美蘭溶液緩慢沿導(dǎo)管推入蛛網(wǎng)膜下腔,觀察雙側(cè)腦脊液外滲情況。結(jié)果:羥丁基幾丁糖膜貼服性良好,可嚴(yán)密覆蓋硬腦膜缺損,實驗中向蛛網(wǎng)膜下腔注入美蘭溶液,實驗側(cè)未見腦脊液從羥丁基幾丁糖膜邊緣滲出,對照側(cè)美蘭溶液滲出明顯,5只實驗動物結(jié)果一致。結(jié)論:羥丁基幾丁糖膜可有效封堵硬腦膜缺損引起的腦脊液漏。第三部分:羥丁基幾丁糖修復(fù)硬腦膜缺損遠(yuǎn)期效果的實驗研究目的:羥丁基幾丁糖膜修復(fù)硬腦膜缺損的遠(yuǎn)期效果:構(gòu)建兔硬腦膜缺損動物模型,將羥丁基幾丁糖膜(HBCM)與臨床上使用的生物膜(牛肌腱I型膠原)進(jìn)行對照研究,評價羥丁基幾丁糖膜修復(fù)硬腦膜缺損的遠(yuǎn)期效果。方法:健康成年新西蘭兔15只,顱中線兩側(cè)對稱造成0.8×0.8CM硬腦膜缺損,左側(cè)使用羥基丁幾丁糖膜覆蓋硬腦膜缺損作為實驗組,右側(cè)使用生物膜(牛肌腱I型膠原)覆蓋缺損作為對照組,觀察術(shù)后實驗動物一般情況,術(shù)后30天、90天、180天分別處死5只實驗動物,觀察手術(shù)區(qū)域有無粘連、炎癥反應(yīng)等大體情況,切取手術(shù)區(qū)域組織行HE染色觀察,行成纖維細(xì)胞計數(shù),與正常硬腦膜進(jìn)行比較,取術(shù)后90天實驗組新生膜行電鏡觀察。結(jié)果:(1)一般情況:術(shù)后所有實驗動物狀態(tài)良好,無癱瘓、大小便失禁等神經(jīng)癥狀,未見傷口感染。(2)大體觀察:術(shù)后30天見生物膜(牛肌腱I型膠原)大部分被吸收,90天已被完全吸收,術(shù)后30天、90天、180天3個時間點均未見生物膜及其周圍慢性炎癥,3個時間點羥基丁幾丁糖膜下均可見半透明新生膜覆蓋腦組織,新生膜與腦組織及羥丁基幾丁糖膜無粘連,腦組織顏色未見明顯異常;術(shù)后180天未見羥丁基幾丁糖膜被吸收跡象,羥丁基幾丁糖膜容易取出,與周圍組織無粘連。(3)HE染色:術(shù)后30天羥丁基幾丁糖膜下新生膜中可見大量成纖維細(xì)胞及膠原纖維,術(shù)后30天生物膜側(cè)組織中可見成纖維細(xì)胞、膠原纖維及大量脂肪細(xì)胞,成纖維細(xì)胞密度較羥丁基幾丁糖膜側(cè)低;兩組成纖維細(xì)胞計數(shù)有統(tǒng)計學(xué)差異。術(shù)后180天,羥丁基幾丁糖膜下新生膜中成纖維細(xì)胞明顯減少,大量膠原纖維排列整齊,與兔硬腦膜高度相似,成纖維細(xì)胞計數(shù)較正常兔硬腦膜無統(tǒng)計學(xué)差異;術(shù)后180天生物膜(牛肌腱I型膠原)側(cè)組織中可見大量脂肪細(xì)胞,成纖維細(xì)胞及膠原纖維少,與正常兔硬腦膜相似性低,成纖維細(xì)胞計數(shù)與正常硬腦膜有統(tǒng)計學(xué)差異;術(shù)后30天、90天、180天兩組均未見明顯炎性細(xì)胞浸潤。(4)電鏡:術(shù)后90天羥丁基幾丁糖膜下新生膜電鏡下可見大量膠原纖維,排列整齊。結(jié)論:羥丁基幾丁糖膜修復(fù)兔硬腦膜缺損,不會導(dǎo)致炎癥及粘連,遠(yuǎn)期膜下有新生膜形成,新生膜與兔正常硬腦膜相似性高,可以達(dá)到修復(fù)硬腦膜缺損的遠(yuǎn)期效果。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2349035

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