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草魚膠原蛋白的生物學(xué)性能及膠原海綿材料的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2018-05-30 22:33

  本文選題:草魚 + 魚皮; 參考:《武漢工業(yè)學(xué)院》2012年碩士論文


【摘要】:膠原蛋白是生物體內(nèi)重要的結(jié)構(gòu)蛋白。近年來,膠原蛋白作為生物材料在醫(yī)學(xué)組織工程中的應(yīng)用日益廣泛。本論文以草魚魚皮、魚鱗、魚骨為原料分別制備酸溶性膠原蛋白(SKA、SCA、BOA)和酶溶性膠原蛋白(SKP、SCP、BOP),對其結(jié)構(gòu)特征、基本理化性質(zhì)、體外酶降解性、細(xì)胞增殖能力等生物學(xué)性能進(jìn)行了系統(tǒng)研究并與豬皮膠原蛋白(PSP)相比較。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步開展了魚皮膠原海綿材料構(gòu)建、性能表征及其材料交聯(lián)改性的相關(guān)研究,以期為淡水魚膠原蛋白在生物醫(yī)學(xué)材料中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。研究方法和結(jié)果如下: 低溫條件下,分別采用酸提取和酸-酶復(fù)合提取法分離得到七種膠原蛋白樣品(SKP、SKA、SCA、SCP、BOA、BOP、PSP),其中魚皮膠原蛋白的提取得率(39.66%,以干基計(jì)算)遠(yuǎn)高于魚鱗(2.8%)、魚骨(1.6%)。通過紅外光譜、紫外光譜、SDS電泳分析,表明提取所得的七種種膠原樣品均為典型的Ⅰ型膠原,并具有較高的純度。氨基酸組成和肽譜分析表明,草魚膠原蛋白與豬皮膠原蛋白在氨基酸組成方面存在差異性,但草魚不同部位來源、不同提取方法制備的膠原蛋白在結(jié)構(gòu)上高度接近。 通過測定溶解性、吸水性、持水性、熱穩(wěn)定性、特性粘度,比較了七種膠原蛋白在基本理化性質(zhì)上的共性和差異性。結(jié)果表明,草魚膠原蛋白(SKA,SKP,SCA,SCP,BOA,BOP)具有較豬皮膠原(PSP)更好的吸水性、持水性;草魚膠原蛋白在NaCl濃度大于4%或中性pH條件下即出現(xiàn)明顯的沉淀現(xiàn)象,溶解度幾乎為零;草魚皮膠原蛋白的特性粘度值與豬皮膠原蛋白很接近,但交疊濃度較小。膠原酶體外降解實(shí)驗(yàn)表明,草魚膠原蛋白與豬皮膠原蛋白樣品降解性能相似,最大降解率均達(dá)到60%(除BOA外)。通過MTT法檢測膠原蛋白對細(xì)胞增殖的影響,結(jié)果表明草魚膠原蛋白無細(xì)胞毒性且能促進(jìn)細(xì)胞生長。 以草魚魚皮膠原SKA、SKP和豬皮PSP為原料,在相同條件下制備干燥成型的膠原海綿材料,分別通過SEM顯微觀察和機(jī)械強(qiáng)度測定來表征材料性能,結(jié)果顯示三種海綿材料均具有多孔、纖維結(jié)構(gòu),,而SKA、SKP表現(xiàn)了較PSP更高的拉伸強(qiáng)度。 在此基礎(chǔ)上,以SKP為原料制備膠原海綿材料,并分別采用紫外照射、熱脫水、戊二醛、EDC-NHS等四種交聯(lián)改性方法對其進(jìn)行材料改性處理。通過測定材料機(jī)械性能、微觀結(jié)構(gòu)、體外降解性能及熱穩(wěn)定性,考察不同交聯(lián)方法對材料性能的影響。結(jié)果表明,交聯(lián)改性后的材料性能均得到了不同程度的改善。在幾種交聯(lián)方法中,戊二醛交聯(lián)表現(xiàn)出較好的材料性能改善能力,其交聯(lián)度達(dá)72%,材料機(jī)械性能明顯增強(qiáng),變性溫度由原始材料的35.57℃升高至67.41℃。
[Abstract]:Collagen is an important structural protein in organism. In recent years, collagen, as a biomaterial, has been widely used in medical tissue engineering. In this paper, acid soluble collagen (SKA) and enzyme soluble collagen (SKP) were prepared from grass carp skin, fish scales and fish bone respectively. Cell proliferation and other biological properties were systematically studied and compared with porcine skin collagen protein (PSP). On this basis, further studies on the construction, characterization and cross-linking modification of fish skin collagen sponge were carried out in order to provide a theoretical basis for the application of freshwater fish collagen in biomedical materials. The methodology and results of the study are as follows: At low temperature, seven kinds of collagen samples were isolated by acid extraction and acid-enzyme complex extraction, respectively. The extraction rate of collagen from fish skin was 39.66 (calculated on dry basis) and was much higher than that of fish scales (2.8%) and fish bone (1.610%). The results of IR, UV and SDS electrophoresis showed that the seven collagen samples were typical type 鈪

本文編號:1957117

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