本文選題：PLGA + 納米　； 參考：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2013年博士論文

【摘要】：創(chuàng)傷性或醫(yī)源性的硬脊膜缺損在脊柱及神經(jīng)外科有一定的發(fā)生率，處理不當(dāng)可引發(fā)持續(xù)性腦脊液漏、低顱內(nèi)壓綜合征、急性氣道阻塞、腦脊液囊腫、粘連性蛛網(wǎng)膜炎、椎管內(nèi)感染、甚至危及生命的化膿性腦膜炎等一系列并發(fā)癥。然而對于硬脊膜缺損的治療，，由于硬脊膜的不可再生性、現(xiàn)有的硬脊膜替代材料均無模仿天然硬脊膜空間結(jié)構(gòu)的設(shè)計理念以及缺乏理想的修復(fù)方法，導(dǎo)致目前在臨床上不同程度的存在治療療程長、痛苦大、組織愈合的形式以疤痕組織為主以及痊愈的標(biāo)準(zhǔn)也僅僅是腦脊液漏停止等諸多不足。硬脊膜缺損的 高質(zhì)量‖（既能實現(xiàn)術(shù)后硬脊膜再生、預(yù)防硬膜外粘連及瘢痕，又能實現(xiàn)術(shù)中有效封堵）依然是臨床亟待解決的難題。要想實現(xiàn)硬脊膜的再生，必須先明確硬脊膜的空間結(jié)構(gòu)及表觀形貌特征，并以此構(gòu)建與之空間構(gòu)象近似的替代材料；而要想實現(xiàn)術(shù)中有效封堵，必須研制出一種理想的修復(fù)方法；同時，要想預(yù)防硬膜外粘連及瘢痕形成，替代材料必須兼具此功能。由于硬脊膜主要由膠原基質(zhì)和成纖維細(xì)胞組成，其膠原束具有特殊的取向性結(jié)構(gòu)，因此本項目提出采用具有不同功能的雙層復(fù)合PLGA納米纖維膜片和組織工程技術(shù)來構(gòu)建組織工程化人工硬脊膜，結(jié)合粘合力強且具有排水性能的貽貝粘蛋白生物膠，來實現(xiàn)硬脊膜再生及術(shù)中有效封堵。擬構(gòu)建的硬脊膜替代材料設(shè)計為雙層結(jié)構(gòu)：內(nèi)層（修復(fù)層）專司硬脊膜的再生，利于靜電紡絲法制備與天然硬脊膜結(jié)構(gòu)近似的有 取向性‖（有序）的聚乳酸/乙醇酸共聚物（PLGA）納米纖維膜，作為組織工程支架，促使種子細(xì)胞（成纖維細(xì)胞）接種后所合成的膠原束也呈取向性分布，使新生組織接近天然硬脊膜；外層（加強層）應(yīng)用無 取向性‖（無序）PLGA-殼聚糖納米纖維膜片，專司增強內(nèi)層力學(xué)性能、預(yù)防硬膜外粘連及瘢痕形成；內(nèi)外層之間采用非縫合膠粘技術(shù)（貽貝粘蛋白），既可將外層與硬脊膜牢固粘合成一體，又能避免粘合膠與腦脊液直接接觸以及人為封閉膜體風(fēng)險，以期實現(xiàn)術(shù)中快速、確切的封閉硬脊膜囊。 研究目的：構(gòu)建與羊硬脊膜空間結(jié)構(gòu)近似的復(fù)合組織工程化PLGA納米纖維膜，評價體內(nèi)回植修復(fù)羊硬脊膜缺損的效果。 研究方法：①獲取山羊硬脊膜的表觀形貌及三維結(jié)構(gòu)：成年山羊硬脊膜取材，對標(biāo)本進(jìn)行肉眼觀察、組織學(xué)觀察、掃描電鏡以及透射電鏡觀察。②3種人工硬脊膜的制備及評價：利用靜電紡絲法制備有序及無序PLGA納米纖維膜；殼聚糖溶液單面涂層無序PLGA納米纖維膜片，制備PLGA-殼聚糖膜片；手工撕成單絲的無紡PGA纖維，以同一方向均勻纏繞于特制U型鋼絲，制備有序PGA纖維膜片。對有序及無序PLGA納米纖維膜片進(jìn)行物理性能及生物相容性檢測。③3種組織工程化人工硬脊膜體外構(gòu)建：將體外分離、擴增的山羊皮膚成纖維細(xì)胞，作為種子細(xì)胞，分別接種于有序PLGA、無序PLGA納米纖維膜以及有序PGA纖維膜上，觀察種子細(xì)胞在支架材料上的黏附、生長及基質(zhì)分泌等情況。④組織工程化人工硬脊膜修復(fù)羊硬脊膜缺損的系列實驗:1）將9只成年山羊隨機分為3組：有序PLGA組、無序PLGA組及有序PGA組，分別采用上述3種膜片作為內(nèi)層覆蓋山羊腰段硬脊膜缺損（0.6cm×0.5cm），然后以無序PLGA-殼取糖膜片作為外層，涂抹貽貝粘蛋白粘貼于硬脊膜缺損周緣；術(shù)后1月取材，對術(shù)后并發(fā)癥、封堵效果、與周圍組織粘連、炎性反應(yīng)、材料降解以及硬脊膜的再生質(zhì)量等進(jìn)行評價。2）對3種膜片中修復(fù)效果最佳者進(jìn)行再次分組：組織工程化材料組、單純材料組，體內(nèi)回植于6只山羊，術(shù)后3月取材，按前述方法對其進(jìn)行評價。3）將實驗二中效果最佳膜片再次進(jìn)行山羊體內(nèi)回植，評價其遠(yuǎn)期療效（6個月）。 結(jié)果：①山羊硬脊膜主要由膠原纖維及散在分布的成纖維細(xì)胞組成的半透明薄膜，膠原纖維直徑介于400nm～1000nm之間，呈 取向性‖排列，微觀下可見硬脊膜內(nèi)外表面呈連}坎歡系納椒濉＂誆捎鎂駁綬乃糠ǔ曬χ票賦鲇胩烊揮布鼓と占浣峁梗ń涸本都芭帕校┙頻撓行虻腜LGA納米纖維膜片以及無序PLGA納米纖維膜片，二種膜片均具有良好的生物相容性及力學(xué)性能；成功制備出PLGA-殼聚糖膜片。③成功構(gòu)建組織工程化有序PLGA、無序PLGA及有序PGA人工硬脊膜膜片。④術(shù)后1月取材，證實組織工程化有序PLGA膜優(yōu)于組織工程化無序PLGA膜，組織工程化無序PLGA膜優(yōu)于組織工程化PGA膜。⑤術(shù)后3月取材，證實組織工程化有序PLGA膜優(yōu)于單純有序PLGA膜。⑥術(shù)后6月取材，證實組織工程化有序PLGA膜體內(nèi)回植再生膜的表觀形貌及三維結(jié)構(gòu)與天然硬脊膜高度相似。 結(jié)論：復(fù)合組織工程化PLGA納米纖維膜實現(xiàn)了真正意義的硬脊膜再生以及達(dá)到預(yù)防硬膜外瘢痕及粘連的目的，非縫合技術(shù)應(yīng)用（貽貝粘蛋白）可顯著減少術(shù)后腦脊液漏發(fā)生率。
[Abstract]:鍒涗激鎬ф垨鍖繪簮鎬х殑紜剨鑶滅己鎹熷湪鑴婃煴鍙婄緇忓縐戞湁涓

本文編號：2099579