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抗凝血納米殼聚糖微球的合成、表征及生物安全性評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2018-07-11 14:00

  本文選題:殼聚糖 + 納米結(jié)構(gòu); 參考:《中國組織工程研究》2015年47期


【摘要】:背景:有研究顯示,殼聚糖等天然多糖經(jīng)磺化改性后具有類似肝素的抗凝功能,因磺酸化后的殼聚糖其形成的磺酸根基團(tuán)與肝素的活性基團(tuán)相似,具有良好的抗凝血性。目的:制備具有抗凝血功能的納米殼聚糖微球,檢測其形態(tài)結(jié)構(gòu)、理化性能及生物安全性。方法:利用乳相法合成納米殼聚糖微球,通過磺化反應(yīng)合成磺酸化殼聚糖微球,通過透射電鏡描述其形態(tài)特征,紅外光譜觀察其特異基團(tuán)峰值變化。1凝血實(shí)驗(yàn):分別將肝素、納米殼聚糖微球及10,30,50 mg磺酸化殼聚糖微球加入SD大鼠血中,檢測凝血指標(biāo)。2溶血實(shí)驗(yàn):分別將去離子水、生理鹽水及10,30,50 g/L磺酸化殼聚糖微球浸提液加入兔2%紅細(xì)胞懸液中,檢測溶血率。3細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn):分別采用含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基及10,30,50 g/L磺酸化殼聚糖微球的浸提液培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,72 h后檢測細(xì)胞相對(duì)增殖率及毒性分級(jí)。結(jié)果與結(jié)論:掃描電鏡顯示磺酸化殼聚糖微球具有良好的形態(tài)結(jié)構(gòu),粒徑大小50 nm,紅外圖譜提示存在磺化取代。體外凝血實(shí)驗(yàn)表明磺酸化殼聚糖微球具有顯著抗凝血作用,抗凝血效果呈劑量效應(yīng)關(guān)系;撬峄瘹ぞ厶俏⑶蚍蠂鴺(biāo)關(guān)于溶血率小于5%的安全標(biāo)準(zhǔn),無致溶血性。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明磺酸化殼聚糖微球浸提液無明顯細(xì)胞毒性,其生物安全性符合國家標(biāo)準(zhǔn)。
[Abstract]:Background: studies have shown that chitosan and other natural polysaccharides modified by sulfonation have heparin-like anticoagulant function, because the sulfonic acid group formed by the sulfated chitosan is similar to the active group of heparin, so it has good anticoagulant effect. Aim: to prepare nano-chitosan microspheres with anticoagulant function, and to detect their morphology, physical and chemical properties and biological safety. Methods: Nano-chitosan microspheres were synthesized by emulsion method and sulfonated chitosan microspheres were synthesized by sulfonation reaction. The morphologic characteristics of chitosan sulfonated microspheres were described by transmission electron microscope. The peak changes of specific groups were observed by IR spectra. Nano-chitosan microspheres and 1030g / L sulfated chitosan microspheres were added to SD rats' blood. The blood coagulation index (.2) hemolysis test was performed: deionized water, normal saline and 1030g / L sulfonated chitosan microspheres were added to 2% red blood cell suspension of rabbits, respectively. The cytotoxicity of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) was determined by DMEM medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) and extraction solution of 1030g / L sulfonic chitosan microspheres for 72 h. Results and conclusion: scanning electron microscope showed that the sulfonated chitosan microspheres had a good morphology, and the particle size was 50 nm. The infrared spectra indicated the existence of sulfonation substitution. In vitro clotting test showed that the sulfonic chitosan microspheres had a significant anticoagulant effect, and the anticoagulant effect was in a dose-dependent manner. The sulfonic chitosan microspheres meet the safety standard of hemolysis rate less than 5%, and no hemolysis. The cytotoxicity test showed that the extractant of sulfonic chitosan microspheres had no obvious cytotoxicity and its biological safety was in line with the national standard.
【作者單位】: 解放軍總醫(yī)院南樓綜合外科;解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;
【分類號(hào)】:R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2115435

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