本文選題：納米羥基磷灰石 + 復(fù)合材料��； 參考：《濱州醫(yī)學(xué)院》2012年碩士論文

【摘要】：目的： 牙體充填材料與人體尤其是口腔黏膜組織長(zhǎng)期接觸,理想的修復(fù)材料應(yīng)具有良好的生物相容性以及生物學(xué)活性。納米羥基磷灰石作為一種生物活性材料,以其優(yōu)異的性能在牙科和骨科領(lǐng)域展現(xiàn)出誘人的應(yīng)用前景,將其賦予更強(qiáng)的機(jī)械性能后即可應(yīng)用于牙體缺損的修復(fù)。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)醫(yī)用生物材料(植入體)安全性評(píng)價(jià)的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn),初步評(píng)價(jià)該牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料的生物相容性,為該材料的最終臨床應(yīng)用的安全性提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 實(shí)驗(yàn)1牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料的制備：將經(jīng)過(guò)硅烷偶聯(lián)劑KH-570進(jìn)行表面處理后的納米羥基磷灰石(Nano-hydroxyapatite, NHA)與光固化有機(jī)基質(zhì)共混,制備成復(fù)合材料(由質(zhì)量份數(shù)55：45的納米羥基磷灰石與樹脂基體所構(gòu)成),遮光密封于玻璃容器中備用,將實(shí)驗(yàn)材料在模具中制備成直徑15.Omm±0.1mm,高3.0±0.1mm的圓柱形試件,光照固化,備用。 實(shí)驗(yàn)2材料浸提液的提取：取實(shí)驗(yàn)試件20個(gè),經(jīng)測(cè)量計(jì)算后其平均表面積為4.95cm2,試件經(jīng)過(guò)超聲清洗、干燥、高壓滅菌處理后放入2個(gè)無(wú)菌廣口瓶中,每瓶10個(gè)試件,按照材料表面積與浸提介質(zhì)之比為1cm2/ml分別加入生理鹽水49.50m1,置于37℃培養(yǎng)箱中浸提72h,過(guò)濾,分裝,放入37℃恒溫箱保存?zhèn)溆谩?實(shí)驗(yàn)3急性全身毒性實(shí)驗(yàn)：將浸提液通過(guò)尾靜脈注射給予大鼠,在注射后即刻、24、48、72小時(shí)觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠的一般狀態(tài)、毒性表現(xiàn)和死亡動(dòng)物數(shù),以及72小時(shí)后的動(dòng)物體重。 實(shí)驗(yàn)4熱原實(shí)驗(yàn)：自大鼠尾靜脈按1ml劑量注入浸提液,注射后測(cè)量體溫,每隔30min測(cè)量一次,連續(xù)6次,6次體溫中最高的一次減去正常體溫為為試驗(yàn)大鼠體溫升高值,測(cè)試環(huán)境22℃。 實(shí)驗(yàn)5過(guò)敏實(shí)驗(yàn)：受試動(dòng)物平均分為兩組,實(shí)驗(yàn)組注射浸提液,對(duì)照組經(jīng)相同時(shí)間點(diǎn)注射同等質(zhì)量的生理鹽水,經(jīng)過(guò)供試品的兩步誘導(dǎo)和激發(fā)后,觀察激發(fā)部位皮膚情況。 實(shí)驗(yàn)6口腔黏膜刺激實(shí)驗(yàn)：將實(shí)驗(yàn)材料(牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料)和對(duì)照材料(卡瑞斯瑪復(fù)合樹脂)經(jīng)過(guò)高壓滅菌處理后縫合至大鼠口腔兩側(cè)頰黏膜表面,術(shù)后14d觀察粘膜有無(wú)充血糜爛及潰瘍、水腫反應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)7皮膚刺激試驗(yàn)：在受試大鼠椎旁兩側(cè)對(duì)稱位置處選3個(gè)注射點(diǎn),間距1cm,分別注射浸提液以及生理鹽水,注射劑量均為1m1,分別于注射后24、48、72h觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物的皮膚刺激情況并且分級(jí)。 實(shí)驗(yàn)8骨埋植實(shí)驗(yàn)：將消毒后的受試材料(牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料)和對(duì)照材料(卡瑞斯瑪復(fù)合樹脂)分別埋植在大鼠股骨內(nèi),在規(guī)定時(shí)間點(diǎn)(1w,2w,4w)取材行大體標(biāo)本觀察和病理組織切片,以評(píng)價(jià)材料植入后的局部反應(yīng)與動(dòng)物機(jī)體的組織相容性。 實(shí)驗(yàn)9肌肉埋植實(shí)驗(yàn)：將測(cè)試樣品和對(duì)照樣品分別無(wú)菌植入受試動(dòng)物的左右兩側(cè)腿部肌肉中,在植入后1、2、4周時(shí)進(jìn)行植入部位組織實(shí)驗(yàn)室觀察和病理解剖,并對(duì)觀察結(jié)果進(jìn)行分析； 實(shí)驗(yàn)10體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)(MTT)：根據(jù)ISO標(biāo)準(zhǔn)采用體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)(MTT法),測(cè)試人牙齦成纖維細(xì)胞在牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料浸提液中培養(yǎng)1、3、5d的吸光度值(OD值),觀察細(xì)胞形態(tài)變化,計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率并進(jìn)行細(xì)胞毒性分級(jí)。 結(jié)果： 1、在急性全身毒性實(shí)驗(yàn)中,注射后所有動(dòng)物于各觀察時(shí)間點(diǎn)(24h,48h,72h)一般狀況良好,實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物癥狀和體重的變化都在可接受的范圍之內(nèi),均沒(méi)有出現(xiàn)毒性反應(yīng),無(wú)動(dòng)物死亡,可以認(rèn)為新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料無(wú)急性全身毒性作用。 2、熱原實(shí)驗(yàn)中6只大鼠中無(wú)1只在注射后體溫升高超過(guò)0.4℃,而且每3只大鼠的體溫升高總和均小于1.4℃,可以認(rèn)為新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料沒(méi)有致熱性。 3、過(guò)敏實(shí)驗(yàn)中末次注射后所有實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物一般情況良好,均未出現(xiàn)豎毛、抽搐、噴嚏、呼吸困難、用爪搔鼻、休克、大小便失禁、死亡等反應(yīng),可認(rèn)為該新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料對(duì)機(jī)體無(wú)致敏性。 4、口腔黏膜刺激實(shí)驗(yàn)中所有受試動(dòng)物均未出現(xiàn)全身不良反應(yīng),實(shí)驗(yàn)試樣均無(wú)松動(dòng),無(wú)脫落,與實(shí)驗(yàn)試樣相接觸的頰黏膜未見(jiàn)粗糙、紅腫、糜爛及潰瘍反應(yīng),可認(rèn)為該新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料對(duì)口腔黏膜無(wú)刺激性。 5、皮膚刺激實(shí)驗(yàn)局部注射24、48、72h后,材料浸提液組及生理鹽水組的每個(gè)注射點(diǎn)均沒(méi)有紅斑、水腫、滲液及潰爛等情況出現(xiàn),都未發(fā)現(xiàn)明顯皮膚刺激癥狀,表明該新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料對(duì)皮膚無(wú)刺激作用。 6、骨埋植和肌肉埋植實(shí)驗(yàn)中,材料被植入后未見(jiàn)周圍組織明顯壞死,1周時(shí)有輕度炎癥反應(yīng),隨時(shí)間推移,炎癥反應(yīng)逐漸消退。結(jié)果表明,新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料在局部植入后有良好的組織相容性。 7、體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比均未發(fā)現(xiàn)明顯形態(tài)差異。定量測(cè)試結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)品毒性為0-1級(jí),定量測(cè)試和定性測(cè)試的結(jié)果均表明該新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料對(duì)生物機(jī)體無(wú)明顯細(xì)胞毒性。 結(jié)論： 本實(shí)驗(yàn)初步證明該新型牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料在本研究的實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)生物機(jī)體無(wú)致熱性、無(wú)致敏性、無(wú)刺激性,無(wú)明顯急性毒性,局部植入后有良好的組織相容性,無(wú)明顯細(xì)胞毒性。上述各實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明該新型的牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料對(duì)機(jī)體組織無(wú)明顯毒害作用,具有較高的生物安全性和良好的組織相容性,為進(jìn)一步臨床實(shí)驗(yàn)提供了可靠的安全性數(shù)據(jù)。
[Abstract]:Objective:
Dental filling materials are in long term contact with the human body, especially the oral mucosa. The ideal restorative material should have good biocompatibility and biological activity. As a biological active material, nano hydroxyapatite is used as a bioactive material, and its excellent performance is shown in the field of Dentistry and Department of orthopedics. The experiment can be applied to the repair of dental defect. This experiment is based on the standards of medical biomaterial (implant) safety evaluation, and evaluates the biocompatibility of the restorative nano hydroxyapatite composite material, which provides the theoretical basis and experimental basis for the safety of the final clinical application of the material.
Method錛，

本文編號(hào)：1967136