自體BMSCs復(fù)合改建脫細胞真皮基質(zhì)體內(nèi)構(gòu)建組織工程軟骨的實驗研究
本文選題:脫細胞真皮基質(zhì) + BMSCs ; 參考:《中國矯形外科雜志》2014年12期
【摘要】:[目的]目的:探討B(tài)MSCs復(fù)合脫細胞真皮基質(zhì)(ADM)三維多孔支架體內(nèi)構(gòu)建組織工程軟骨的可行性。[方法]首先對支架材料進行大體及掃描電鏡觀察,分別測定支架的孔隙直徑、孔隙率、降解率;其次,分離培養(yǎng)兔骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs),采用掃描電鏡及MTT法檢測BMSCs在支架材料上的生長、增殖情況;最后取3個月齡清潔級新西蘭大白兔27只,雌性,體質(zhì)量(2.4±0.2)kg,隨機分為3組,即A組:空白對照組(僅髁部造缺損),B組:單純ADM覆蓋,C組:ADM+BMSCs,細胞支架復(fù)合物體外培養(yǎng)1周后植入兔股骨髁軟骨缺損處,分別在4、8、12周后對標本進行組織學(xué)、免疫化學(xué)檢測及ICRS評分。[結(jié)果]測量示支架孔隙直徑為(101.2±9.3)um,孔隙率為88.6%±2.7%,降解率2周為(13.83±7.12)%,4周為(25.66±8.19)%。MTT法顯示細胞在支架上生長良好,與對照組相比,吸光度值差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),提示支架相容性良好,無細胞毒性。經(jīng)過最長12周培養(yǎng)后取材進行組織學(xué)、免疫化學(xué)檢測,結(jié)果顯示ADM+BMSCs組軟骨缺損獲得了更為滿意的修復(fù)效果:關(guān)節(jié)表面平坦光滑,與周圍組織未見明顯界限;組織學(xué)染色證實軟骨基質(zhì)分泌旺盛并有典型軟骨細胞形成,組織結(jié)構(gòu)類似正常關(guān)節(jié)軟骨,ADM+BMSCs組術(shù)后第4、8、12周ICRS評分均高于其他兩組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]ADM孔隙均勻,組織相容性好,適于細胞粘附及長期生長,是一種適用于軟骨組織工程的良好載體。BMSCs-ADM支架復(fù)合體在體內(nèi)成功構(gòu)建組織工程軟骨,可進一步用于軟骨組織工程研究。
[Abstract]:Objective: to investigate the feasibility of constructing tissue engineered cartilage with BMSCs combined with acellular dermal matrix (ADM) in vivo. [methods] the pore diameter, porosity and degradation rate of the scaffold were measured by scanning electron microscope (SEM), and the pore diameter of the scaffold was measured by scanning electron microscope (SEM). Rabbit bone marrow stromal cells (BMSCs) were isolated and cultured. The growth and proliferation of BMSCs on scaffold materials were detected by scanning electron microscope and MTT method. At last, 27 New Zealand white rabbits of 3 months old, female, with body weight of (2.4 鹵0.2) kg, were randomly divided into 3 groups. Group A: blank control group (condylar defect only) group B: ADM overlay C group: group C: ADM BMSCsThe scaffold complex was cultured in vitro for 1 week, then implanted into rabbit femoral condylar cartilage defect, and the specimens were histologically carried out after 812 weeks. Immunohistochemical examination and ICRS score. [results] the pore diameter of scaffold was (101.2 鹵9.3) umum, porosity was 88.6% 鹵2.7, degradation rate was (13.83 鹵7.12) weeks and (25.66 鹵8.19) 路MTT assay showed that the cells grew well on the scaffold. There was no significant difference in absorbance between the two groups (P0.05), suggesting that the scaffold had good compatibility. No cytotoxicity. The results showed that the cartilage defect of ADM BMSCs group was more satisfactory: the articular surface was flat and smooth, and there was no obvious boundary between the cartilage defect of ADM BMSCs group and surrounding tissue. Histological staining confirmed that cartilage matrix secretion exuberant and typical chondrocyte formation, tissue structure similar to the normal articular cartilage ADM BMSCs group were higher than the other two groups at 12 weeks after operation, the difference was statistically significant (P0.05). [conclusion] ADM has uniform pore, good histocompatibility, suitable for cell adhesion and long-term growth. It is a good carrier for cartilage tissue engineering. BMSCs-ADM scaffold complex can successfully construct tissue engineered cartilage in vivo. It can be further used in cartilage tissue engineering.
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)一中心臨床學(xué)院;天津醫(yī)科大學(xué)一中心臨床學(xué)院衛(wèi)生部危重病急救醫(yī)學(xué)重點實驗室;天津市第一中心醫(yī)院骨科;
【基金】:天津市衛(wèi)生局科技基金重點攻關(guān)課題(編號:11KG109)
【分類號】:R318.08
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:2089873
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