發(fā)布時(shí)間：2018-10-30 07:43

【摘要】：[目的]探討椎間盤細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)來(lái)源的一體化纖維環(huán)-髓核雙相支架在裸鼠體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程一體化椎間盤的可行性,并采用PKH26熒光標(biāo)記和小動(dòng)物活體熒光成像系統(tǒng)無(wú)創(chuàng)評(píng)估組織工程化細(xì)胞-支架復(fù)合體在體內(nèi)生長(zhǎng)情況。[方法]纖維環(huán)細(xì)胞和髓核細(xì)胞分別標(biāo)記PKH26熒光,分別接種入細(xì)胞外基質(zhì)來(lái)源的一體化支架不同相中,掃描電鏡、Dead/Live熒光染色觀察細(xì)胞粘附及活性,植入裸鼠背部皮下,6周后利用分子小動(dòng)物活體熒光成像系統(tǒng)評(píng)價(jià)組織工程化組織在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)情況,取材進(jìn)行熒光顯微鏡下觀察、組織學(xué)染色。[結(jié)果]掃描電鏡觀察細(xì)胞粘附在雙相支架上且周圍有基質(zhì)分泌,Dead/Live染色示細(xì)胞在雙相支架上活性良好;6周后,活體熒光成像顯示椎間盤細(xì)胞在支架內(nèi)生長(zhǎng)良好,從髓核往纖維環(huán)熒光強(qiáng)度減弱,細(xì)胞支架復(fù)合體在裸鼠體內(nèi)形成椎間盤樣組織,HE、番紅O染色、甲苯胺藍(lán)染色陽(yáng)性。[結(jié)論]天然骨基質(zhì)明膠和軟骨基質(zhì)來(lái)源的一體化纖維環(huán)-髓核支架復(fù)合椎間盤細(xì)胞能夠在裸鼠皮下異位構(gòu)建椎間盤樣組織。
[Abstract]:[objective] to investigate the feasibility of constructing an integrated intervertebral disc in nude mice with intervertebral disc cells and extracellular matrix (ECM) derived fibro-annulus pulposus biphasic scaffolds in vivo. The growth of tissue-engineered cell-scaffold complexes in vivo was evaluated by PKH26 fluorescence labeling and small animal in vivo fluorescence imaging system. [methods] Fibroannular cells and nucleus pulposus cells were labeled with PKH26 fluorescence, respectively, and inoculated into different phases of integrated scaffold derived from extracellular matrix. Scanning electron microscopy and Dead/Live fluorescence staining were used to observe cell adhesion and activity. After 6 weeks, the growth of tissue engineered tissue in nude mice was evaluated by fluorescence imaging system of small molecular animals in vivo. The samples were observed under fluorescence microscope and stained by histology. [results] the cell adhesion to the biphasic scaffold was observed by scanning electron microscope (SEM) and there was matrix secretion around the scaffold. Dead/Live staining showed that the cell was active on the biphasic scaffold. After 6 weeks, the in vivo fluorescence imaging showed that the intervertebral disc cells grew well in the scaffold, the fluorescence intensity from the nucleus pulposus to the fibrous ring decreased, the scaffold complex formed disklike tissue in the nude mice, and HE, staining. Toluidine blue staining was positive. Conclusion the intervertebral disc cells derived from natural bone matrix gelatin and cartilage matrix can construct intervertebral disc-like tissue in nude mice subcutaneously.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;天津市天津醫(yī)院;天津理工大學(xué)機(jī)械工程學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金課題資助項(xiàng)目(編號(hào):81272046,31000432,31300798) 中國(guó)博士后科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):2011M500530,2012T50221) 天津市衛(wèi)生局科技基金項(xiàng)目(編號(hào):2013KR16)
【分類號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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1 閆中勝;徐寶山;楊強(qiáng);夏群;張春秋;賀堅(jiān);;新型組織工程椎間盤纖維環(huán)支架的制備與性能檢測(cè)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年03期

2 孫江森;李彪;龔躍昆;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記及示蹤技術(shù)的研究與進(jìn)展[J];中國(guó)組織工程研究;2012年06期

3 萬(wàn)標(biāo)林;梁偉國(guó);;組織工程椎間盤纖維環(huán)的研究進(jìn)展[J];中國(guó)矯形外科雜志;2011年19期

4 魏偉;于占革;;椎間盤髓核組織工程研究進(jìn)展[J];中國(guó)矯形外科雜志;2011年23期

5 陶風(fēng)海;孫磊;;椎間盤退變及椎間盤源性疼痛的研究進(jìn)展[J];中國(guó)矯形外科雜志;2012年11期

6 張乃麗;馬洪強(qiáng);張育敏;李寶明;周沫;王旭f;趙亞平;李寶興;;PKH26標(biāo)記BMSCs示蹤技術(shù)在構(gòu)建組織工程骨中的應(yīng)用[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2009年10期

【共引文獻(xiàn)】

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1 王晶;李超;李貴濤;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的磁標(biāo)記磁共振示蹤及其移植修復(fù)脊髓損傷的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年21期

2 徐翔;銀和平;;纖維環(huán)再生與修復(fù)方法的研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年S1期

3 劉道德;付志彬;周凌;鐘睿;王傳恩;戴瑋;;退變性腰椎管狹窄癥椎管減壓后融合固定手術(shù)療效分析[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2013年09期

4 張嶺;李琪佳;趙季華;薛榮;甘洪全;劉英杰;王志強(qiáng);;醫(yī)用多孔鉭材料復(fù)合大鼠軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng)特性及功能變化[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年06期

5 楊曉青;柯亭羽;杜娟;;干細(xì)胞示蹤在疾病中的應(yīng)用[J];昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年11期

6 劉勇;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及其在缺血性腦血管病中的研究進(jìn)展[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2014年19期

7 胡衛(wèi)華;王凈;竇駿;何向峰;趙楓殊;鄒丹丹;李曉麗;;PKH26標(biāo)記UMSC示蹤技術(shù)在細(xì)胞移植治療卵巢癌中的應(yīng)用[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2010年09期

8 梁偉國(guó);葉冬平;李鋒生;戴麗冰;沈雁;陳鴻輝;;BMP-2對(duì)人退變椎間盤髓核細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)矯形外科雜志;2012年19期

9 伍耀宏;徐寶山;楊強(qiáng);李秀蘭;張楊;馬信龍;夏群;張春秋;許海委;曾超;;PKH26標(biāo)記結(jié)合活體熒光成像技術(shù)在椎間盤組織工程研究中的應(yīng)用[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2013年02期

10 伍耀宏;徐寶山;楊強(qiáng);李秀蘭;張楊;馬信龍;夏群;閆中勝;許海委;;來(lái)源于長(zhǎng)管狀骨的組織工程纖維環(huán)支架的理化特性及細(xì)胞生物學(xué)相容性研究[J];中國(guó)矯形外科雜志;2013年03期

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2 唐成;自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）支架在軟骨組織工程中的應(yīng)用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

3 宮英;納米蓮纖維/海藻酸鹽多孔材料制備及表征[D];青島大學(xué);2014年

4 徐穩(wěn)安;骨髓來(lái)源細(xì)胞在小鼠牙髓再血管化過(guò)程中的作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

5 劉青華;去勢(shì)山羊骨質(zhì)疏松與椎間盤退變的相關(guān)性研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

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3 馮超;結(jié)冷膠水凝膠構(gòu)建可注射組織工程軟骨的研究[D];西北大學(xué);2013年

4 陶愷;大豆疫霉侵染過(guò)程的分子細(xì)胞學(xué)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

5 王海;來(lái)源于人退變椎間盤的三種干細(xì)胞與BM-MSCs生物學(xué)特性及組織工程應(yīng)用的比較研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 高凱;EGFP示蹤兔BMSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];南華大學(xué);2013年

7 許海委;脂肪干細(xì)胞向骨、軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化及新型椎間盤支架構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

8 伍耀宏;以天然骨基質(zhì)明膠/軟骨細(xì)胞外基質(zhì)復(fù)合山羊椎間盤細(xì)胞構(gòu)建一體化組織工程椎間盤的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

9 劉勇;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠皮層神經(jīng)元缺氧缺糖損傷后軸突生長(zhǎng)及AKT/GSK-3β/CRMP-2表達(dá)的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

10 馮曉延;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)免放射性肺損傷治療的研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2013年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 汪群力;裴國(guó)獻(xiàn);云雄;金丹;魏寬海;任高宏;;綠色熒光蛋白標(biāo)記骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在恒河猴體內(nèi)構(gòu)建組織工程骨的示蹤作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年02期

2 許劍;徐格林;劉新峰;;骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記示蹤技術(shù)及其應(yīng)用[J];中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué);2006年02期

3 金世柱;韓明子;曲波;裴鳳華;王新紅;;PKH26熒光示蹤劑在小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞肝內(nèi)遷移過(guò)程中標(biāo)記作用的研究[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2008年01期

4 張?jiān)扑?高建華;魯峰;朱茗;廖云君;李華;;熒光活性染料DiI標(biāo)記人脂肪干細(xì)胞[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2007年15期

5 戴江華;胡瓊?cè)A;戴閩;尹東;戴育成;張吉翔;;增強(qiáng)型綠色熒光蛋白標(biāo)記技術(shù)示蹤組織工程化骨形成[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2007年23期

6 趙鑫;黃師;嚴(yán)寧;劉超乾;侯鐵勝;;藻酸鹽凝膠支架在生物學(xué)修復(fù)椎間盤退行性變中的應(yīng)用[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年01期

7 王小蕊;侯相麟;席亞明;張海紅;;成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定與體外BrdU標(biāo)記[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年21期

8 張乃麗;李寶興;趙亞平;張康容;馬洪強(qiáng);馬紹英;劉曉明;張育敏;;生物衍生骨材料與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外的生物相容性[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年49期

9 李華壯,周躍;椎間盤組織工程研究進(jìn)展[J];中華骨科雜志;2005年05期

10 滕皋軍;居勝紅;;開展干細(xì)胞標(biāo)記和MR活體示蹤研究推進(jìn)分子影像學(xué)發(fā)展[J];中華放射學(xué)雜志;2006年02期

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2 崔建英;;細(xì)胞外基質(zhì)補(bǔ)片的臨床應(yīng)用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2009年07期

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4 劉黎;;細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)神經(jīng)纖維生長(zhǎng)的作用[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1989年01期

5 李家增;粘附蛋白及其在細(xì)胞的粘附與聚集中的作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1990年02期

6 陳金國(guó);細(xì)胞外基質(zhì)組份研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));1999年04期

7 朱辟疆;細(xì)胞外基質(zhì)與腎小球硬化[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2000年02期

8 賈繼東,尹姍姍,王寶恩;細(xì)胞外基質(zhì)基因在肝臟的表達(dá)與調(diào)控[J];世界華人消化雜志;2002年01期

9 李舒梅,文道源,羅曉婷,熊躍玲;羊膜細(xì)胞外基質(zhì)的制備與保存研究[J];眼科研究;2004年02期

10 張莉;張惠靜;管瀟;曹文軒;賴夢(mèng)君;;功能化微流控細(xì)胞芯片的構(gòu)建及初步應(yīng)用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年24期

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2 郭勇;劉璐;李瑞欣;曾強(qiáng)成;張西正;郝慶新;王亮;;細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)小鼠骨髓干細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的影響[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

3 郭勇;劉璐;李瑞欣;張春秋;張西正;王亮;;細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)小鼠骨髓干細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第三十一屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

4 邵悅;趙宗江;;細(xì)胞外基質(zhì)與腎小球硬化(摘要)[A];第十九次全國(guó)中醫(yī)腎病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2006年

5 張民珍;吾凡別克;李明昕;劉斌;;鈦合金表面仿細(xì)胞外基質(zhì)活性涂層的制備及生物學(xué)研究[A];第八屆全國(guó)口腔材料學(xué)術(shù)交流會(huì)暨中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)口腔材料專業(yè)委員會(huì)2013年會(huì)論文集[C];2013年

6 朱辟疆;;細(xì)胞外基質(zhì)與腎小球硬化[A];第六屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2000年

7 曲明娟;劉波;王漢琴;嚴(yán)志強(qiáng);姜宗來(lái);;不同頻率張應(yīng)變對(duì)血管平滑肌細(xì)胞外基質(zhì)的影響[A];中國(guó)力學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)大會(huì)'2005論文摘要集（上）[C];2005年

8 沃曉Z，

本文編號(hào)：2299380